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MicroRNA-21在ox-LDL诱导的血管内皮细胞中的功能及丹皮酚的干预作用

中文摘要第1-11页
ABSTRACT第11-16页
英文缩略词对照第16-18页
1 前言第18-20页
2 实验材料第20-23页
   ·动物第20页
   ·试剂和材料第20-21页
   ·主要溶液成分及配制第21-22页
   ·主要仪器第22-23页
3 实验方法第23-33页
   ·大鼠主动脉 VEC 的原代与传代培养第23-24页
     ·鼠尾胶原的制备第23页
     ·大鼠主动脉 VEC 的分离与培养第23页
     ·细胞传代第23-24页
     ·细胞冻存与复苏第24页
   ·ox-LDL 对 VEC miR-21 表达水平的影响第24-25页
     ·VEC 单层的制备第24页
     ·MTT 检测 ox-LDL 对 VEC 存活率的影响第24-25页
     ·miR-21 在 ox-LDL 诱导的 VEC 中的表达第25页
   ·miR-21 在 VEC 中的功能第25-26页
     ·miR-21mimic 和 inhibitor 的设计与合成第25页
     ·转染 miR-21mimic 或 inhibitor第25页
     ·细胞分组第25-26页
   ·荧光素酶报告基因实验第26-27页
   ·Pae 对 VEC 的干预作用第27-28页
     ·MTT 检测 Pae 对 ox-LDL 致 VEC 存活率的影响第27页
     ·细胞分组第27-28页
   ·ELISA 检测 TNF-α第28页
   ·细胞总 RNA 的提取与定量第28-29页
   ·RT-qPCR第29-30页
   ·琼脂糖凝胶电泳第30页
   ·细胞总蛋白的提取第30-31页
   ·蛋白定量(BCA 法)第31页
   ·Western blotting第31-33页
   ·统计方法与处理第33页
4 结果第33-45页
   ·ox-LDL 对 VEC miR-21 表达水平的影响第33-34页
     ·ox-LDL 对 VEC 存活率的影响第33-34页
     ·ox-LDL 刺激的 VEC 中 miR-21 水平的变化第34页
   ·miR-21 过表达或抑制对 PTEN 及 p38 MAPK 信号通路的影响第34-39页
     ·miR-21 mimic 和 inhibitor 对 miR-21 的影响第34-35页
     ·双荧光素酶基因报告实验对 miR-21 靶基因 PTEN 的验证第35-36页
     ·miR-21 mimic 和 inhibitor 对 PTEN mRNA 的影响第36-37页
     ·miR-21 mimic 和 inhibitor 对 PTEN 蛋白的影响第37-38页
     ·miR-21mimic 和 inhibitor 对 TNF-α的影响第38-39页
   ·Pae 对 VEC 的保护作用及机制第39-45页
     ·Pae 对 ox-LDL 致 VEC 存活率保护作用的时效与量效关系第39-40页
     ·Pae 对损伤 VEC 的 miR-21 水平的影响第40-41页
     ·Pae 对损伤 VEC 的 TNF-α分泌的影响第41页
     ·Pae 对损伤 VEC 的 PTEN mRNA 表达的影响第41-42页
     ·Pae 对损伤 VEC 的 PTEN 蛋白表达的影响第42-44页
     ·Pae 对损伤 VEC 的 p38 MAPK 信号通路的影响第44-45页
5 讨论第45-51页
   ·ox-LDL 诱导损伤的 VEC 中 miR-21 的表达第46-47页
   ·miR-21 调节 VEC 对 TNF-α的分泌第47页
   ·PTEN 是 VEC 中 miR-21 作用的靶基因第47-48页
   ·Pae 保护 ox-LDL 诱导的 VEC 的损伤第48-49页
   ·Pae 增加 ox-LDL 诱导损伤的 VEC 中 PTEN 的表达第49-50页
   ·Pae 调控 miR-21 对 p38 MAPK 信号通路的作用第50-51页
6 结论第51-52页
参考文献第52-57页
综述第57-69页
 参考文献第64-69页
个人简历第69-70页
致谢第70页

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