中文摘要 | 第1-11页 |
ABSTRACT | 第11-16页 |
英文缩略词对照 | 第16-18页 |
1 前言 | 第18-20页 |
2 实验材料 | 第20-23页 |
·动物 | 第20页 |
·试剂和材料 | 第20-21页 |
·主要溶液成分及配制 | 第21-22页 |
·主要仪器 | 第22-23页 |
3 实验方法 | 第23-33页 |
·大鼠主动脉 VEC 的原代与传代培养 | 第23-24页 |
·鼠尾胶原的制备 | 第23页 |
·大鼠主动脉 VEC 的分离与培养 | 第23页 |
·细胞传代 | 第23-24页 |
·细胞冻存与复苏 | 第24页 |
·ox-LDL 对 VEC miR-21 表达水平的影响 | 第24-25页 |
·VEC 单层的制备 | 第24页 |
·MTT 检测 ox-LDL 对 VEC 存活率的影响 | 第24-25页 |
·miR-21 在 ox-LDL 诱导的 VEC 中的表达 | 第25页 |
·miR-21 在 VEC 中的功能 | 第25-26页 |
·miR-21mimic 和 inhibitor 的设计与合成 | 第25页 |
·转染 miR-21mimic 或 inhibitor | 第25页 |
·细胞分组 | 第25-26页 |
·荧光素酶报告基因实验 | 第26-27页 |
·Pae 对 VEC 的干预作用 | 第27-28页 |
·MTT 检测 Pae 对 ox-LDL 致 VEC 存活率的影响 | 第27页 |
·细胞分组 | 第27-28页 |
·ELISA 检测 TNF-α | 第28页 |
·细胞总 RNA 的提取与定量 | 第28-29页 |
·RT-qPCR | 第29-30页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第30页 |
·细胞总蛋白的提取 | 第30-31页 |
·蛋白定量(BCA 法) | 第31页 |
·Western blotting | 第31-33页 |
·统计方法与处理 | 第33页 |
4 结果 | 第33-45页 |
·ox-LDL 对 VEC miR-21 表达水平的影响 | 第33-34页 |
·ox-LDL 对 VEC 存活率的影响 | 第33-34页 |
·ox-LDL 刺激的 VEC 中 miR-21 水平的变化 | 第34页 |
·miR-21 过表达或抑制对 PTEN 及 p38 MAPK 信号通路的影响 | 第34-39页 |
·miR-21 mimic 和 inhibitor 对 miR-21 的影响 | 第34-35页 |
·双荧光素酶基因报告实验对 miR-21 靶基因 PTEN 的验证 | 第35-36页 |
·miR-21 mimic 和 inhibitor 对 PTEN mRNA 的影响 | 第36-37页 |
·miR-21 mimic 和 inhibitor 对 PTEN 蛋白的影响 | 第37-38页 |
·miR-21mimic 和 inhibitor 对 TNF-α的影响 | 第38-39页 |
·Pae 对 VEC 的保护作用及机制 | 第39-45页 |
·Pae 对 ox-LDL 致 VEC 存活率保护作用的时效与量效关系 | 第39-40页 |
·Pae 对损伤 VEC 的 miR-21 水平的影响 | 第40-41页 |
·Pae 对损伤 VEC 的 TNF-α分泌的影响 | 第41页 |
·Pae 对损伤 VEC 的 PTEN mRNA 表达的影响 | 第41-42页 |
·Pae 对损伤 VEC 的 PTEN 蛋白表达的影响 | 第42-44页 |
·Pae 对损伤 VEC 的 p38 MAPK 信号通路的影响 | 第44-45页 |
5 讨论 | 第45-51页 |
·ox-LDL 诱导损伤的 VEC 中 miR-21 的表达 | 第46-47页 |
·miR-21 调节 VEC 对 TNF-α的分泌 | 第47页 |
·PTEN 是 VEC 中 miR-21 作用的靶基因 | 第47-48页 |
·Pae 保护 ox-LDL 诱导的 VEC 的损伤 | 第48-49页 |
·Pae 增加 ox-LDL 诱导损伤的 VEC 中 PTEN 的表达 | 第49-50页 |
·Pae 调控 miR-21 对 p38 MAPK 信号通路的作用 | 第50-51页 |
6 结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-57页 |
综述 | 第57-69页 |
参考文献 | 第64-69页 |
个人简历 | 第69-70页 |
致谢 | 第70页 |