摘要 | 第1-11页 |
ABSTRACT | 第11-15页 |
主要符号表 | 第15-16页 |
前言 | 第16-18页 |
材料与方法 | 第18-38页 |
·主要材料和仪器设备 | 第18-19页 |
·HL-60 白血病细胞及 HEC293T 细胞的培养 | 第19页 |
·ATRA 诱导 HL-60 细胞模型的建立及检测 | 第19-20页 |
·ATRA 诱导 HL60 后 PADI4 和 PU.1 基因的检测 | 第20-22页 |
·siRNA 干扰 PADI4 后 PU.1 的表达及流式检测对细胞分化的影响 | 第22-24页 |
·ATRA 诱导后提取核蛋白与浆蛋白 Western blot 检测 PADI4 表达 | 第24页 |
·免疫细胞化学技术定位 PADI4 的位置 | 第24-25页 |
·Western blot、PCR 检测 sox4 的表达 | 第25页 |
·PADI4 特异性 siRNA 的设计及鉴定 | 第25-26页 |
·PCR 检测特异性敲低 PADI4 对 sox4 表达的影响 | 第26页 |
·sox4 启动子荧光素酶报告载体的构建 | 第26-31页 |
·双荧光素酶报告载体实验检测 PADI4 对 sox4 启动子的作用 | 第31页 |
·ChIP 实验检测 PADI4 与 sox4 结合的具体部位 | 第31-34页 |
·sox4 的四个 domain 的构建及鉴定 | 第34-36页 |
·Co-IP 检测 PADI4 和 sox4 蛋白间的相互作用及具体结合域结果 | 第36-38页 |
结果 | 第38-51页 |
·ATRA 诱导 HL-60 细胞分化指标的检测 | 第38-39页 |
·ATRA 诱导 HL60 细胞中 PADI4 和 PU.1 表达情况 | 第39-41页 |
·Western blot 检测 siRNA 干扰 PADI4 效率 | 第41-42页 |
·流式检测干扰 PADI4 后对细胞分化的影响 | 第42-43页 |
·Western bolt 检测 ATRA 诱导 HL-60 后核蛋白和浆蛋白的表达浓度 | 第43页 |
·免疫细胞化学定位 ATAR 诱导 HL-60 后蛋白的表达 | 第43-44页 |
·Western blot 及 PCR 检测 sox4 的表达 | 第44-46页 |
·RT-PCR 鉴定 siRNA 干扰 PADI4 的效果及对 sox4 的影响 | 第46-47页 |
·sox4 启动子荧光素酶报告载体构建及检测 PADI4 与其结合的区域 | 第47-48页 |
·sox4 的四个 domain 的构建及 Co-IP 检测 PADI4 和 sox4 之间存在蛋白间的相互作用 | 第48-51页 |
讨论 | 第51-54页 |
结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-58页 |
综述 | 第58-65页 |
参考文献 | 第62-65页 |
攻读学位期间取得的成果 | 第65-66页 |
致谢 | 第66页 |