| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 1 绪论 | 第10-21页 |
| ·MVA的概述 | 第10-13页 |
| ·MVA性质及应用领域 | 第10-11页 |
| ·MVA的合成 | 第11-13页 |
| ·MVA的检测 | 第13页 |
| ·重组大肠杆菌高密度发酵研究 | 第13-16页 |
| ·培养基 | 第13-14页 |
| ·发酵温度 | 第14页 |
| ·溶氧浓度 | 第14-15页 |
| ·pH值 | 第15页 |
| ·补料方式 | 第15页 |
| ·其他因素 | 第15-16页 |
| ·高密度发酵动力学模型研究进展 | 第16页 |
| ·乙酸为替代碳源的意义及相关基因的研究 | 第16-20页 |
| ·乙酸的来源 | 第16-17页 |
| ·使用乙酸为替代碳源的依据与优势 | 第17页 |
| ·相关酶研究进展 | 第17-19页 |
| ·代谢工程手段 | 第19-20页 |
| ·本论文研究内容 | 第20-21页 |
| 2 重组大肠杆菌高密度发酵产MVA及其动力学研究 | 第21-34页 |
| ·引言 | 第21页 |
| ·实验材料与仪器 | 第21-23页 |
| ·菌株和质粒 | 第21-22页 |
| ·实验仪器 | 第22页 |
| ·实验试剂 | 第22-23页 |
| ·培养基 | 第23页 |
| ·实验内容 | 第23-25页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞制备 | 第23页 |
| ·提取质粒 | 第23-24页 |
| ·菌株转化 | 第24页 |
| ·发酵罐操作 | 第24-25页 |
| ·分析方法 | 第25-28页 |
| ·菌体浓度的测定 | 第25页 |
| ·MVA含量的测定 | 第25-26页 |
| ·葡萄糖含量的测定 | 第26-27页 |
| ·副产物的测定 | 第27-28页 |
| ·结果与讨论 | 第28-33页 |
| ·重组大肠杆菌产MVA发酵过程中代谢变化规律 | 第28-29页 |
| ·MVA高密度发酵的动力学模型分析 | 第29-33页 |
| ·本章小结 | 第33-34页 |
| 3 乙酸作为替代碳源发酵菌株的构建及摇瓶筛选 | 第34-55页 |
| ·引言 | 第34页 |
| ·实验材料与仪器 | 第34-38页 |
| ·菌株和质粒 | 第34-35页 |
| ·实验仪器 | 第35-36页 |
| ·实验试剂 | 第36-37页 |
| ·培养基 | 第37-38页 |
| ·实验内容 | 第38-42页 |
| ·maeB，sfcA，yfcC，pckA，ppsA基因的PCR扩增 | 第38页 |
| ·maeB，sfcA，yfcC，pckA，ppsA扩增产物的回收纯化 | 第38-39页 |
| ·pXM1-pXM10重组质粒的构建 | 第39-41页 |
| ·提取质粒 | 第41页 |
| ·菌株转化 | 第41页 |
| ·重组菌摇瓶筛选 | 第41-42页 |
| ·分析方法 | 第42-43页 |
| ·菌体浓度的测定 | 第42页 |
| ·MVA含量的测定 | 第42-43页 |
| ·乙酸浓度的测定 | 第43页 |
| ·副产物的测定 | 第43页 |
| ·结果与讨论 | 第43-54页 |
| ·maeB，sfcA，yfcC，pckA，ppsA基因的克隆 | 第43页 |
| ·重组质粒验证 | 第43-50页 |
| ·摇瓶水平发酵研究 | 第50-54页 |
| ·本章小结 | 第54-55页 |
| 4 重组菌FHR-2 使用乙酸作为替代碳源发酵罐验证实验 | 第55-63页 |
| ·引言 | 第55页 |
| ·实验材料与仪器 | 第55-57页 |
| ·菌株和质粒 | 第55页 |
| ·实验仪器 | 第55-56页 |
| ·实验试剂 | 第56-57页 |
| ·培养基 | 第57页 |
| ·实验内容 | 第57-58页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞制备 | 第57页 |
| ·提取质粒 | 第57页 |
| ·菌株转化 | 第57-58页 |
| ·发酵罐验证 | 第58页 |
| ·分析方法 | 第58页 |
| ·菌体浓度的测定 | 第58页 |
| ·MVA含量的测定 | 第58页 |
| ·乙酸浓度的测定 | 第58页 |
| ·副产物的测定 | 第58页 |
| ·结果与讨论 | 第58-62页 |
| ·以乙酸铵为唯一碳源耗氧发酵验证 | 第58-59页 |
| ·葡萄糖为初碳源，补加乙酸铵耗氧发酵验证 | 第59-60页 |
| ·葡萄糖为初碳源，补加乙酸铵厌氧发酵验证 | 第60-61页 |
| ·葡萄糖为初碳源，补加乙酸铵微氧发酵验证 | 第61-62页 |
| ·本章小结 | 第62-63页 |
| 5 结论与展望 | 第63-65页 |
| ·论文主要结论 | 第63页 |
| ·研究展望 | 第63-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-71页 |
| 发表文章和专利 | 第71页 |
