个人简历 | 第1-7页 |
英文缩略词 | 第7-9页 |
摘要 | 第9-12页 |
ABSTRACT | 第12-16页 |
第一章 hTERT基因的慢病毒表达载体的构建及鉴定 | 第16-63页 |
1. 前言 | 第16-17页 |
2. 材料与方法 | 第17-48页 |
·材料 | 第17-23页 |
·实验对象 | 第17-18页 |
·主要实验试剂 | 第18-19页 |
·主要溶液配制 | 第19-21页 |
·主要实验仪器 | 第21-23页 |
·器具处理 | 第23页 |
·方法 | 第23-48页 |
·表达hTERT-shRNA的慢病毒载体构建 | 第23-33页 |
·慢病毒包装、浓缩、收集 | 第33-40页 |
·用构建好的病毒转染靶细胞 | 第40-42页 |
·稳转细胞系的建立 | 第42-43页 |
·实验分组 | 第43-44页 |
·实时荧光定量PCR反应检测hTERT mRNA水平的表达 | 第44-48页 |
·统计学方法 | 第48页 |
3. 结果与分析 | 第48-55页 |
·重组质粒的鉴定结果 | 第48-50页 |
·慢病毒滴度的测定 | 第50-51页 |
·干扰序列的抗性筛选及流式细胞仪检测感染效率 | 第51-52页 |
·总RNA完整性纯度检测 | 第52-53页 |
·实时荧光定量PCR检测hTERT基因的变化 | 第53-55页 |
4. 讨论 | 第55-58页 |
参考文献 | 第58-63页 |
第二章 慢病毒介导的利用siRNA沉默hTERT基因对宫颈癌caski细胞生物学功能的影响 | 第63-90页 |
1. 前言 | 第63-64页 |
2. 材料与方法 | 第64-77页 |
·实验对象、实验试剂、实验仪器 | 第64-68页 |
·实验对象 | 第64页 |
·主要实验试剂 | 第64-65页 |
·主要试剂的配置 | 第65-67页 |
·实验仪器 | 第67-68页 |
·实验器具处理 | 第68页 |
·方法 | 第68-77页 |
·细胞株的培养 | 第68-69页 |
·细胞平板克隆形成实验 | 第69-71页 |
·细胞增殖的CCK-8检测 | 第71-73页 |
·细胞生长周期的检测 | 第73-76页 |
·细胞凋亡的检测 | 第76-77页 |
·统计学分析 | 第77页 |
3. 结果与分析 | 第77-84页 |
·CCK-8法测定细胞生长曲线 | 第77-79页 |
·细胞平板克隆实验结果 | 第79-80页 |
·流式细胞仪检测细胞周期结果 | 第80-82页 |
·流式细胞仪检测细胞凋亡结果 | 第82-84页 |
4. 讨论 | 第84-86页 |
参考文献 | 第86-90页 |
综述 | 第90-102页 |
参考文献 | 第96-102页 |
全文小结 | 第102页 |
研究创新性总结 | 第102-103页 |
攻读学位期间发表学术论文 | 第103-104页 |
致谢 | 第104-106页 |
附件 | 第106-111页 |