| 中文摘要 | 第1-19页 |
| ABSTRACT | 第19-23页 |
| 符号说明 | 第23-25页 |
| 绪论 | 第25-35页 |
| 1 肝移植现状 | 第25-27页 |
| 2 发酵法生产他克莫司 | 第27-29页 |
| 3 他克莫司口服制剂现状 | 第29-30页 |
| 4 纳米技术药物 | 第30-31页 |
| 5 聚合物胶束 | 第31-35页 |
| 第一部分 Vgb基因工程菌的构建及vgb基因对他克莫司产量影响的研究 | 第35-55页 |
| 1 实验材料 | 第35-36页 |
| ·试剂与药品 | 第35页 |
| ·主要仪器 | 第35-36页 |
| ·菌种 | 第36页 |
| ·培养基 | 第36页 |
| 2 实验方法 | 第36-42页 |
| ·紫外诱变获得出发菌株 | 第36-38页 |
| ·孢子悬液的制备 | 第36-37页 |
| ·紫外诱变选育 | 第37页 |
| ·摇瓶发酵 | 第37页 |
| ·他克莫司提取 | 第37页 |
| ·他克莫司效价测定 | 第37-38页 |
| ·重组vgb基因筑波链霉菌的构建 | 第38-41页 |
| ·重组质粒pSET152-vgb的构建 | 第38页 |
| ·试剂盒法提取质粒 | 第38-39页 |
| ·重组vgb基因筑波链霉菌的构建 | 第39-40页 |
| ·VHb的活性测定 | 第40页 |
| ·重组vgb基因工程菌株及原始菌株的发酵 | 第40-41页 |
| ·菌种保藏与活化 | 第40-41页 |
| ·摇瓶发酵 | 第41页 |
| ·1 L发酵罐发酵 | 第41页 |
| ·重组vgb基因工程菌株及原始菌株产量比较 | 第41页 |
| ·重组vgb基因工程菌株发酵条件优化 | 第41-42页 |
| ·不同浓度的碳源对他克莫司发酵的影响 | 第41-42页 |
| ·不同浓度的氮源对他克莫司发酵的影响 | 第42页 |
| ·不同种龄对他克莫司发酵的影响 | 第42页 |
| ·不同接种量对他克莫司发酵的影响 | 第42页 |
| 3 实验结果 | 第42-53页 |
| ·紫外诱变选育 | 第42-44页 |
| ·不同照射时间的致死率 | 第42-44页 |
| ·他克莫司效价测定 | 第44页 |
| ·重组啦基因筑波链霉菌的构建 | 第44-48页 |
| ·重组质粒pSET152-vgb的构建 | 第44-45页 |
| ·重组vgb基因筑波链霉菌的构建 | 第45-46页 |
| ·VHb的活性测定 | 第46-47页 |
| ·重组vgb基因重组菌株及原始菌株的发酵 | 第47-48页 |
| ·摇瓶发酵 | 第47-48页 |
| ·1 L发酵罐发酵 | 第48页 |
| ·重组vgb基因菌株发酵条件优化 | 第48-53页 |
| ·不同浓度的碳源对他克莫司发酵的影响 | 第48-50页 |
| ·不同浓度的氮源对他克莫司发酵的影响 | 第50-51页 |
| ·不同种龄对他克莫司发酵的影响 | 第51-52页 |
| ·不同接种量对他克莫司发酵的影响 | 第52-53页 |
| 4 讨论 | 第53页 |
| 5 本章小结 | 第53-55页 |
| 第二部分 他克莫司甲氧基聚乙二醇-聚乳酸纳米胶束的制备、表征及体外释放行为研究 | 第55-82页 |
| 1 实验材料 | 第55-56页 |
| ·试剂与药品 | 第55页 |
| ·主要仪器 | 第55-56页 |
| ·细胞 | 第56页 |
| 2 实验方法 | 第56-62页 |
| ·MPEG-PLA的合成与表征 | 第56-57页 |
| ·MPEG-PLA的合成 | 第56-57页 |
| ·MPEG-PLA的表征 | 第57页 |
| ·MPEG-PLA/FK506纳米胶束中FK506的测定 | 第57-58页 |
| ·检测波长的确定 | 第57页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第57页 |
| ·精密度 | 第57页 |
| ·方法回收率 | 第57-58页 |
| ·加样回收率 | 第58页 |
| ·检测限 | 第58页 |
| ·MPEG-PLA/FK506纳米胶束的制备与表征 | 第58-62页 |
| ·不同嵌段比的MPEG-PLA载体材料筛选 | 第58页 |
| ·MPEG-PLA/FK506纳米胶束制备方法的筛选 | 第58-59页 |
| ·MPEG-PLA/FK506纳米胶束制备工艺考察 | 第59-60页 |
| ·单因素考察MPEG-PLA/FK506纳米胶束制备工艺 | 第59页 |
| ·MPEG-PLA浓度的影响 | 第59页 |
| ·油/水相比例的影响 | 第59页 |
| ·他克莫司投药量的影响 | 第59页 |
| ·均匀设计-效应面法优化处方工艺 | 第59-60页 |
| ·MPEG-PLA/FK506纳米胶束的质量评价 | 第60-61页 |
| ·形态观察 | 第60页 |
| ·粒径分布 | 第60页 |
