| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-21页 |
| ·昆虫的表皮 | 第13-15页 |
| ·昆虫表皮的结构及化学组成 | 第13页 |
| ·几丁质 | 第13页 |
| ·昆虫表皮蛋白鉴定与分类 | 第13-14页 |
| ·表皮蛋白表达特征与功能研究 | 第14-15页 |
| ·昆虫中几丁质结合蛋白的研究 | 第15-21页 |
| ·昆虫表皮几丁质结合蛋白的研究 | 第15-17页 |
| ·昆虫围食膜几丁质结合蛋白的研究 | 第17-18页 |
| ·其他几丁质结合蛋白的研究 | 第18-21页 |
| 第二章 引言 | 第21-23页 |
| ·研究背景及目的意义 | 第21页 |
| ·研究内容 | 第21-22页 |
| ·技术路线 | 第22-23页 |
| 第三章 家蚕几丁质结合蛋白BmCBP鉴定及生物信息学分析 | 第23-29页 |
| ·材料和方法 | 第23页 |
| ·家蚕中几丁质结合蛋白BmCBP鉴定 | 第23页 |
| ·家蚕中几丁质结合蛋白各组织芯片数据分析 | 第23页 |
| ·结果与分析 | 第23-27页 |
| ·几丁质结合蛋白的鉴定 | 第23-24页 |
| ·ChtBD2结构同源性分析 | 第24-26页 |
| ·几丁质结合蛋白基因家蚕各组织表达模式 | 第26-27页 |
| ·讨论 | 第27-29页 |
| 第四章 BmCBP克隆、原核表达、纯化及抗体制备 | 第29-51页 |
| ·实验材料与实验仪器 | 第29-33页 |
| ·实验材料 | 第29页 |
| ·实验仪器 | 第29-30页 |
| ·实验试剂及溶液配制 | 第30-33页 |
| ·实验方法 | 第33-42页 |
| ·家蚕几丁质结合蛋白生物信息分析 | 第33-34页 |
| ·目的基因片段的克隆 | 第34-39页 |
| ·原核表达载体转化 | 第39页 |
| ·重组质粒原核表达检测 | 第39-40页 |
| ·重组BmCBP蛋白的大量表达、纯化 | 第40-41页 |
| ·凝胶过滤层析 | 第41页 |
| ·离子交换层析 | 第41页 |
| ·重组BmCBP2蛋白抗体制备 | 第41-42页 |
| ·实验结果 | 第42-48页 |
| ·家蚕几丁质结合蛋白BmCBP1，BmCBP2生物信息分析 | 第42-44页 |
| ·家蚕几丁质结合蛋白进化分析 | 第44页 |
| ·BmCBP原核表达载体的构建 | 第44-45页 |
| ·BmCBP1和BmCBP2重组蛋白的原核表达检测 | 第45-46页 |
| ·重组蛋白纯化 | 第46-48页 |
| ·重组蛋白多克隆抗体制备 | 第48页 |
| ·讨论 | 第48-51页 |
| 第五章 BmCBP1，BmCBP2的表达特征分析及组织定位 | 第51-63页 |
| ·实验材料与试剂 | 第51-53页 |
| ·实验材料 | 第51页 |
| ·实验仪器 | 第51页 |
| ·实验试剂与相关溶液配制 | 第51-53页 |
| ·实验方法 | 第53-56页 |
| ·RNA的提取与cDNA的制备 | 第53页 |
| ·RT-PCR及Q-PCR检测 | 第53-54页 |
| ·Western Bolt检测 | 第54-55页 |
| ·蜕皮激素注射家蚕个体 | 第55页 |
| ·免疫荧光染色 | 第55页 |
| ·蜕皮期BmCBP2与几丁质的共定位 | 第55-56页 |
| ·实验结果 | 第56-61页 |
| ·家蚕BmCBP基因的时空表达特征 | 第56-57页 |
| ·家蚕BmCBP2蛋白的存在组织及时期变化 | 第57-58页 |
| ·BmCBP2家蚕各个眠期及表态发育期表达检测 | 第58页 |
| ·家蚕个体水平蜕皮激素诱导BmCBP2表达变化 | 第58-59页 |
| ·BmCBP2的组织定位 | 第59-60页 |
| ·龄眠期BmCBP2与在家蚕体壁的免疫荧光定位 | 第60-61页 |
| ·讨论 | 第61-63页 |
| 第六章 家蚕BmCBP2功能研究 | 第63-81页 |
| ·实验材料与试剂仪器 | 第63-65页 |
| ·实验材料 | 第63页 |
| ·主要仪器 | 第63页 |
| ·主要试剂 | 第63页 |
| ·主要溶液配制 | 第63-65页 |
| ·实验方法 | 第65-72页 |
| ·BmCBP2蛋白的几丁质结合功能验证 | 第65-66页 |
| ·GST Pull-down检测蛋白之间相互作用 | 第66页 |
| ·GST-BmCBP2原核表达载体构建 | 第66-67页 |
| ·重组GST标签蛋白、GST-BmCBP2大量表达、纯化 | 第67页 |
| ·GST- pull-down实验检测蛋白之间相互作用 | 第67-68页 |
| ·LC-MS/MS质谱鉴定 | 第68-70页 |
| ·BmCBP2降解实验 | 第70页 |
| ·RNA干涉实验 | 第70-72页 |
| ·结果与分析 | 第72-78页 |
| ·重组BmCBP1和BmCBP2蛋白的几丁质结合验证 | 第72页 |
| ·GST-BmCBP表达载体的构建 | 第72-73页 |
| ·GST-BmCBP2重组蛋白的原核表达及纯化 | 第73-74页 |
| ·GST-BmCBP2重组蛋白的Pull down实验 | 第74-75页 |
| ·LC-MS/MS质谱鉴定 | 第75页 |
| ·蜕皮液对BmCBP2降解实验 | 第75-76页 |
| ·BmCBP2的干涉实验 | 第76-78页 |
| ·讨论 | 第78-81页 |
| 第七章 综合与讨论 | 第81-85页 |
| ·家蚕几丁质结合蛋白BmCBP的鉴定及信息分析 | 第81页 |
| ·家蚕BmCBP的原核表达与抗体制备 | 第81-82页 |
| ·家蚕BmCBP的时空表达特征及组织定位 | 第82页 |
| ·家蚕BmCBP2的功能初探 | 第82-85页 |
| 参考文献 | 第85-89页 |
| 致谢 | 第89页 |
