| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 前言 | 第11-21页 |
| 参考文献 | 第17-21页 |
| 第一章 蛋白酪氨酸磷酸酶 SHP-1 基因克隆与表达 | 第21-29页 |
| 1. 实验材料 | 第21页 |
| ·菌株与主要试剂 | 第21页 |
| ·主要仪器 | 第21页 |
| 2. 实验方法 | 第21-23页 |
| ·人 SHP-1 全长基因的克隆 | 第21-22页 |
| ·重组质粒 SHP-1-pEASY-E1 的构建及鉴定 | 第22页 |
| ·重组质粒在原核细胞中的表达及鉴定 | 第22-23页 |
| 3. 实验结果 | 第23-25页 |
| ·人源 SHP-1 cDNA 全长的克隆 | 第23页 |
| ·重组质粒 SHP-1-pEASY-E1 的筛选与鉴定 | 第23-24页 |
| ·SHP-1 在原核细胞中的表达 | 第24页 |
| ·SHP-1 原核表达条件的优化 | 第24-25页 |
| 4. 小结与讨论 | 第25-27页 |
| 参考文献 | 第27-29页 |
| 第二章 SHP-1 抑制剂筛选模型的建立与抑制剂的筛选 | 第29-37页 |
| 1. 实验材料 | 第29-30页 |
| ·菌株 | 第29页 |
| ·试剂 | 第29页 |
| ·主要仪器 | 第29页 |
| ·主要试剂的配制 | 第29-30页 |
| 2. 实验方法 | 第30页 |
| ·SHP-1 酶浓度测定 | 第30页 |
| ·SHP-1 酶促反应动力学分析 | 第30页 |
| ·SHP-1 抑制剂高通量筛选模型的建立 | 第30页 |
| ·筛选模型的验证与样品 J11310 对 SHP-1 抑制率的测定 | 第30页 |
| 3. 实验结果 | 第30-32页 |
| ·SHP-1 的酶促反应动力学分析 | 第30-31页 |
| ·SHP-1 抑制剂的筛选模型 | 第31-32页 |
| ·NaVO4 对 SHP-1 的抑制作用 | 第32页 |
| ·J11310 对 SHP-1 的抑制作用 | 第32页 |
| 4．小结与讨论 | 第32-35页 |
| 参考文献 | 第35-37页 |
| 第三章 酪氨酸磷酸酶抑制剂在细胞水平上降糖效果评价 | 第37-49页 |
| 1. 实验材料 | 第37-38页 |
| ·细胞 | 第37页 |
| ·药品和试剂 | 第37-38页 |
| ·主要仪器 | 第38页 |
| ·主要试剂配制 | 第38页 |
| 2. 实验方法 | 第38-40页 |
| ·细胞培养 | 第38页 |
| ·细胞活力的测定 | 第38-39页 |
| ·细胞葡萄糖消耗的测定 | 第39页 |
| ·胰岛素的协同作用的测定 | 第39-40页 |
| 3．实验结果 | 第40-44页 |
| ·61 个样品浓度为 10μg/mL 时对 HepG2 细胞葡萄糖消耗的影响 | 第40-41页 |
| ·J11310 对 HepG2 细胞葡萄糖消耗的影响 | 第41-43页 |
| ·样品中对 HepG2 细胞胰岛素协同作用的影响 | 第43-44页 |
| 4．小结与讨论 | 第44-47页 |
| 参考文献 | 第47-49页 |
| 第四章 酪氨酸磷酸酶抑制剂 J11310 降糖机制的研究 | 第49-60页 |
| 1. 实验材料 | 第49-50页 |
| ·细胞 | 第49页 |
| ·药品和试剂 | 第49页 |
| ·主要试剂的配制 | 第49页 |
| ·主要仪器 | 第49-50页 |
| 2. 实验方法 | 第50-52页 |
| ·细胞培养 | 第50页 |
| ·RINm5F 细胞四氧嘧啶损伤保护实验 | 第50页 |
| ·细胞免疫荧光 | 第50-51页 |
| ·细胞总 RNA 的提取及浓度测定 | 第51页 |
| ·Real-time PCR | 第51-52页 |
| 3. 实验结果 | 第52-56页 |
| ·J11310 对四氧嘧啶损伤 RINm5F 细胞的影响 | 第52-53页 |
| ·J11310 对 HepG2 细胞 PGC-1α，p-AMPK，p-IRS 表达量的影响 | 第53-54页 |
| ·J11310 对 HepG2 细胞中 SHP1 mRNA 表达的影响 | 第54-56页 |
| 4. 小结与讨论 | 第56-59页 |
| 参考文献 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
