| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第1章 绪论 | 第9-15页 |
| ·课题背景 | 第9-10页 |
| ·旱稻的优势 | 第9-10页 |
| ·旱稻抗旱性 | 第10页 |
| ·LEA 基因 | 第10-11页 |
| ·LEA 基因的定义 | 第10-11页 |
| ·LEA 蛋白的分类 | 第11页 |
| ·LEA 蛋白的研究进展 | 第11页 |
| ·常用的转化方法 | 第11-12页 |
| ·花粉管通道法 | 第11-12页 |
| ·基因枪转化法 | 第12页 |
| ·农杆菌转化法 | 第12页 |
| ·课题来源 | 第12页 |
| ·课题目的和研究内容 | 第12-15页 |
| ·研究目的 | 第12-13页 |
| ·研究内容 | 第13-15页 |
| 第2章 表达载体的构建 | 第15-35页 |
| ·概述 | 第15页 |
| ·材料与设备 | 第15-17页 |
| ·实验材料 | 第15页 |
| ·实验设备与仪器 | 第15-16页 |
| ·实验试剂 | 第16-17页 |
| ·实验方法 | 第17-25页 |
| ·基本培养基筛选及配制 | 第17页 |
| ·LEA 目的片段获得 | 第17-19页 |
| ·克隆载体的构建及鉴定 | 第19-22页 |
| ·表达载体的构建 | 第22-25页 |
| ·结果与分析 | 第25-32页 |
| ·目的基因的 PCR 扩增 | 第25-27页 |
| ·克隆载体菌落 PCR 鉴定结果 | 第27页 |
| ·克隆载体酶切鉴定结果 | 第27-28页 |
| ·克隆载体测序结果 | 第28-31页 |
| ·表达载体酶切鉴定结果 | 第31-32页 |
| ·将构建好的 pCAMIBA3301-LEA 质粒转入农杆菌中 | 第32页 |
| ·讨论 | 第32-34页 |
| ·PCR 体系的设计 | 第32-33页 |
| ·PCR 引物的设计原则 | 第33页 |
| ·酶切反应体系 | 第33页 |
| ·酶连体系 | 第33-34页 |
| ·本章小结 | 第34-35页 |
| 第3章 农杆菌法介导的旱稻转化 | 第35-45页 |
| ·概述 | 第35页 |
| ·实验材料与设备 | 第35-37页 |
| ·实验材料 | 第35-36页 |
| ·实验试剂 | 第36页 |
| ·设备与仪器 | 第36-37页 |
| ·实验方法 | 第37-43页 |
| ·培养基 | 第37-42页 |
| ·旱稻愈伤组织的诱导和继代 | 第42-43页 |
| ·农杆菌的活化及培养 | 第43页 |
| ·农杆菌侵染旱稻愈伤组织共培养 | 第43页 |
| ·脱菌及抗性愈伤筛选和继代 | 第43页 |
| ·愈伤分化 | 第43页 |
| ·壮苗 | 第43页 |
| ·结果与分析 | 第43-44页 |
| ·本章小结 | 第44-45页 |
| 第4章 转基因旱稻 DNA 水平的鉴定 | 第45-49页 |
| ·概述 | 第45页 |
| ·实验材料与试剂 | 第45页 |
| ·实验材料 | 第45页 |
| ·实验试剂 | 第45页 |
| ·旱稻 DNA 提取 | 第45-46页 |
| ·CTAB 的配制 | 第45页 |
| ·DNA 提取步骤 | 第45-46页 |
| ·对转基因旱稻进行 PCR 鉴定 | 第46-47页 |
| ·PCR 鉴定引物的设计 | 第46页 |
| ·PCR 鉴定结果 | 第46-47页 |
| ·讨论 | 第47-48页 |
| ·TAIL-PCR 技术 | 第47-48页 |
| ·从 RNA 水平鉴定 | 第48页 |
| ·本章小结 | 第48-49页 |
| 结论 | 第49-51页 |
| 附录 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 致谢 | 第57页 |