| 中文摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 前言 | 第11-14页 |
| 材料与方法 | 第14-46页 |
| 1 实验材料 | 第14-16页 |
| ·供试蚊 | 第14页 |
| ·细胞系 | 第14页 |
| ·主要试剂 | 第14-15页 |
| ·主要仪器设备 | 第15-16页 |
| 2 实验方法 | 第16-46页 |
| ·淡色库蚊RNA和DNA提取与鉴定 | 第16-18页 |
| ·miR-279-3p和miR-4448前体pre-miRNA的测定 | 第18-22页 |
| ·验证miR-279-3p和miR-4448及CYP325BB1和CYP4H31表达水平 | 第22-27页 |
| ·验证miR-279-3p和miR-4448及其靶基因CYP325BB1和CYP4H31的直接作用 | 第27-34页 |
| ·高表达CYP325BB1和CYP4H31对蚊溴氰菊酯敏感性的影响 | 第34-42页 |
| ·高表达miR-279-3p和miR-4448对淡色库蚊溴氰菊酯敏感性的影响 | 第42-46页 |
| 结果 | 第46-71页 |
| 1 淡色库蚊RNA提取与鉴定 | 第46-47页 |
| ·淡色库蚊RNA电泳鉴定 | 第46页 |
| ·淡色库蚊RNA浓度与纯度测定 | 第46-47页 |
| 2 miR-279-3p和miR-4448前体pre-miRNA的鉴定 | 第47-49页 |
| ·PCR扩增pre-miR-279-3p和pre-miR-4448序列 | 第47-48页 |
| ·TA克隆测定pre-miR-279-3p和pre-miR-4448序列 | 第48-49页 |
| 3 实时荧光定量PCR验证miR-279-3p和miR-4448及其靶基因CYP325BB1和CYP4H31表达水平 | 第49-51页 |
| ·预测miR-279-3p和miR-4448的靶基因 | 第49-50页 |
| ·实时荧光定量PCR鉴定miR-279-3p和miR-4448在淡色库蚊敏感和抗性品系中的表达水平 | 第50页 |
| ·实时荧光定量PCR鉴定CYP325BB1和CYP4H31在淡色库蚊敏感和抗性品系中的表达水平 | 第50-51页 |
| 4 双荧光报告系统验证miR-279-3p和mi-4448及其靶基因CYP325BB1和CYP4H31的直接作用 | 第51-58页 |
| ·CYP325BB1和CYP4H31部分3'UTR序列扩增 | 第51-54页 |
| ·双荧光报告载体构建 | 第54-57页 |
| ·双荧光报告检测结果 | 第57-58页 |
| 5 细胞水平检测高表达CYP325BB1和CYP4H31对蚊溴氰菊酯敏感性的影响 | 第58-65页 |
| ·PCR扩增CYP325BB1和CYP4H31 ORF序列及其真核表达载体构建 | 第58-63页 |
| ·蚊细胞转染PIB-CYP325BB1和PIB-CYP4H31的效率验证 | 第63-64页 |
| ·高表达CYP325BB1和CYP4H31对蚊细胞溴氰菊酯敏感性的影响 | 第64-65页 |
| 6 口饲和基因注射microRNA mimic分析高表达miR-279-3p和miR-4448对淡色库蚊溴氰菊酯敏感性的影响 | 第65-71页 |
| ·实时荧光定量PCR验证口饲淡色库蚊microRNA mimic后miR-279-3p和miR-4448及其靶基因CYP325BB1和CYP4H31表达水平的变化 | 第65-66页 |
| ·口饲microRNA mimic分析高表达miR-279-3p和miR-4448对淡色库蚊溴氰菊酯敏感性的影响 | 第66-68页 |
| ·实时荧光定量PCR验证基因注射淡色库蚊microRNA mimic后靶基因CYP325BB1和CYP4H31表达水平的变化 | 第68-69页 |
| ·基因注射microRNA mimic高表达miR-279-3p和miR-4448对淡色库蚊溴氰菊酯敏感性的影响 | 第69-71页 |
| 讨论 | 第71-75页 |
| 小结 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-82页 |
| 综述 | 第82-94页 |
| 参考文献 | 第89-94页 |
| 攻读学位期间发表文章情况 | 第94-95页 |
| 致谢 | 第95页 |
