| 摘要 | 第1-4页 |
| Summary | 第4-6页 |
| 缩略词 | 第6-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-22页 |
| 1 植物材料 RNA 提取方法研究进展 | 第10-14页 |
| ·富含多糖、多酚类物质的植物材料的 RNA 提取 | 第11-12页 |
| ·多酚类物质 | 第11-12页 |
| ·多糖类物质 | 第12页 |
| ·蛋白污染及次生代谢产物的污染 | 第12-13页 |
| ·RNA 提取过程中常见问题及解决办法 | 第13-14页 |
| ·外源性 RNase 的污染 | 第13-14页 |
| ·试验器材的污染 | 第13页 |
| ·试验人员的污染 | 第13页 |
| ·试验试剂的污染 | 第13-14页 |
| ·内源性 RNase 的污染 | 第14页 |
| ·RNA 的纯化 | 第14页 |
| 2 抑制性消减杂交技术 | 第14-21页 |
| ·抑制性消减杂交技术的原理 | 第14-15页 |
| ·抑制性消减杂交的操作流程 | 第15页 |
| ·抑制性消减杂交技术的优点与不足 | 第15-16页 |
| ·抑制性消减杂交技术的优点 | 第15-16页 |
| ·抑制性消减杂交技术的不足之处 | 第16页 |
| ·抑制性消减杂交技术在植物中的应用 | 第16-21页 |
| ·在植物生长发育过程中基因表达变化研究中的应用 | 第16-17页 |
| ·在植物受到非生物胁迫研究中的应用 | 第17-19页 |
| ·在植物受到生物胁迫研究中的应用 | 第19-21页 |
| 3 本试验研究技术路线 | 第21-22页 |
| 第二章 葡萄总 RNA 的提取 | 第22-33页 |
| 1 试验材料与方法 | 第22-25页 |
| ·试验材料 | 第22页 |
| ·试验材料的确定 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22页 |
| ·器材处理 | 第22页 |
| ·试验方法 | 第22-25页 |
| ·山葡萄和红地球葡萄生长期枝条韧皮部总 RNA 提取方法 | 第22-23页 |
| ·山葡萄和红地球葡萄休眠过程中枝条韧皮部提取方法 | 第23-24页 |
| ·葡萄试管苗 RNA 的提取方法 | 第24页 |
| ·山葡萄和红地球葡萄叶片和果皮总 RNA 的提取 | 第24页 |
| ·总 RNA 的纯化 | 第24-25页 |
| ·RNA 电泳检测 | 第25页 |
| 2 结果与分析 | 第25-33页 |
| ·山葡萄和红地球葡萄生长期枝条韧皮部 RNA 提取结果与分析 | 第25-29页 |
| ·不同浓度的 CTAB 提取缓冲液对 RNA 提取效果的影响 | 第25-26页 |
| ·不同 pH 条件下 5M KAc 对去除多糖的效果 | 第26-27页 |
| ·选用不同沉淀剂对 RNA 提取的影响 | 第27页 |
| ·异丙醇沉淀 RNA 用量对 RNA 提取的影响 | 第27-28页 |
| ·山葡萄和红地球葡萄生长期 RNA 提取方法的确定 | 第28-29页 |
| ·红地球和山葡萄休眠过程中枝条韧皮部 RNA 提取结果与分析 | 第29-30页 |
| ·不同裂解时间对 RNA 提取的影响 | 第29页 |
| ·不同离心时间对 RNA 提取的影响 | 第29-30页 |
| ·山葡萄和红地球葡萄休眠过程中 RNA 提取方法的确定 | 第30页 |
| ·葡萄试管苗叶片和茎段总 RNA 提取结果 | 第30-31页 |
| ·山葡萄和红地球葡萄叶片及果皮 RNA 提取结果 | 第31页 |
| ·DNaseⅠ纯化处理总 RNA | 第31-33页 |
| 第三章 SSH 建立 | 第33-44页 |
| 1 试验材料 | 第33页 |
| ·试验材料 | 第33页 |
| ·主要试剂 | 第33页 |
| 2 抑制性消减杂交 | 第33-39页 |
| ·cDNA 的合成 | 第33-35页 |
| ·第一链 cDNA 的合成 | 第33-34页 |
| ·第二链 cDNA 的合成 | 第34-35页 |
| ·RsaⅠ酶切 | 第35-36页 |
| ·接头连接 | 第36-37页 |
| ·杂交 | 第37-38页 |
| ·第一次消减杂交 | 第37页 |
| ·第二次消减杂交 | 第37-38页 |
| ·PCR 扩增 | 第38-39页 |
| 3 SSH 建立 | 第39-41页 |
| ·PCR 产物的连接 | 第39-40页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备-CaCl2法 | 第40页 |
| ·连接产物的转化 | 第40-41页 |
| ·蓝白斑筛选 | 第41页 |
| 4 结果与分析 | 第41-44页 |
| ·cDNA 的合成及 RsaⅠ酶切效果检测分析结果 | 第41页 |
| ·消减杂交 PCR（巢式 PCR）结果分析 | 第41-42页 |
| ·PCR 产物连接结果 | 第42页 |
| ·转化后的菌液 PCR 电泳结果 | 第42-44页 |
| 第四章 讨论 | 第44-47页 |
| 第五章 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-56页 |
| 附录 主要试剂及溶液(缓冲液)配制 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 导师简介 | 第58-59页 |
| 作者简介 | 第59-60页 |
