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慢病毒介导的利用siRNA干扰人端粒酶逆转录酶在宫颈癌Caski细胞中的研究

个人简历第1-7页
英文缩略词第7-9页
摘要第9-12页
ABSTRACT第12-16页
第一章 hTERT基因的慢病毒表达载体的构建及鉴定第16-63页
 1. 前言第16-17页
 2. 材料与方法第17-48页
   ·材料第17-23页
     ·实验对象第17-18页
     ·主要实验试剂第18-19页
     ·主要溶液配制第19-21页
     ·主要实验仪器第21-23页
     ·器具处理第23页
   ·方法第23-48页
     ·表达hTERT-shRNA的慢病毒载体构建第23-33页
     ·慢病毒包装、浓缩、收集第33-40页
     ·用构建好的病毒转染靶细胞第40-42页
     ·稳转细胞系的建立第42-43页
     ·实验分组第43-44页
     ·实时荧光定量PCR反应检测hTERT mRNA水平的表达第44-48页
   ·统计学方法第48页
 3. 结果与分析第48-55页
   ·重组质粒的鉴定结果第48-50页
   ·慢病毒滴度的测定第50-51页
   ·干扰序列的抗性筛选及流式细胞仪检测感染效率第51-52页
   ·总RNA完整性纯度检测第52-53页
   ·实时荧光定量PCR检测hTERT基因的变化第53-55页
 4. 讨论第55-58页
 参考文献第58-63页
第二章 慢病毒介导的利用siRNA沉默hTERT基因对宫颈癌caski细胞生物学功能的影响第63-90页
 1. 前言第63-64页
 2. 材料与方法第64-77页
   ·实验对象、实验试剂、实验仪器第64-68页
     ·实验对象第64页
     ·主要实验试剂第64-65页
     ·主要试剂的配置第65-67页
     ·实验仪器第67-68页
     ·实验器具处理第68页
   ·方法第68-77页
     ·细胞株的培养第68-69页
     ·细胞平板克隆形成实验第69-71页
     ·细胞增殖的CCK-8检测第71-73页
     ·细胞生长周期的检测第73-76页
     ·细胞凋亡的检测第76-77页
   ·统计学分析第77页
 3. 结果与分析第77-84页
   ·CCK-8法测定细胞生长曲线第77-79页
   ·细胞平板克隆实验结果第79-80页
   ·流式细胞仪检测细胞周期结果第80-82页
   ·流式细胞仪检测细胞凋亡结果第82-84页
 4. 讨论第84-86页
 参考文献第86-90页
综述第90-102页
 参考文献第96-102页
全文小结第102页
研究创新性总结第102-103页
攻读学位期间发表学术论文第103-104页
致谢第104-106页
附件第106-111页

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