| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-23页 |
| ·钙依赖蛋白激酶（CDPK） | 第14-16页 |
| ·CDPK 的概念及空间位置 | 第14页 |
| ·CDPK 的结构特点 | 第14-15页 |
| ·植物中 CDPK 基因功能的研究现状 | 第15-16页 |
| ·RNAI 及其在植物基因工程研究中的应用 | 第16-20页 |
| ·RNAi 的作用机制 | 第16-17页 |
| ·RNAi 的优势和劣势 | 第17-18页 |
| ·RNAi 在植物基因工程中的应用 | 第18-20页 |
| ·GATEWAY 技术 | 第20-21页 |
| ·Gateway 技术的原理及特点 | 第20页 |
| ·Gateway 技术在基因功能研究中的应用 | 第20-21页 |
| ·本研究的背景、目的意义、主要内容及技术路线 | 第21-23页 |
| ·研究背景 | 第21页 |
| ·目的意义 | 第21-22页 |
| ·研究内容 | 第22页 |
| ·技术路线 | 第22-23页 |
| 第二章 烟草钙依赖蛋白激酶基因克隆 | 第23-34页 |
| ·材料与方法 | 第23-28页 |
| ·试验材料 | 第23页 |
| ·试验试剂 | 第23页 |
| ·总 RNA 的提取及纯度检测 | 第23-24页 |
| ·中间片段的克隆 | 第24-25页 |
| ·普通烟草 CDPK 基因全长 cDNA 的克隆 | 第25-27页 |
| ·普通烟草 CDPK 同源序列分析 | 第27-28页 |
| ·结果与分析 | 第28-33页 |
| ·中间片段的克隆 | 第28页 |
| ·普通烟草全长 CDPK 基因的克隆 | 第28-29页 |
| ·烟草 CDPK 基因序列特征分析 | 第29-33页 |
| ·讨论 | 第33-34页 |
| 第三章 烟草钙依赖蛋白激酶基因表达分析 | 第34-47页 |
| ·材料与方法 | 第34-36页 |
| ·试验材料与处理 | 第34页 |
| ·试验试剂及仪器 | 第34页 |
| ·总 RNA 的提取及纯度检测 | 第34页 |
| ·反转录合成 cDNA 模板 | 第34页 |
| ·RT-PCR 引物设计 | 第34页 |
| ·qRT-PCR 反应 | 第34-35页 |
| ·试验设计 | 第35页 |
| ·数据分析 | 第35-36页 |
| ·结果与分析 | 第36-44页 |
| ·不同组织中 CDPK 基因的表达分析 | 第36-37页 |
| ·不同胁迫条件下 CDPK 基因的表达分析 | 第37-44页 |
| ·讨论 | 第44-47页 |
| 第四章 烟草 CDPK 基因 RNAI 表达载体构建及遗传转化 | 第47-63页 |
| ·材料与方法 | 第47-53页 |
| ·植物材料 | 第47页 |
| ·Gateway 载体质粒及菌株 | 第47页 |
| ·主要试剂 | 第47页 |
| ·培养基及配制方法 | 第47-48页 |
| ·试剂配制 | 第48页 |
| ·无菌苗的培养 | 第48页 |
| ·总 RNA 的提取及纯度检测 | 第48页 |
| ·cDNA 的合成 | 第48页 |
| ·含有 attB 序列的目的基因的克隆及回收 | 第48-49页 |
| ·RNAi 表达载体的构建 | 第49-51页 |
| ·电击法转化农杆菌感受态细胞 | 第51-52页 |
| ·农杆菌介导的烟草遗传转化 | 第52页 |
| ·转基因植株的阳性检测 | 第52-53页 |
| ·结果与分析 | 第53-60页 |
| ·带有 attB 特异性结合位点的目的片段的克隆 | 第53-54页 |
| ·重组入门载体中目的片段的检测 | 第54-55页 |
| ·重组干扰载体目的片段的检测 | 第55-57页 |
| ·转基因阳性检测 | 第57-60页 |
| ·讨论 | 第60-63页 |
| 第五章 NTCDPK14 和 NTCDPK16 RNAI 功能分析 | 第63-67页 |
| ·材料与方法 | 第63页 |
| ·材料 | 第63页 |
| ·盐胁迫处理 T1 代幼苗 | 第63页 |
| ·盐胁迫下 NtCDPK14 和 NtCDPK16 在 T1 代幼苗中的表达分析 | 第63页 |
| ·结果与分析 | 第63-65页 |
| ·盐胁迫对烟草幼苗根生长的影响 | 第63-64页 |
| ·盐胁迫条件下 RNAi 幼苗中基因表达量分析 | 第64-65页 |
| ·讨论 | 第65-67页 |
| 第六章 全文结论 | 第67-69页 |
| ·结论 | 第67页 |
| ·创新点 | 第67页 |
| ·未来工作展望 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 作者简介 | 第76页 |
