摘要 | 第1-9页 |
1. 前言 | 第9-11页 |
2. 材料与方法 | 第11-30页 |
1. 实验材料与仪器 | 第11-13页 |
·实验动物 | 第11页 |
·细胞系 | 第11页 |
·NSCLC组织标本 | 第11页 |
·实验试剂 | 第11-13页 |
·实验仪器 | 第13页 |
2. 实验方法 | 第13-30页 |
·细胞培养 | 第13-14页 |
·总RNA的提取 | 第14-15页 |
·实时定量PCR | 第15-16页 |
·蛋白质的提取与浓度测定 | 第16-18页 |
·蛋白质免疫印迹(Western blot) | 第18-21页 |
·免疫组化 | 第21-23页 |
·细胞转染及阿霉素处理 | 第23页 |
·MTT法检测细胞增殖活力 | 第23-24页 |
·流式细胞术检测细胞周期 | 第24页 |
·流式细胞术检测细胞凋亡 | 第24-25页 |
·克隆形成试验 | 第25页 |
·Edu实验检测细胞增殖能力 | 第25-27页 |
·ChIP(免疫共沉淀)实验检测组蛋白甲基化水平 | 第27-29页 |
·裸鼠成瘤实验 | 第29页 |
·数据处理 | 第29-30页 |
3. 实验结果 | 第30-46页 |
·TUG1在NSCLC组织中的表达显著下调并与预后密切相关 | 第30-32页 |
·TUG1是p53的直接转录靶点 | 第32-34页 |
·TUG1对细胞增殖功能及周期的影响 | 第34-37页 |
·P53介导的抑增殖,促凋亡功能能够被RNAi TUG1明显逆转 | 第37-38页 |
·p53依赖的TUG1能够在表观遗传水平调控HOXB7的表达,从而参与AKT和MAPK信号通路,影响NSCLC细胞增殖 | 第38-42页 |
·TUG1对NSCLC细胞肿瘤形成能力的影响 | 第42-43页 |
·NSCLC组织中HOXB7表达与TUG1表达呈负相关 | 第43-46页 |
4. 讨论 | 第46-50页 |
参考文献 | 第50-57页 |
附图一 | 第57-58页 |
附表二 | 第58-60页 |
附表三 | 第60-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
附录(一)综述 | 第62-73页 |
参考文献 | 第67-73页 |
附录(二)缩略词表 | 第73-74页 |
附录(三)硕士在读期间发表的论文 | 第74页 |