| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 中英文缩略词 | 第9-11页 |
| 前言 | 第11-14页 |
| 技术路线图 | 第14-15页 |
| 实验材料 | 第15-23页 |
| 一.细胞系 | 第15页 |
| 二.载体 | 第15页 |
| 三.实验动物 | 第15-16页 |
| 四.PCR引物及合成DNA片段 | 第16页 |
| 五.抗体 | 第16页 |
| 六.试剂盒 | 第16-17页 |
| 七.其他主要试剂 | 第17页 |
| 八.主要仪器设备 | 第17-18页 |
| 九.常用储存液、缓冲液及培养液 | 第18-22页 |
| 十.生物信息学软件及网络资源 | 第22页 |
| 十一.分子生物学软件 | 第22-23页 |
| 实验方法 | 第23-41页 |
| 一.miR-143表达腺病毒载体的构建(Ad-mR-143) | 第23-28页 |
| 1.病毒载体质粒的制备 | 第23-24页 |
| 2.腺病毒载体Ad-miR-143及对照Ad-NT的构建 | 第24-28页 |
| 二.Ad-miR-143转染Panc-1细胞进行体外细胞学试验 | 第28-38页 |
| 1. 胰腺癌Panc-1细胞的培养及Ad-miR-143转染Panc-1细胞 | 第28-30页 |
| 2. 细胞迁移实验 | 第30页 |
| 3. 细胞侵袭实验(Transwell实验) | 第30-31页 |
| 4. GEF1,GEF40,KRAS表达检测 | 第31-37页 |
| 5. Rho GTP酶活性检测(Rac1,CDC42,RhoA) | 第37-38页 |
| 6. MMP-2,MMP-9和E-cadherin蛋白检测 | 第38页 |
| 三.动物模型实验 | 第38-40页 |
| 1. 肝转移模型实验 | 第38-39页 |
| 2. 皮下移植瘤模型实验 | 第39-40页 |
| 附：统计学分析 | 第40-41页 |
| 结果 | 第41-45页 |
| 1. miR-143的表达显著降低了GEF1,GEF40和KRAS基因的mRNA和蛋白表达 | 第41-42页 |
| 2. miR-143的表达显著降低了Rho GTP酶的活性,显著降低了MMP2和MMP9的蛋白水平,但显著升高了E-cadherin蛋白水平 | 第42页 |
| 3. miR-143的表达显著抑制了胰腺癌Panc-1细胞的迁移和侵袭 | 第42-43页 |
| 4. 在动物模型中,miR-143的表达显著抑制了胰腺癌的转移和生长 | 第43-45页 |
| 讨论 | 第45-48页 |
| 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-53页 |
| 综述一 | 第53-89页 |
| 参考文献 | 第67-89页 |
| 综述二 | 第89-106页 |
| 参考文献 | 第98-106页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第106-107页 |
| 致谢 | 第107页 |
