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PADI4靶向调控sox4在HL-60细胞定向分化为粒系的功能及表达调控机制

摘要第1-11页
ABSTRACT第11-15页
主要符号表第15-16页
前言第16-18页
材料与方法第18-38页
   ·主要材料和仪器设备第18-19页
   ·HL-60 白血病细胞及 HEC293T 细胞的培养第19页
   ·ATRA 诱导 HL-60 细胞模型的建立及检测第19-20页
   ·ATRA 诱导 HL60 后 PADI4 和 PU.1 基因的检测第20-22页
   ·siRNA 干扰 PADI4 后 PU.1 的表达及流式检测对细胞分化的影响第22-24页
   ·ATRA 诱导后提取核蛋白与浆蛋白 Western blot 检测 PADI4 表达第24页
   ·免疫细胞化学技术定位 PADI4 的位置第24-25页
   ·Western blot、PCR 检测 sox4 的表达第25页
   ·PADI4 特异性 siRNA 的设计及鉴定第25-26页
   ·PCR 检测特异性敲低 PADI4 对 sox4 表达的影响第26页
   ·sox4 启动子荧光素酶报告载体的构建第26-31页
   ·双荧光素酶报告载体实验检测 PADI4 对 sox4 启动子的作用第31页
   ·ChIP 实验检测 PADI4 与 sox4 结合的具体部位第31-34页
   ·sox4 的四个 domain 的构建及鉴定第34-36页
   ·Co-IP 检测 PADI4 和 sox4 蛋白间的相互作用及具体结合域结果第36-38页
结果第38-51页
   ·ATRA 诱导 HL-60 细胞分化指标的检测第38-39页
   ·ATRA 诱导 HL60 细胞中 PADI4 和 PU.1 表达情况第39-41页
   ·Western blot 检测 siRNA 干扰 PADI4 效率第41-42页
   ·流式检测干扰 PADI4 后对细胞分化的影响第42-43页
   ·Western bolt 检测 ATRA 诱导 HL-60 后核蛋白和浆蛋白的表达浓度第43页
   ·免疫细胞化学定位 ATAR 诱导 HL-60 后蛋白的表达第43-44页
   ·Western blot 及 PCR 检测 sox4 的表达第44-46页
   ·RT-PCR 鉴定 siRNA 干扰 PADI4 的效果及对 sox4 的影响第46-47页
   ·sox4 启动子荧光素酶报告载体构建及检测 PADI4 与其结合的区域第47-48页
   ·sox4 的四个 domain 的构建及 Co-IP 检测 PADI4 和 sox4 之间存在蛋白间的相互作用第48-51页
讨论第51-54页
结论第54-55页
参考文献第55-58页
综述第58-65页
 参考文献第62-65页
攻读学位期间取得的成果第65-66页
致谢第66页

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