| 致谢 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-23页 |
| ·V-ATPase 的分子结构 | 第12-16页 |
| ·六聚体 A3B3催化亚单元的分子结构 | 第12-14页 |
| ·外周轴的分子结构 | 第14页 |
| ·衣领似结构亚单元的分子结构 | 第14-15页 |
| ·中心轴的分子结构 | 第15页 |
| ·c-ring 的分子结构 | 第15-16页 |
| ·V-ATPase 的功能特征 | 第16-18页 |
| ·六聚体 A3B3催化亚单元各亚基的功能特征 | 第16-17页 |
| ·外周轴各亚基的功能特征 | 第17页 |
| ·衣领似结构亚单元各亚基的功能特征 | 第17-18页 |
| ·中心轴各亚基的功能特征 | 第18页 |
| ·c-ring 各亚基的功能特征 | 第18页 |
| ·V-ATPase 活性的调控机制 | 第18-19页 |
| ·以 V-ATPase 为靶标在昆虫上的研究应用 | 第19-20页 |
| ·RNAi 相关研究 | 第20-22页 |
| ·RNAi 的定义 | 第20页 |
| ·RNAi 的机理 | 第20-21页 |
| ·RNAi 的实施方法 | 第21-22页 |
| ·应用 RNAi 技术防治害虫的可行性 | 第22页 |
| ·棉铃虫的抗药性及防治策略 | 第22-23页 |
| 2 引言 | 第23页 |
| 3 材料与方法 | 第23-31页 |
| ·棉铃虫 V-ATPase 亚基 A、B、C 和 H 基因的克隆 | 第23-29页 |
| ·实验材料 | 第23-25页 |
| ·供试昆虫 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23-24页 |
| ·主要仪器设备 | 第24页 |
| ·培养基及试剂的配制 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-29页 |
| ·棉铃虫总 RNA 的提取 | 第25页 |
| ·反转录 | 第25-26页 |
| ·引物的设计与合成 | 第26页 |
| ·PCR 反应体系和程序 | 第26-27页 |
| ·PCR 产物的回收纯化 | 第27页 |
| ·连接反应 | 第27页 |
| ·感受态的制备及转化 | 第27-28页 |
| ·质粒提取及酶切鉴定目的片段 | 第28页 |
| ·序列测定及序列分析 | 第28-29页 |
| ·棉铃虫不同虫态 V-ATPase 亚基 A、B、C 和 H 基因表达量比较 | 第29-31页 |
| ·实验材料 | 第29页 |
| ·供试昆虫 | 第29页 |
| ·主要试剂 | 第29页 |
| ·仪器设备 | 第29页 |
| ·培养基及试剂的配制 | 第29页 |
| ·实验方法 | 第29-31页 |
| ·棉铃虫不同虫态的 RNA 提取 | 第30页 |
| ·反转录 | 第30页 |
| ·引物的设计与合成 | 第30页 |
| ·荧光定量体系和程序 | 第30-31页 |
| ·扩增效率的验证 | 第31页 |
| ·数据分析 | 第31页 |
| 4 结果与分析 | 第31-50页 |
| ·棉铃虫 V-ATPase 亚基 A、B、C 和 H 基因的克隆 | 第31-46页 |
| ·棉铃虫总 RNA 的提取 | 第31页 |
| ·V-ATPase 亚基 A、B、C 和 H 基因 PCR 扩增产物 | 第31-32页 |
| ·质粒 DNA 的酶切鉴定 | 第32页 |
| ·序列结果与分析 | 第32-37页 |
| ·氨基酸序列一致性分析 | 第37-46页 |
| ·棉铃虫不同虫态 V-ATPase 亚基 A、B、C 和 H 基因表达量比较 | 第46-50页 |
| ·棉铃虫扩增效率的验证 | 第46-47页 |
| ·棉铃虫不同虫态 V-ATPase 亚基 A、B、C 和 H 基因的表达 | 第47-50页 |
| 5 讨论与结论 | 第50-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
