摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-13页 |
英文缩略词 | 第13-15页 |
前言 | 第15-21页 |
第一部分 TGFβ1下调miR-141表达和上调HIPK2表达 | 第21-43页 |
1 材料与方法 | 第21-30页 |
·主要仪器、器材 | 第21-22页 |
·主要试剂 | 第22-23页 |
·实验方法 | 第23-30页 |
·细胞培养 | 第23页 |
·细胞的冻存、复苏和细胞计数 | 第23-24页 |
·Real-time PCR | 第24-27页 |
·Western Blot | 第27-30页 |
·统计学分析 | 第30页 |
2 结果 | 第30-39页 |
·不同浓度TGFβ1对miR-141表达的影响 | 第30-32页 |
·TGFβ1不同处理时间对miR-141表达的影响 | 第32-33页 |
·不同浓度TGFβ1对HIPK2 mRNA表达的影响 | 第33-34页 |
·TGFβ1不同处理时间对HIPK2 mRNA表达的影响 | 第34-35页 |
·不同浓度TGFβ1对HIPK2蛋白表达的影响 | 第35-37页 |
·不同处理时间TGFβ1对HIPK2 mRNA表达的影响 | 第37-39页 |
3 讨论 | 第39-40页 |
4 结论 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-43页 |
第二部分 miR-141靶向抑制HIPK2的表达 | 第43-70页 |
1 材料与方法 | 第43-58页 |
·主要仪器设备 | 第45-46页 |
·实验方法 | 第46-58页 |
·Real-time PCR | 第46页 |
·Western Blot | 第46-58页 |
2 结果 | 第58-66页 |
·miR-141 mimics脂质体转染HK2细胞表达效率检测 | 第58-59页 |
·过表达miR-141对HIPK2蛋白表达效率的影响 | 第59-60页 |
·miR-141 Sponge脂质体转染HK2细胞表达效率检测 | 第60-62页 |
·过表达miR-141对HIPK2蛋白表达效率的影响 | 第62-63页 |
·双荧光素酶报告基因检测miR-141靶向调控HIPK2 | 第63-66页 |
3 讨论 | 第66-68页 |
4 结论 | 第68页 |
参考文献 | 第68-70页 |
第三部分 TGFβ1抑制miR-141上调HIPK2促进上皮细胞间充质转化进程 | 第70-93页 |
1 材料与方法 | 第70-76页 |
·主要仪器、器材 | 第70-71页 |
·主要试剂 | 第71-72页 |
·实验方法 | 第72-76页 |
·细胞培养 | 第72页 |
·细胞的冻存、复苏和细胞计数 | 第72-73页 |
·Western Blot | 第73-76页 |
2 结果 | 第76-88页 |
·TGFβ1抑制miR-141促进上皮细胞间充质转化(EMT)进程 | 第76-81页 |
·转染HIPK2 ORF克隆对HK2细胞中HIPK2蛋白表达的影响 | 第81-83页 |
·过表达HIPK2逆转miR-141对EMT进程的影响 | 第83-88页 |
3 讨论 | 第88-90页 |
4 结论 | 第90-91页 |
参考文献 | 第91-93页 |
全文总结 | 第93-94页 |
综述 | 第94-121页 |
参考文献 | 第110-121页 |
统计学证明 | 第121页 |