| ·包封率、载药量及稳定性测定 | 第60-61页 |
| ·晶体学性质 | 第61页 |
| ·MPEG-PLA/FK506纳米胶束的体外释放行为 | 第61页 |
| ·体外漏槽条件的确定 | 第61页 |
| ·体外释放 | 第61页 |
| ·细胞毒性研究 | 第61-62页 |
| 3 实验结果 | 第62-79页 |
| ·MPEG-PLA的表征 | 第62-63页 |
| ·MPEG-PLA/FK506纳米胶束中FK506的测定 | 第63-66页 |
| ·检测波长的确定 | 第63-64页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第64-65页 |
| ·精密度 | 第65页 |
| ·方法回收率 | 第65-66页 |
| ·加样回收率 | 第66页 |
| ·检测限 | 第66页 |
| ·MPEG-PLA/FK506纳米胶束的制备与表征 | 第66-79页 |
| ·不同嵌段比的MPEG-PLA载体材料筛选 | 第66-67页 |
| ·不同制备方法的筛选 | 第67-69页 |
| ·MPEG-PLA/FK506纳米胶束制备工艺考察 | 第69-74页 |
| ·单因素考察MPEG-PLA/FK506纳米胶束制备工艺 | 第69-70页 |
| ·MPEG-PLA浓度的影响 | 第69页 |
| ·油/水相比例的影响 | 第69页 |
| ·他克莫司投药量的影响 | 第69-70页 |
| ·均匀设计-效应面法优化处方工艺结果 | 第70-74页 |
| ·MPEG-PLA/FK506纳米胶束的质量评价 | 第74-76页 |
| ·形态观察 | 第74-75页 |
| ·粒径分布 | 第75页 |
| ·包封率、载药量及稳定性 | 第75-76页 |
| ·晶体学性质 | 第76页 |
| ·MPEG-PLA/FK506纳米胶束的体外释放行为 | 第76-79页 |
| ·他克莫司体外漏槽实验的确定 | 第76页 |
| ·体外释放 | 第76-79页 |
| ·细胞毒性研究 | 第79页 |
| 4 讨论 | 第79-80页 |
| 5 本章小结 | 第80-82页 |
| 第三部分 他克莫司甲氧基聚乙二醇-聚乳酸纳米胶束大鼠体内药动学及肝移植大鼠体内药效学研究 | 第82-103页 |
| 1 实验材料 | 第82-83页 |
| ·试剂与药品 | 第82-83页 |
| ·主要仪器 | 第83页 |
| ·实验动物 | 第83页 |
| 2 实验方法 | 第83-93页 |
| ·大鼠体内药动学研究 | 第83-85页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第83-85页 |
| ·加样 | 第83-84页 |
| ·温育 | 第84页 |
| ·洗涤 | 第84页 |
| ·加酶 | 第84页 |
| ·温育 | 第84页 |
| ·洗涤 | 第84页 |
| ·显色 | 第84页 |
| ·终止 | 第84页 |
| ·测定 | 第84-85页 |
| ·给药方案与血样采集 | 第85页 |
| ·肝移植大鼠体内药效学研究 | 第85-93页 |
| ·手术方法 | 第85-92页 |
| ·供肝获取 | 第85-86页 |
| ·受体手术 | 第86-87页 |
| ·术后处理 | 第87-92页 |
| ·给药方案与指标检测 | 第92-93页 |
| ·给药方案 | 第92-93页 |
| ·肝移植大鼠生存曲线的绘制 | 第93页 |
| ·肝移植大鼠血清谷丙转氨酶及总胆红素水平的测定 | 第93页 |
| ·肝移植大鼠肝脏病理学研究 | 第93页 |
| 3 实验结果 | 第93-97页 |
| ·大鼠体内药动学研究 | 第93-97页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第93-94页 |
| ·大鼠体内药动学结果 | 第94-97页 |
| 4 肝移植大鼠体内药效学研究 | 第97-101页 |
| ·肝移植大鼠生存曲线的绘制 | 第97-98页 |
| ·肝移植大鼠血清谷丙转氨酶及总胆红素水平的测定 | 第98-99页 |
| ·肝移植大鼠肝脏病理学研究 | 第99-101页 |
| 5 讨论 | 第101-102页 |
| 6 本章小结 | 第102-103页 |
| 全文总结与展望 | 第103-107页 |
| 1 结论 | 第103-105页 |
| 2 创新与发现 | 第105-106页 |
| 3 展望 | 第106-107页 |
| 参考文献 | 第107-119页 |
| 致谢 | 第119-120页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第120-121页 |
| 附录 代表性SCI论文 | 第121-161页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第161页 |
