| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 缩略语对照表 | 第10-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-22页 |
| 1.1 细菌锌离子稳态的研究进展 | 第13-18页 |
| 1.1.1 锌离子在细菌中的重要作用 | 第13页 |
| 1.1.2 细菌中锌离子转运系统 | 第13-16页 |
| 1.1.3 ZnuA蛋白结构特性 | 第16页 |
| 1.1.4 细菌中锌离子的调控 | 第16-18页 |
| 1.2 细菌锌离子转运系统与感染的关系 | 第18-20页 |
| 1.3 锌离子转运系统在抗菌治疗上的应用 | 第20页 |
| 1.4 铜绿假单胞菌简介 | 第20-21页 |
| 1.5 研究内容及意义 | 第21-22页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第22-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-26页 |
| 2.1.1 菌株、质粒和引物 | 第22-24页 |
| 2.1.2 培养基配方 | 第24-25页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第25-26页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第26页 |
| 2.2 基本的实验方法 | 第26-34页 |
| 2.2.1 质粒提取及DNA纯化 | 第26页 |
| 2.2.2 蛋白序列分析 | 第26-27页 |
| 2.2.3 反转录PCR | 第27-28页 |
| 2.2.4 突变体的构建 | 第28-30页 |
| 2.2.5 菌体生长水平检测 | 第30页 |
| 2.2.6 基因表达载体的构建 | 第30-31页 |
| 2.2.7 基因表达水平的检测 | 第31-32页 |
| 2.2.8 过氧化氢敏感性检测 | 第32页 |
| 2.2.9 外膜稳定性检测 | 第32-33页 |
| 2.2.10 毒性检测(果蝇感染模型) | 第33-34页 |
| 第三章 实验结果 | 第34-50页 |
| 3.1 铜绿假单胞菌中锌离子转运系统的生物信息学分析 | 第34-37页 |
| 3.1.1 PAO1中锌离子转运系统ZnuABC和PA2403-2410的基因组成 | 第34-35页 |
| 3.1.2 锌离子转运系统中各蛋白保守结构域分析 | 第35-37页 |
| 3.2 PA2403-2410共转录情况检测 | 第37-38页 |
| 3.3 突变体的构建 | 第38-40页 |
| 3.4 锌离子转运系统对PAO1生长的影响 | 第40-42页 |
| 3.5 不同浓度锌离子对锌离子转运系统表达的影响 | 第42-43页 |
| 3.6 锌离子转运系统PA2403-2410的调控 | 第43-45页 |
| 3.7 过氧化氢敏感性检测 | 第45-47页 |
| 3.8 外膜稳定性检测 | 第47-49页 |
| 3.9 锌离子转运系统对PAO1致病性的影响 | 第49-50页 |
| 第四章 结论 | 第50-56页 |
| 4.1 PAO1中锌离子转运系统的生物信息学分析 | 第50-52页 |
| 4.2 PA2403-2410共转录情况检测 | 第52页 |
| 4.3 锌离子转运系统的对PAO1生长的影响 | 第52-53页 |
| 4.4 锌离子转运系统的表达和调控 | 第53-54页 |
| 4.5 锌离子转运系统与H_2O_2敏感性和外膜稳定性的关系 | 第54-55页 |
| 4.6 锌离子转运系统的缺失导致PAO1致病性降低 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-64页 |
| 攻读硕士期间取得的科研成果 | 第64-65页 |
| 第五章 致谢 | 第65页 |
