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一株海洋细菌基因组文库的构建及岩藻多糖酶基因的筛选

摘要第1-4页
Abstract第4-9页
文献综述第9-18页
1 引言第18-20页
   ·研究价值和意义第18页
   ·本研究解决的问题第18-19页
   ·主要技术路线第19-20页
2 实验材料与方法第20-31页
   ·实验材料第20-22页
     ·菌种与载体第20页
     ·培养基第20页
     ·主要工具酶和试剂盒第20页
     ·标准参照物第20页
     ·相关试剂第20页
     ·试剂的配制第20-22页
     ·仪器与设备第22页
   ·实验方法第22-31页
     ·菌株活化与鉴定第22-23页
     ·ZJCN121 菌株所产岩藻多糖酶分子量第23页
     ·ZJCN121 菌株基因组 DNA 的提取(CTAB/NaCl 法)第23-24页
     ·ZJCN121 基因组 DNA 的酶切第24-26页
       ·基因组 DNA 酶切的基因组 DNA 样品量的优化第24页
       ·ZJCN121 基因组 DNA 酶切的作用时间的优化第24-25页
       ·ZJCN121 基因组 DNA 酶切的酶量的优化第25页
       ·样品琼脂糖凝胶电泳第25页
       ·ZJCN121 基因组 DNA 片段的回收第25-26页
     ·质粒载体的制备第26-27页
       ·质粒 pET-32a 的快速抽提第26-27页
       ·质粒 pET-32a 的酶切第27页
       ·质粒 pET-32a 酶切产物的去磷酸化第27页
       ·质粒 pET-32a 酶切片段的回收第27页
     ·基因组文库的构建第27-28页
       ·酶切片段的链接第27-28页
       ·感受态细胞的制备第28页
       ·连接产物转化感受态细胞第28页
     ·文库的鉴定第28-29页
       ·文库稳定性的鉴定第28-29页
       ·文库插入片段大小的检测第29页
     ·岩藻多糖酶基因的筛选第29-31页
       ·阳性克隆子的筛选第29页
       ·阳性克隆子的酶切鉴定第29页
       ·阳性克隆子产物的电泳鉴第29页
       ·产酶曲线的绘制第29-30页
       ·测序与分析第30-31页
3 结果与分析第31-43页
   ·ZJCN121 菌株的活化第31页
   ·ZJCN121 菌株所产岩藻多糖酶分子量第31-32页
   ·ZJCN121 菌株基因组 DNA 的提取第32-33页
   ·ZJCN121 菌株基因组 DNA 的酶切第33-35页
   ·pET-32a 载体的制备第35页
   ·ZJCN121 菌株基因组文库的构建与鉴定第35-36页
   ·阳性克隆子的筛选第36-37页
   ·阳性克隆子的酶切鉴定和蛋白质电泳检测第37页
   ·阳性克隆子产酶曲线的绘制第37-38页
   ·阳性克隆子的测序与分析第38-43页
4 讨论第43-45页
5 结论第45-46页
参考文献第46-53页
致谢第53-54页
作者简介第54页
在读期间发表的学术论文第54页

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