中文摘要 | 第1-11页 |
英文摘要 | 第11-13页 |
1. 引言 | 第13-24页 |
·产气荚膜梭菌概述 | 第13页 |
·产气荚膜梭菌致病性 | 第13-16页 |
·产气荚膜梭菌病在国内外流行状况 | 第16-18页 |
·产气荚膜梭菌主要毒素蛋白的介绍 | 第18-20页 |
·产气荚膜梭菌致病机理及防控措施 | 第20-23页 |
·研究的目的及意义 | 第23-24页 |
2. 材料 | 第24-27页 |
·菌种与培养基 | 第24-25页 |
·产气荚膜梭菌菌种 | 第24页 |
·%绵羊血平板 | 第24页 |
·产毒培养基——Gordon汤 | 第24页 |
·硫乙醇酸盐流体培养基 | 第24页 |
·硫乙醇酸盐培养基(T.G) | 第24-25页 |
·葡萄糖蛋白胨培养基(G.P) | 第25页 |
·酪素胰酶消化液(G.A) | 第25页 |
·实验动物 | 第25页 |
·主要仪器 | 第25页 |
·试剂的配制 | 第25-27页 |
3. 方法 | 第27-37页 |
·C型产气荚膜梭菌类毒素疫苗的制备 | 第27-31页 |
·菌种复苏 | 第27页 |
·硫乙醇酸盐流体培养基中增菌 | 第27页 |
·C型产气荚膜梭菌外毒素的制备 | 第27页 |
·C型产气荚膜梭菌外毒素的检测 | 第27-29页 |
·C型产气荚膜梭菌外毒素活性测定 | 第27-28页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测毒素蛋白 | 第28页 |
·Enterotoxaemia ELISA kit检测毒素抗原 | 第28-29页 |
·β毒素的提纯 | 第29-30页 |
·C型产气荚膜梭菌外毒素的粗提 | 第29页 |
·C型产气荚膜梭菌外毒素的精提 | 第29-30页 |
·采用Sephadex G-200分离蛋白 | 第30页 |
·C型产气荚膜梭菌类毒素疫苗制备 | 第30-31页 |
·外毒素的灭活 | 第30-31页 |
·两种疫苗的制备 | 第31页 |
·疫苗的初步检查 | 第31-34页 |
·白油佐剂类毒素疫苗的物理性状检验 | 第31-32页 |
·白油佐剂类毒素疫苗的剂型检验 | 第31页 |
·白油佐剂类毒素疫苗的稳定性检查 | 第31页 |
·白油佐剂类毒素疫苗的粘度检查 | 第31-32页 |
·两种类毒素疫苗的无菌检验 | 第32页 |
·两种疫苗的甲醛、硫柳汞残留量的检验 | 第32页 |
·安全性检验 | 第32页 |
·外毒素对兔子致死量的确定 | 第32-33页 |
·免疫效力试验 | 第33页 |
·两种疫苗对家兔免疫效果的比较 | 第33页 |
·动物试验 | 第33-34页 |
·免疫怀孕母猪 | 第33页 |
·间接ELISA法测定初乳和血清中的抗β毒素的抗体效价 | 第33-34页 |
·毒素中和试验 | 第34页 |
·C型产气荚膜梭菌抗毒素血清的制备 | 第34-37页 |
·免疫试验动物 | 第34-35页 |
·α毒素的提纯 | 第35-37页 |
·A型产气荚膜梭菌外毒素的制备 | 第35页 |
·α毒素的粗提 | 第35-36页 |
·间接ELISA法测定猪血清中的抗α、β毒素抗体效价 | 第36页 |
·小鼠的血清中和试验 | 第36页 |
·C型产气荚膜梭菌抗毒素血清检验 | 第36-37页 |
4. 结果 | 第37-49页 |
·外毒素制备 | 第37-38页 |
·菌种复苏 | 第37页 |
·硫乙醇酸盐流体培养基中增菌 | 第37-38页 |
·外毒素检测 | 第38-41页 |
·C型产气荚膜梭菌外毒素活性测定 | 第38-39页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测毒素蛋白 | 第39-40页 |
·Enterotoxaemia ELISA kit检测毒素抗原 | 第40-41页 |
·α和β毒素的精提 | 第41-42页 |
·采用Sephadex G-25对粗提的C型产气荚膜梭菌外毒素除盐 | 第41页 |
·采用Sephadex G-200对浓缩液提纯 | 第41页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果 | 第41-42页 |
·采用Sephadex G-25对粗提的A型产气荚膜梭菌外毒素除盐 | 第42页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果 | 第42页 |
·外毒素的灭活 | 第42-43页 |
·C型产气荚膜梭菌类毒素疫苗的检验 | 第43-46页 |
·C型产气荚膜梭菌白油佐剂类毒素疫苗的物理性状检验 | 第43-44页 |
·C型产气荚膜梭菌白油佐剂类毒素疫苗的粘度检验 | 第44页 |
·类毒素疫苗的无菌检验和甲醛、硫柳汞残留量检验 | 第44页 |
·安全性检验 | 第44页 |
·外毒素对兔子致死量的确定 | 第44-45页 |
·免疫效力试验 | 第45页 |
·两种疫苗对家兔保护效果的比较 | 第45-46页 |
·动物试验 | 第46-47页 |
·间接ELISA测定初乳和血清中的抗体效价 | 第46页 |
·毒素中和试验 | 第46-47页 |
·血清效价检验 | 第47-48页 |
·间接ELISA法测定猪血清中的抗α、β毒素抗体效价 | 第47页 |
·小鼠的血清中和试验 | 第47-48页 |
·最小致死量的测定(MLD) | 第47页 |
·血清中和试验 | 第47-48页 |
·C型产气荚膜梭菌抗毒素血清检验 | 第48-49页 |
5. 讨论 | 第49-52页 |
·制备C型产气荚膜梭菌类毒素疫苗的意义 | 第49页 |
·C型产气荚膜梭菌外毒素制备过程中培养基的选择 | 第49页 |
·外毒素的灭活 | 第49-50页 |
·佐剂的选择 | 第50页 |
·疫苗的保护性试验研究 | 第50页 |
·α和β毒素的提纯 | 第50-51页 |
·C型产气荚膜梭菌抗毒素血清的研究 | 第51-52页 |
6. 结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-60页 |
附录 | 第60-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第63页 |