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Alpha2A肾上腺素受体-Cx43信号通路诱导镜像痛敏的作用与机制

摘要第1-6页
Abstract第6-12页
第一章 绪论第12-21页
   ·疼痛与镜像痛概述第12-13页
     ·镜像痛的体液假说第12页
     ·镜像痛的神经假说第12-13页
     ·镜像痛的胶质细胞假说第13页
   ·与疼痛调控紧密相关的alpha2肾上腺素受体第13-17页
     ·肾上腺素受体(adrenergic receptor, AR)的分型、结构及分布第14-15页
     ·Alpha_2-AR与镇痛第15-16页
     ·Alpha_2-AR参与诱导镜像痛第16-17页
   ·Alpha_2-AR参与镜像痛调制的可能机制第17-19页
     ·Alpha_2-AR通过调控缝隙连接参与介导镜像痛的可能性第17-19页
     ·Alpha_2-AR对钙离子波的调控第19页
   ·动物疼痛模型第19-21页
第二章 材料与方法第21-30页
   ·实验动物第21页
   ·药品制备和注射方式第21-22页
   ·行为学测试第22页
     ·自发痛行为的检测第22页
     ·机械缩足反射阈值的检测第22页
   ·实时定量PCR检测 (qPCR)第22-25页
   ·蛋白质提取与免疫印迹检测(western blot)第25-26页
     ·蛋白质抽提与定量第25页
     ·蛋白免疫印记的具体步骤第25-26页
   ·组织冷冻切片的制备及免疫荧光检测第26-27页
     ·组织冷冻切片制备第26-27页
     ·免疫荧光检测第27页
   ·活细胞成像分析alpha_(2A)-AR调控缝隙连接第27-29页
     ·大鼠脊髓星形胶质细胞的纯化及传代培养第27-28页
     ·星形胶质细胞的GFAP染色鉴定第28页
     ·活细胞成像分析实验第28页
     ·实验分组第28-29页
     ·结果处理第29页
   ·统计分析第29-30页
第三章 结果与讨论第30-64页
   ·BmK I诱导下的行为学结果第30-33页
     ·可乐定对BmK I诱导的大鼠痛相关行为的影响第30页
     ·可乐定与甘珀酸共给药对BmK I诱导的大鼠痛相关行为的影响第30-33页
   ·背根神经节alpha2A-AR受体参与痛觉敏化第33-49页
     ·qPCR法分析鞘内注射可乐定对BmK I致痛模型中大鼠L4-L5段背根神经节alpha2A-AR与Cx43 mRNA的时程表达化第33-35页
     ·western blot分析鞘内注射可乐定对BmK I致痛模型中大鼠L4-L5段背根神经节中alpha2A-AR与GFAP以及Iba1蛋白时程表化第35-38页
     ·免疫荧光共定位检测背根神经节中alpha_(2A)-AR参与双侧痛觉敏化第38-49页
   ·脊髓alpha_(2A)-AR受体参与痛觉敏化第49-60页
     ·qPCR法分析鞘内注射可乐定对BmK I致痛模型中大鼠L4-L5段脊髓alpha_(2A)-AR与Cx 43 mRNA的时程表达变化第49-51页
     ·western blot法分析鞘内注射可乐定对BmK I致痛模型中大鼠L4-L5脊髓中alpha_(2A)-AR,Cx 43, GFAP以及Iba1蛋白时程表达化第51-53页
     ·BmK I疼痛时程下脊髓alpha_(2A)-AR与Cx 43, 星形胶质细胞标记物GFAP以及小胶质细胞标记物OX42的细胞定位第53-60页
   ·活细胞成像分析alpha_(2A)-AR调控缝隙连接第60-61页
     ·星形胶质细胞的GFAP染色鉴定结果第60页
     ·不同药物对缝隙连接半通道开闭的影响第60-61页
   ·分析和讨论第61-64页
第四章 结论第64-65页
参考文献第65-74页
附录I:溶液配制第74-78页
附录II:主要仪器第78-79页
致谢第79-80页
攻读学位期间科研成果第80-82页
缩略词表第82页

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