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PMWS多病原混合感染的检测及PCV2重组杆状病毒培养的优化

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
第一篇 文献综述第11-33页
 第一章 断奶仔猪多系统衰竭综合征研究进展第11-21页
  1 病原学研究进展第11-16页
   ·猪圆环病毒(PCV)第11-14页
     ·病毒的分子生物学特性第12页
     ·PCV2编码的蛋白第12-13页
     ·复制与转录第13-14页
     ·PCV病毒细賄培养特性第14页
   ·猪繁殖和呼吸综合征病毒(PRRSV)第14页
   ·猪输血传播病毒(PTTV)第14-15页
   ·猪细小病毒(PPV)第15-16页
  2 流行病学第16页
  3 PCV2基因分型第16页
  4 发病机制第16-17页
   ·PCV2感染对体液免疫的影响第16-17页
   ·PCV2感染对细胞免疫的影响第17页
  5 诊断第17-18页
  6 疫苗研究进展第18-19页
   ·PCV2灭活疫苗第18页
   ·PCV2亚单位疫苗第18-19页
   ·PCV2弱毒疫苗第19页
   ·PCV2核酸疫苗第19页
  7 病毒样颗粒(VLPs)疫苗的研究第19-21页
 第二章 昆虫细胞的培养第21-23页
  1 昆虫细胞系种类第21-22页
  2 细胞培养研发的现状第22-23页
 参考文献第23-33页
第二篇 研究报告第33-75页
 第一章 PMWS相关病原的流行病学调查第33-45页
  摘要第33页
  1 材料与方法第33-37页
   ·材料第33-34页
   ·方法第34-37页
  2 结果第37-41页
   ·PCR扩增结果第37-39页
   ·检测结果统计第39-41页
  3 讨论第41-43页
  参考文献第43-44页
  ABSTRACT第44-45页
 第二章 猪圆环病毒2型(PCV2)分子流行病学调查第45-57页
  摘要第45-46页
  1 材料与方法第46-49页
   ·材料第46-47页
     ·待检样品第46页
     ·试剂第46页
     ·主要仪器第46页
     ·引物的设计与合成第46页
     ·分子生物学软件第46-47页
   ·方法第47-49页
  2 结果第49-53页
   ·PCV2的全长扩增第49-50页
   ·序列检测结果分析第50-53页
   ·系统进化树分析第53页
  3 讨论第53-55页
  参考文献第55-56页
  ABSTRACT第56-57页
 第三章 优化Sf9、High5细胞培养与重组杆状病毒vFBHYH01-2/VFBHYHO2蛋白表达量条件第57-75页
  摘要第57-58页
  1 材料和方法第58-61页
   ·材料第58页
     ·细胞系第58页
     ·培养基及试剂第58页
     ·实验设备第58页
     ·荧光定量引物设计第58页
   ·方法第58-61页
     ·校准CCK-8试剂盒使用剂量和时间第58-59页
     ·培养基谷氨酰胺浓度优化第59-60页
     ·不同细胞初始浓度生长曲线绘制第60页
     ·在Sf9细胞上接目标重组杆状病毒条件探索第60-61页
       ·Sf9细胞养毒第60页
       ·半数组织细胞培养感染(TCID_(50))实验第60-61页
     ·对接种目标重组病毒的条件调试第61页
       ·病毒的培养与收取第61页
       ·样品蛋白含量测定第61页
  2 结果第61-71页
   ·CCK-8试剂作用条件第61-64页
   ·培养基谷氨酰胺浓度优化第64-65页
   ·不同初始浓度生长曲线绘制第65-66页
   ·Sf9细胞养毒实验结果第66-69页
   ·对接种目标重组病毒的条件调试结果第69-71页
  3 讨论第71-73页
  参考文献第73-74页
  ABSTRACT第74-75页
全文总结第75-77页
附录第77-81页
致谢第81页

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