摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
缩略词表 | 第11-12页 |
前言 | 第12-13页 |
第一部分 芯片筛选在肾癌肿瘤组织中差异表达的 lncRNAs | 第13-22页 |
一、 材料与方法 | 第13-18页 |
(一) 所用组织标本 | 第13-14页 |
(二) 主要试剂 | 第14页 |
(三) 主要仪器 | 第14-15页 |
(四) 芯片的选择 | 第15页 |
(五) 探针设计 | 第15页 |
(六) 组织样本 RNA 抽提、检测 | 第15-16页 |
(七) RT-PCR 操作步骤 | 第16-17页 |
(八) cDNA 标记及杂交 | 第17-18页 |
(九) 图像采集及数据分析 | 第18页 |
二、 结果 | 第18-20页 |
(一) RNA 质检结果 | 第18-19页 |
(二) 芯片杂交结果 | 第19-20页 |
三、 讨论 | 第20-22页 |
第二部分 RCRF 在人肾透明细胞癌组织中的表达及其与临床病理指标的关系 | 第22-34页 |
材料与方法 | 第22-28页 |
一、 材料 | 第22-24页 |
(一) 组织来源 | 第22-23页 |
(二) 主要试剂 | 第23页 |
(三) 主要仪器 | 第23-24页 |
二、 方法 | 第24-28页 |
(一) 收集标本 | 第24-25页 |
(二) Real time PCR | 第25-28页 |
结果 | 第28-32页 |
一、 病例的临床病理资料 | 第28-29页 |
二、 实时定量 PCR 检测 RCRF 在组织中表达量 | 第29-31页 |
三、 生存分析 | 第31-32页 |
讨论 | 第32-34页 |
第三部分 RCRF 对肾癌细胞生物学行为的影响 | 第34-51页 |
材料与方法 | 第34-43页 |
一、 材料 | 第34-37页 |
(一) 实验细胞 | 第34-35页 |
(二) 主要试剂 | 第35页 |
(三) 主要配制试剂 | 第35-36页 |
(四) 主要仪器及耗材 | 第36-37页 |
二、 实验方法 | 第37-43页 |
(一) 细胞培养 | 第37-39页 |
(二) siRNA 转染设计与转染过程 | 第39-40页 |
(三) CCK8 检测细胞增殖 | 第40-41页 |
(四) 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第41-42页 |
(五) Transwell 小室实验检测细胞侵袭 | 第42页 |
(六) 细胞划痕实验检测细胞迁移 | 第42-43页 |
(七) 统计分析 | 第43页 |
结果 | 第43-48页 |
一、 RCRF 特异性 siRNA 转染效率验证 | 第43-44页 |
二、 特异性 siRNA 干扰 RCRF 对 ACHN 细胞增殖能力的影响 | 第44-45页 |
三、 特异性 siRNA 干扰 RCRF 对 ACHN 细胞凋亡的影响 | 第45-46页 |
四、 特异性 siRNA 干扰 RCRF 对 ACHN 细胞侵袭能力的影响 | 第46-47页 |
五、 特异性 siRNA 干扰 RCRF 对 ACHN 细胞迁移能力的影响 | 第47-48页 |
讨论 | 第48-51页 |
全文总结 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-57页 |
综述 | 第57-72页 |
参考文献 | 第66-72页 |
在读期间完成和发表的文章和参加的科研工作 | 第72-73页 |
致谢 | 第73页 |