| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-15页 |
| 第1章 绪论 | 第15-32页 |
| ·生物传感器 | 第15-16页 |
| ·生物传感器工作原理 | 第15页 |
| ·生物传感器的分类和特点 | 第15-16页 |
| ·滚环扩增技术 | 第16-22页 |
| ·滚环扩增原理 | 第17页 |
| ·滚环扩增的分类 | 第17-18页 |
| ·滚环扩增技术的应用 | 第18-22页 |
| ·纳米材料 | 第22-30页 |
| ·金属纳米簇生物传感技术 | 第22-28页 |
| ·类石墨烯二维层状纳米材料 | 第28-30页 |
| ·本研究论文的构想 | 第30-32页 |
| 第2章 基于目标自引物滚环扩增原位检测肿瘤细胞的 MICRORNA | 第32-45页 |
| ·前言 | 第32-33页 |
| ·实验部分 | 第33-36页 |
| ·试剂与仪器 | 第33-34页 |
| ·合成环探针 | 第34页 |
| ·细胞的培养和细胞的固定 | 第34-35页 |
| ·基于目标自引物滚环扩增技术的 miRNA 原位成像 | 第35页 |
| ·miRNA 单碱基延伸成像和 FISH 成像 | 第35页 |
| ·激光共聚焦成像 | 第35-36页 |
| ·实时荧光定量 RT-PCR 检测 miR-222 和 miR-223 | 第36页 |
| ·电泳分析 | 第36页 |
| ·结果与讨论 | 第36-44页 |
| ·实验原理及探针设计 | 第36-37页 |
| ·实验原理验证 | 第37-38页 |
| ·固定方法的考察 | 第38-40页 |
| ·方法的特异性 | 第40-41页 |
| ·基于目标自引物原位检测 miRNA 高灵敏特性的验证 | 第41-42页 |
| ·基于目标自引物滚环扩增原位检测 miRNA 高选择性的验证 | 第42-43页 |
| ·基于目标自引物滚环扩增原位检测检测多组分 miRNA | 第43-44页 |
| ·小结 | 第44-45页 |
| 第3章 基于滚环放大和 DNA模板银纳米簇合成的 DNA甲基化检测 | 第45-59页 |
| ·前言 | 第45-46页 |
| ·实验部分 | 第46-48页 |
| ·试剂和仪器 | 第46-47页 |
| ·细胞的培养以及 DNA 基因组提取 | 第47页 |
| ·DNA 亚硫酸盐处理 | 第47页 |
| ·RCA 反应步骤 | 第47-48页 |
| ·DNA 作为模板合成荧光银纳米簇 | 第48页 |
| ·琼脂糖电泳实验 | 第48页 |
| ·结果与讨论 | 第48-58页 |
| ·实验原理及探针设计 | 第48-49页 |
| ·实验机理验证 | 第49-50页 |
| ·实验条件优化 | 第50-51页 |
| ·实验选择性的验证 | 第51-52页 |
| ·电泳实验表征 | 第52-53页 |
| ·方法高灵敏度的验证 | 第53-55页 |
| ·多组分 DNA 甲基化的检测 | 第55-57页 |
| ·细胞 DNA 甲基化的检测 | 第57-58页 |
| ·小结 | 第58-59页 |
| 第4章 DNA为模板合成银纳米簇检测肿瘤细胞端粒酶的活性 | 第59-69页 |
| ·前言 | 第59-60页 |
| ·实验部分 | 第60-62页 |
| ·试剂和仪器 | 第60-61页 |
| ·细胞的培养 | 第61页 |
| ·端粒酶的提取 | 第61页 |
| ·合成 DNA 为模板的银纳米簇 | 第61页 |
| ·端粒酶活性的检测 | 第61页 |
| ·琼脂糖电泳实验 | 第61-62页 |
| ·结果与讨论 | 第62-67页 |
| ·实验设计与工作原理 | 第62页 |
| ·端粒酶检测的荧光响应 | 第62-64页 |
| ·端粒扩增时间的考察 | 第64页 |
| ·目标端粒酶活性的检测 | 第64-66页 |
| ·AZT 对端粒酶活性的抑制实验 | 第66页 |
| ·凝胶电泳分析 | 第66-67页 |
| ·小结 | 第67-69页 |
| 第5章 基于APTAMER自组装的二硫化钼平台高灵敏荧光检测生物分子 | 第69-83页 |
| ·前言 | 第69-70页 |
| ·实验部分 | 第70-71页 |
| ·试剂和仪器 | 第70页 |
| ·二硫化钼纳米片的制备 | 第70-71页 |
| ·ATP 的检测步骤 | 第71页 |
| ·凝血酶的检测步骤 | 第71页 |
| ·细胞中 ATP 的检测步骤 | 第71页 |
| ·结果与讨论 | 第71-82页 |
| ·实验原理 | 第71-72页 |
| ·合成的二硫化钼纳米片表征 | 第72-74页 |
| ·原理验证 | 第74-75页 |
| ·实验条件优化 | 第75-76页 |
| ·ATP 检测的灵敏度和选择性 | 第76-78页 |
| ·复杂生物样中 ATP 的检测 | 第78-79页 |
| ·凝血酶检测的灵敏度和选择性 | 第79-82页 |
| ·小结 | 第82-83页 |
| 第6章 基于二硫化钨平台高灵敏荧光检测T4多聚核苷酸激酶及其抑制剂 | 第83-97页 |
| ·前言 | 第83-84页 |
| ·实验部分 | 第84-86页 |
| ·试剂和仪器 | 第84-85页 |
| ·二硫化钨纳米片的制备 | 第85页 |
| ·DNA 杂交和荧光淬灭实验 | 第85页 |
| ·T4 PNK 酶的检测 | 第85页 |
| ·细胞提取液复杂体系中 T4 PNK 酶的检测 | 第85-86页 |
| ·结果与讨论 | 第86-96页 |
| ·实验原理 | 第86页 |
| ·合成的二硫化钨纳米片表征 | 第86-87页 |
| ·二硫化钨纳米片对单双链 DNA 结合力大小的差别的验证 | 第87-89页 |
| ·原理验证 | 第89页 |
| ·实验条件的优化 | 第89-91页 |
| ·T4 PNK 酶的检测 | 第91-93页 |
| ·复杂体系中 T4 PNK 酶的检测 | 第93-94页 |
| ·抑制剂对 T4 PNK 酶活性的影响 | 第94-96页 |
| ·小结 | 第96-97页 |
| 结论 | 第97-99页 |
| 参考文献 | 第99-118页 |
| 附录A 攻读学位期间所发表的学术论文目录 | 第118-119页 |
| 致谢 | 第119页 |
