摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-9页 |
文献综述 | 第9-18页 |
1 引言 | 第18-20页 |
·研究价值和意义 | 第18页 |
·本研究解决的问题 | 第18-19页 |
·主要技术路线 | 第19-20页 |
2 实验材料与方法 | 第20-31页 |
·实验材料 | 第20-22页 |
·菌种与载体 | 第20页 |
·培养基 | 第20页 |
·主要工具酶和试剂盒 | 第20页 |
·标准参照物 | 第20页 |
·相关试剂 | 第20页 |
·试剂的配制 | 第20-22页 |
·仪器与设备 | 第22页 |
·实验方法 | 第22-31页 |
·菌株活化与鉴定 | 第22-23页 |
·ZJCN121 菌株所产岩藻多糖酶分子量 | 第23页 |
·ZJCN121 菌株基因组 DNA 的提取(CTAB/NaCl 法) | 第23-24页 |
·ZJCN121 基因组 DNA 的酶切 | 第24-26页 |
·基因组 DNA 酶切的基因组 DNA 样品量的优化 | 第24页 |
·ZJCN121 基因组 DNA 酶切的作用时间的优化 | 第24-25页 |
·ZJCN121 基因组 DNA 酶切的酶量的优化 | 第25页 |
·样品琼脂糖凝胶电泳 | 第25页 |
·ZJCN121 基因组 DNA 片段的回收 | 第25-26页 |
·质粒载体的制备 | 第26-27页 |
·质粒 pET-32a 的快速抽提 | 第26-27页 |
·质粒 pET-32a 的酶切 | 第27页 |
·质粒 pET-32a 酶切产物的去磷酸化 | 第27页 |
·质粒 pET-32a 酶切片段的回收 | 第27页 |
·基因组文库的构建 | 第27-28页 |
·酶切片段的链接 | 第27-28页 |
·感受态细胞的制备 | 第28页 |
·连接产物转化感受态细胞 | 第28页 |
·文库的鉴定 | 第28-29页 |
·文库稳定性的鉴定 | 第28-29页 |
·文库插入片段大小的检测 | 第29页 |
·岩藻多糖酶基因的筛选 | 第29-31页 |
·阳性克隆子的筛选 | 第29页 |
·阳性克隆子的酶切鉴定 | 第29页 |
·阳性克隆子产物的电泳鉴 | 第29页 |
·产酶曲线的绘制 | 第29-30页 |
·测序与分析 | 第30-31页 |
3 结果与分析 | 第31-43页 |
·ZJCN121 菌株的活化 | 第31页 |
·ZJCN121 菌株所产岩藻多糖酶分子量 | 第31-32页 |
·ZJCN121 菌株基因组 DNA 的提取 | 第32-33页 |
·ZJCN121 菌株基因组 DNA 的酶切 | 第33-35页 |
·pET-32a 载体的制备 | 第35页 |
·ZJCN121 菌株基因组文库的构建与鉴定 | 第35-36页 |
·阳性克隆子的筛选 | 第36-37页 |
·阳性克隆子的酶切鉴定和蛋白质电泳检测 | 第37页 |
·阳性克隆子产酶曲线的绘制 | 第37-38页 |
·阳性克隆子的测序与分析 | 第38-43页 |
4 讨论 | 第43-45页 |
5 结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
作者简介 | 第54页 |
在读期间发表的学术论文 | 第54页 |