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GC-MS法研究DXS磷酸丙糖异构化活性机理

中文摘要第1-5页
Abstract第5-10页
英文缩略词表第10-11页
第一章 绪论第11-31页
   ·萜类化合物(TERPENOIDS)简介第11-22页
     ·萜类化合物类别第11-12页
     ·萜类化合物生理生态学作用研究概况第12-13页
     ·萜类化合物的生物合成途径第13-16页
     ·1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸合酶(DXS)研究概况第16-20页
     ·磷酸丙糖异构酶(TPI)研究概况第20-22页
   ·常用化学衍生方法简介第22-29页
     ·硅烷基化法(silylation)第23-25页
     ·烷基化(alkylation)反应第25-27页
     ·酰基化(acylation)反应第27-29页
   ·本课题研究的意义第29-31页
第二章 ECDXS的诱导表达及其酶活性检测第31-42页
   ·实验材料与仪器第31-32页
     ·菌株第31页
     ·实验试剂第31-32页
     ·实验仪器第32页
   ·实验方法第32-38页
     ·实验中主要溶液的配方第32-34页
     ·目的蛋白EcDXS的诱导表达第34页
     ·亲和层析制备EcDXS第34-35页
     ·纯化产物的SDS-PAGE检测第35页
     ·DXS浓度测定第35-36页
     ·DXS活性检测第36-38页
   ·实验结果及讨论第38-40页
     ·重组蛋白DXS的亲和层析纯化结果第38页
     ·重组蛋白DXS的浓度测定结果第38-39页
     ·纸色谱测定DXS酶的合成活性结果第39页
     ·柱前衍生-HPLC检测DXS磷酸丙糖异构化活性第39-40页
   ·本章小结第40-42页
第三章 丹皮酚及其衍生物对DXS异构化活性的影响第42-51页
   ·实验试剂和仪器第42-43页
     ·试剂第42-43页
     ·仪器第43页
   ·实验方法第43-46页
     ·D-甘油醛-3-磷酸的合成第43-45页
     ·助溶剂对反应体系的影响第45页
     ·丹皮酚及其衍生物对DXS异构化活性的抑制第45-46页
     ·D-GAP的回收率实验第46页
   ·实验结果及分析第46-50页
     ·D-GAP的1H-NMR结果第46页
     ·D-GAP的纯度检测结果第46-47页
     ·助溶剂对反应体系的影响第47-48页
     ·对化合物本底吸收的考察结果第48页
     ·丹皮酚及其衍生物对DXS异构化活性的抑制结果第48-49页
     ·D-GAP的回收率实验结果第49-50页
   ·本章小结第50-51页
第四章 硅烷化法研究DXS异构化机理第51-64页
   ·实验材料第52页
     ·主要试剂第52页
     ·主要仪器第52页
   ·实验方法第52-57页
     ·溶液的配制第52-53页
     ·柱前衍生-HPLC法优化DXS催化磷酸丙糖异构化时间第53-54页
     ·优化D-GAP/DHAP硅烷化反应的条件第54-55页
     ·D-GAP的异构化样品的硅烷化第55-56页
     ·异构化样品的LC-MS分析第56-57页
   ·实验结果及讨论第57-62页
     ·柱前衍生-HPLC法优化DXS催化磷酸丙糖异构化时间第57-58页
     ·时间对硅烷化反应的考察结果第58页
     ·温度对硅烷化反应的考察结果第58-59页
     ·GC-MS分析DXS催化异构化的结果第59-60页
     ·DHA和D-GA硅烷化反应结果第60-61页
     ·LC-MS分析DXS催化异构化的结果第61-62页
   ·本章小结第62-64页
总结第64-66页
参考文献第66-74页
附录第74-79页
致谢第79页

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