| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-21页 |
| ·背景概况 | 第11页 |
| ·甘薯的生产现状与开发应用前景 | 第11-13页 |
| ·甘薯的生产应用现状 | 第11-12页 |
| ·甘薯的营养价值 | 第12页 |
| ·甘薯的开发应用前景 | 第12-13页 |
| ·β-胡萝卜素的保健功能及其生物合成途径 | 第13-15页 |
| ·β-胡萝卜素与其生理保健功能 | 第13页 |
| ·β-胡萝卜素生物合成途径 | 第13-15页 |
| ·β-胡萝卜素生物合成途径中部分关键酶基因 | 第15-18页 |
| ·牻牛儿基牻牛儿基二磷酸合成酶(GGDS) | 第15-17页 |
| ·八氢番茄红素合成酶(PSY) | 第17页 |
| ·八氢番茄红素脱饱和酶(PDS)和ζ-胡萝卜素脱饱和酶(ZDS) | 第17-18页 |
| ·类胡萝卜素异构酶(crtISO) | 第18页 |
| ·番茄红素环化酶(LYCB) | 第18页 |
| ·在大肠杆菌中重建类胡萝卜素代谢途径 | 第18-21页 |
| 第2章 绪论 | 第21-23页 |
| ·研究目的和意义 | 第21-22页 |
| ·研究范围和内容 | 第22页 |
| ·技术路线 | 第22-23页 |
| 第3章 材料与方法 | 第23-41页 |
| ·植物材料 | 第23页 |
| ·菌株和质粒 | 第23页 |
| ·仪器和设备 | 第23页 |
| ·试剂盒及试剂 | 第23-25页 |
| ·常规方法介绍 | 第25-27页 |
| ·RNA的提取 | 第25页 |
| ·DNA产物的琼脂糖凝胶电泳 | 第25页 |
| ·目的条带的回收 | 第25-26页 |
| ·目的片段与克隆载体T连接 | 第26页 |
| ·大肠杆菌DH5α和XL1-Blue感受态细胞的制备(CaCl_2法) | 第26-27页 |
| ·连接反应物转化大肠杆菌感受态细胞 | 第27页 |
| ·IbGGDS基因cDNA的克隆与分析 | 第27-33页 |
| ·从甘薯总RNA合成第一链cDNA | 第27-28页 |
| ·目的基因的克隆 | 第28-33页 |
| ·IbGGDS基因的生物信息学分析 | 第33页 |
| ·IbGGDS蛋白的亚细胞定位 | 第33-36页 |
| ·亚细胞定位载体构建 | 第33-35页 |
| ·烟草叶肉细胞原生质体的制备 | 第35页 |
| ·原生质体的转化及激光共聚焦显微镜观察 | 第35-36页 |
| ·IbGGDS颜色互补功能验证 | 第36-38页 |
| ·颜色互补功能验证载体构建 | 第36-37页 |
| ·颜色互补功能验证载体工程菌的获得 | 第37-38页 |
| ·HPLC检测工程菌中β-胡萝卜素含量 | 第38页 |
| ·甘薯各组织及相关基因的相对表达量检测 | 第38-40页 |
| ·甘薯各组织中p-胡萝卜素含量的检测 | 第40-41页 |
| 第4章 结果与分析 | 第41-63页 |
| ·IbGGDS基因cDNA的获得和生物信息学分析 | 第41-49页 |
| ·IbGGDS基因的获得 | 第41-42页 |
| ·IbGGDS基因的生物信息学分析 | 第42-43页 |
| ·IbGGDS与植物异戊烯基转移酶氨基酸序列的多重比对 | 第43-45页 |
| ·IbGGDS分子进化树的构建 | 第45页 |
| ·IbGGDS蛋白的保守结构域分析 | 第45-46页 |
| ·IbGGDS蛋白亲/疏水性预测 | 第46-47页 |
| ·IbGGDS蛋白二级结构预测 | 第47-48页 |
| ·IbGGDS蛋白三级结构预测 | 第48-49页 |
| ·IbGGDS蛋白及其质体转运肽的亚细胞定位结果分析 | 第49-54页 |
| ·亚细胞定位载体构建结果 | 第49-51页 |
| ·亚细胞定位结果分析 | 第51-54页 |
| ·IbGGDS颜色互补功能验证结果分析 | 第54-57页 |
| ·颜色互补功能验证载体构建 | 第54页 |
| ·携带不同质粒的XL1-Blue生长情况比较 | 第54-56页 |
| ·工程菌中β-胡萝卜素含量的检测结果分析 | 第56-57页 |
| ·甘薯各组织IbGGDS及相关基因的相对表达量检测结果分析 | 第57-60页 |
| ·qPCR引物的特异性分析 | 第57页 |
| ·qPCR检测结果分析 | 第57-60页 |
| ·甘著各组织中β-胡萝卜素含量的检测 | 第60-63页 |
| ·高效液相色谱法HPLC检测标准的建立 | 第60页 |
| ·HPLC检测结果分析 | 第60-63页 |
| 第5章 讨论 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-73页 |
| 附录 | 第73-75页 |
| 硕士期间发表论文 | 第75页 |
| 参加课题 | 第75-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
