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C型产气荚膜梭菌类毒素疫苗与抗毒素血清的制备研究

中文摘要第1-11页
英文摘要第11-13页
1. 引言第13-24页
     ·产气荚膜梭菌概述第13页
     ·产气荚膜梭菌致病性第13-16页
     ·产气荚膜梭菌病在国内外流行状况第16-18页
     ·产气荚膜梭菌主要毒素蛋白的介绍第18-20页
     ·产气荚膜梭菌致病机理及防控措施第20-23页
     ·研究的目的及意义第23-24页
2. 材料第24-27页
     ·菌种与培养基第24-25页
       ·产气荚膜梭菌菌种第24页
       ·%绵羊血平板第24页
       ·产毒培养基——Gordon汤第24页
       ·硫乙醇酸盐流体培养基第24页
       ·硫乙醇酸盐培养基(T.G)第24-25页
       ·葡萄糖蛋白胨培养基(G.P)第25页
       ·酪素胰酶消化液(G.A)第25页
     ·实验动物第25页
     ·主要仪器第25页
     ·试剂的配制第25-27页
3. 方法第27-37页
   ·C型产气荚膜梭菌类毒素疫苗的制备第27-31页
       ·菌种复苏第27页
       ·硫乙醇酸盐流体培养基中增菌第27页
       ·C型产气荚膜梭菌外毒素的制备第27页
       ·C型产气荚膜梭菌外毒素的检测第27-29页
         ·C型产气荚膜梭菌外毒素活性测定第27-28页
         ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测毒素蛋白第28页
         ·Enterotoxaemia ELISA kit检测毒素抗原第28-29页
       ·β毒素的提纯第29-30页
         ·C型产气荚膜梭菌外毒素的粗提第29页
         ·C型产气荚膜梭菌外毒素的精提第29-30页
         ·采用Sephadex G-200分离蛋白第30页
       ·C型产气荚膜梭菌类毒素疫苗制备第30-31页
         ·外毒素的灭活第30-31页
         ·两种疫苗的制备第31页
     ·疫苗的初步检查第31-34页
       ·白油佐剂类毒素疫苗的物理性状检验第31-32页
         ·白油佐剂类毒素疫苗的剂型检验第31页
         ·白油佐剂类毒素疫苗的稳定性检查第31页
         ·白油佐剂类毒素疫苗的粘度检查第31-32页
       ·两种类毒素疫苗的无菌检验第32页
       ·两种疫苗的甲醛、硫柳汞残留量的检验第32页
       ·安全性检验第32页
       ·外毒素对兔子致死量的确定第32-33页
       ·免疫效力试验第33页
       ·两种疫苗对家兔免疫效果的比较第33页
       ·动物试验第33-34页
         ·免疫怀孕母猪第33页
         ·间接ELISA法测定初乳和血清中的抗β毒素的抗体效价第33-34页
         ·毒素中和试验第34页
     ·C型产气荚膜梭菌抗毒素血清的制备第34-37页
       ·免疫试验动物第34-35页
       ·α毒素的提纯第35-37页
         ·A型产气荚膜梭菌外毒素的制备第35页
         ·α毒素的粗提第35-36页
         ·间接ELISA法测定猪血清中的抗α、β毒素抗体效价第36页
         ·小鼠的血清中和试验第36页
         ·C型产气荚膜梭菌抗毒素血清检验第36-37页
4. 结果第37-49页
     ·外毒素制备第37-38页
       ·菌种复苏第37页
       ·硫乙醇酸盐流体培养基中增菌第37-38页
     ·外毒素检测第38-41页
       ·C型产气荚膜梭菌外毒素活性测定第38-39页
       ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测毒素蛋白第39-40页
       ·Enterotoxaemia ELISA kit检测毒素抗原第40-41页
     ·α和β毒素的精提第41-42页
       ·采用Sephadex G-25对粗提的C型产气荚膜梭菌外毒素除盐第41页
       ·采用Sephadex G-200对浓缩液提纯第41页
       ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果第41-42页
       ·采用Sephadex G-25对粗提的A型产气荚膜梭菌外毒素除盐第42页
       ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果第42页
     ·外毒素的灭活第42-43页
     ·C型产气荚膜梭菌类毒素疫苗的检验第43-46页
       ·C型产气荚膜梭菌白油佐剂类毒素疫苗的物理性状检验第43-44页
       ·C型产气荚膜梭菌白油佐剂类毒素疫苗的粘度检验第44页
       ·类毒素疫苗的无菌检验和甲醛、硫柳汞残留量检验第44页
       ·安全性检验第44页
       ·外毒素对兔子致死量的确定第44-45页
       ·免疫效力试验第45页
       ·两种疫苗对家兔保护效果的比较第45-46页
     ·动物试验第46-47页
       ·间接ELISA测定初乳和血清中的抗体效价第46页
       ·毒素中和试验第46-47页
     ·血清效价检验第47-48页
       ·间接ELISA法测定猪血清中的抗α、β毒素抗体效价第47页
       ·小鼠的血清中和试验第47-48页
         ·最小致死量的测定(MLD)第47页
         ·血清中和试验第47-48页
     ·C型产气荚膜梭菌抗毒素血清检验第48-49页
5. 讨论第49-52页
     ·制备C型产气荚膜梭菌类毒素疫苗的意义第49页
     ·C型产气荚膜梭菌外毒素制备过程中培养基的选择第49页
     ·外毒素的灭活第49-50页
     ·佐剂的选择第50页
     ·疫苗的保护性试验研究第50页
     ·α和β毒素的提纯第50-51页
     ·C型产气荚膜梭菌抗毒素血清的研究第51-52页
6. 结论第52-53页
参考文献第53-60页
附录第60-62页
致谢第62-63页
攻读学位期间发表论文情况第63页

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