| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-14页 |
| 缩略词 | 第14-15页 |
| 前言 | 第15-21页 |
| 1 鼠疫的爆发、流行及危害 | 第15-16页 |
| 2 鼠疫菌的致病机制 | 第16页 |
| 3 鼠疫菌的毒力因子 | 第16-19页 |
| ·鼠疫菌染色体上的毒力因子 | 第16-17页 |
| ·pgm位点 | 第16-17页 |
| ·p H6抗原 | 第17页 |
| ·脂多糖（LPS） | 第17页 |
| ·Pho P/Q二元调控系统 | 第17页 |
| ·鼠疫菌质粒上的毒力因子 | 第17-19页 |
| ·p PCP1编码的毒力因子 | 第17-18页 |
| ·p MT1编码的毒力因子 | 第18页 |
| ·p CD1编码的毒力因子 | 第18-19页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第19页 |
| 5 本研究的内容 | 第19-21页 |
| 第一章 鼠疫菌pla缺失株互补株的构建和验证 | 第21-31页 |
| 1 引言 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-27页 |
| ·材料 | 第22页 |
| ·菌株和质粒 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22页 |
| ·主要仪器 | 第22页 |
| ·方法 | 第22-27页 |
| ·回补株构建 | 第22-25页 |
| ·回补株验证 | 第25-27页 |
| 3 结果与讨论 | 第27-30页 |
| ·pla基因回补株的构建 | 第27-28页 |
| ·蛋白电泳、WB验证回补后pla功能 | 第28-30页 |
| 4 结论 | 第30-31页 |
| 第二章 鼠疫菌Pla蛋白的体外表达纯化 | 第31-40页 |
| 1 引言 | 第31页 |
| 2 材料与方法 | 第31-35页 |
| ·材料 | 第31-33页 |
| ·菌株和质粒 | 第31页 |
| ·主要试剂 | 第31-32页 |
| ·主要仪器 | 第32页 |
| ·纯化重组蛋白使用溶液的配置 | 第32-33页 |
| ·方法 | 第33-35页 |
| ·表达载体的构建 | 第33-34页 |
| ·蛋白的表达 | 第34页 |
| ·蛋白的变性与复性 | 第34-35页 |
| ·Western印迹鉴定目的蛋白 | 第35页 |
| ·Pla纤溶酶原激活剂的活性测定 | 第35页 |
| 3 结果与讨论 | 第35-39页 |
| ·pla基因片段的扩增及重组载体的鉴定 | 第35-36页 |
| ·Pla蛋白的诱导表达 | 第36-37页 |
| ·Pla蛋白的变性与复性 | 第37-38页 |
| ·Pla蛋白活性测定 | 第38-39页 |
| 4 结论 | 第39-40页 |
| 第三章 鼠疫菌Ymt蛋白的体外表达纯化 | 第40-52页 |
| 1 引言 | 第40页 |
| 2 材料与方法 | 第40-44页 |
| ·材料 | 第40-41页 |
| ·菌株与质粒 | 第40页 |
| ·主要试剂 | 第40-41页 |
| ·主要仪器 | 第41页 |
| ·蛋白纯化试剂 | 第41页 |
| ·实验动物 | 第41页 |
| ·方法 | 第41-44页 |
| ·表达载体的构建 | 第41-42页 |
| ·蛋白表达 | 第42页 |
| ·蛋白的纯化 | 第42-43页 |
| ·Western印迹鉴定目的蛋白 | 第43页 |
| ·Ymt活性的测定 | 第43-44页 |
| 3 结果与讨论 | 第44-50页 |
| ·克隆、诱导表达Ymt | 第44页 |
| ·Ymt蛋白的纯化 | 第44-45页 |
| ·重组Ymt蛋白在小鼠体内LD50的测定 | 第45-48页 |
| ·Ymt引起小鼠组织病理损伤 | 第48-49页 |
| ·Ymt的 β-肾上腺素能阻断活性 | 第49-50页 |
| 4 讨论 | 第50-52页 |
| 第四章 鼠疫菌Pla蛋白与Ymt蛋白相互作用 | 第52-59页 |
| 1 引言 | 第52页 |
| 2 材料与方法 | 第52-54页 |
| ·材料 | 第52-53页 |
| ·菌株与质粒 | 第52-53页 |
| ·主要试剂 | 第53页 |
| ·主要仪器 | 第53页 |
| ·方法 | 第53-54页 |
| ·pla与ymt直接反应 | 第53页 |
| ·胞内表达重组Pla蛋白与Ymt的相互作用 | 第53-54页 |
| ·突变失活后的Pla蛋白与Ymt的相互作用 | 第54页 |
| 3 结果与讨论 | 第54-58页 |
| ·外源提供LPS环境中Pla蛋白与Ymt蛋白的相互作用 | 第54页 |
| ·胞内表达重组Pla蛋白与Ymt的相互作用 | 第54-57页 |
| ·突变失活后的Pla蛋白与Ymt的相互作用 | 第57-58页 |
| 4 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-63页 |
| 附录 | 第63-67页 |
| 主要仪器 | 第63-64页 |
| 常用试剂及配制方法 | 第64-65页 |
| 个人简历 | 第65-66页 |
| 在学期间的研究成果目录 | 第66页 |
| 承担课题 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67-69页 |
| 综述 | 第69-73页 |
| 参考文献 | 第73-74页 |