摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
第1章 文献综述 | 第9-17页 |
1.1 蜱类简介 | 第9页 |
1.2 褐黄血蜱生物学特性 | 第9-10页 |
1.3 蜱的鉴定 | 第10-12页 |
1.3.1 蜱的形态鉴定 | 第10-11页 |
1.3.2 蜱的分子生物学鉴定 | 第11-12页 |
1.4 4D8及编码蛋白Subolesin | 第12-16页 |
1.4.1 4D8与Subolesin的简介 | 第13-15页 |
1.4.2 4D8的分布 | 第15页 |
1.4.3 Subolesin的同源蛋白 | 第15页 |
1.4.4 4D8与Subolesin的结构 | 第15页 |
1.4.5 Subolesin的功能 | 第15-16页 |
1.5 展望 | 第16-17页 |
第2章 褐黄血蜱的形态学与分子生物学鉴定 | 第17-26页 |
2.1 材料与方法 | 第17-20页 |
2.1.1 褐黄血蜱 | 第17页 |
2.1.2 主要仪器 | 第17页 |
2.1.3 主要试剂 | 第17页 |
2.1.4 引物 | 第17-18页 |
2.1.5 形态学鉴定 | 第18页 |
2.1.6 分子生物学鉴定 | 第18-20页 |
2.2 结果与分析 | 第20-24页 |
2.2.1 蜱形态学鉴定 | 第20-21页 |
2.2.2 分子生物学鉴定 | 第21-24页 |
2.3 讨论 | 第24-26页 |
第3章 褐黄血蜱4D8的全长克隆 | 第26-45页 |
3.1 材料 | 第26-27页 |
3.1.1 褐黄血蜱 | 第26页 |
3.1.2 主要试剂 | 第26页 |
3.1.3 主要仪器 | 第26页 |
3.1.4 引物设计 | 第26-27页 |
3.2 方法 | 第27-31页 |
3.2.1 总RNA提取 | 第27-28页 |
3.2.2 cDNA第一链的合成 | 第28页 |
3.2.3 4D8基因ORF的扩增 | 第28-29页 |
3.2.4 克隆测序 | 第29页 |
3.2.5 4D8基因3'RACE操作 | 第29-30页 |
3.2.6 4D8基因5'RACE操作 | 第30页 |
3.2.7 褐黄血蜱4D8基因的全长 | 第30页 |
3.2.8 微小牛蜱、镰形扇头蜱和中华革蜱4D8基因的全长 | 第30-31页 |
3.3 结果与分析 | 第31-42页 |
3.3.1 总RNA检测结果 | 第31页 |
3.3.2 4D8基因ORF的扩增条件 | 第31-32页 |
3.3.3 4D8基因的ORF序列 | 第32页 |
3.3.4 3'端扩增结果 | 第32-33页 |
3.3.5 3'端的测序结果 | 第33页 |
3.3.6 5'端扩增结果 | 第33-34页 |
3.3.7 5'端的测序结果 | 第34页 |
3.3.8 褐黄血蜱的4D8全长 | 第34-35页 |
3.3.9 褐黄血蜱4D8基因分析 | 第35-37页 |
3.3.10 微小牛蜱、镰形扇头蜱及中华革蜱的4D8全长 | 第37-39页 |
3.3.11 蜱类4D8基因编码蛋白(Subolesin)的分析 | 第39-42页 |
3.4 讨论 | 第42-45页 |
第4章 褐黄血蜱4D8的差异表达 | 第45-54页 |
4.1 材料和方法 | 第45-47页 |
4.1.1 褐黄血蜱 | 第45页 |
4.1.2 主要试剂 | 第45页 |
4.1.3 主要仪器 | 第45页 |
4.1.4 RT-PCR引物 | 第45页 |
4.1.5 蜱各器官的分离 | 第45-46页 |
4.1.6 总RNA提取 | 第46页 |
4.1.7 cDNA第—链合成 | 第46页 |
4.1.8 制备标准曲线 | 第46-47页 |
4.1.9 褐黄血蜱4D8差异表达分析 | 第47页 |
4.2 结果与分析 | 第47-52页 |
4.2.1 总RNA的纯度与浓度检查 | 第47-48页 |
4.2.2 总RNA的完整性检查 | 第48-49页 |
4.2.3 建立标准曲线的结果 | 第49-50页 |
4.2.4 定量反应过程中的溶解曲线 | 第50页 |
4.2.5 相对定量反应的结果 | 第50-51页 |
4.2.6 4D8的表达水平柱状图 | 第51-52页 |
4.3 结论 | 第52-54页 |
第5章 结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-62页 |
附录 | 第62-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
作者简介 | 第69页 |