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牛肝β-半乳糖苷酶的分离纯化及其催化核苷区域选择性糖基化反应的研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-13页
第一章 绪论第13-29页
   ·β-半乳糖苷酶简介第13-21页
     ·β-半乳糖苷酶的来源第13页
     ·β-半乳糖苷酶的结构与性质第13-15页
     ·β-半乳糖苷酶的分离纯化第15-17页
     ·β-半乳糖苷酶的应用第17-21页
   ·二糖核苷的生物活性与合成第21-24页
   ·生物催化二糖核苷的合成第24-27页
   ·本研究的主要内容和意义第27-29页
第二章 牛肝β -半乳糖苷酶的分离纯化及其酶学性质研究第29-46页
   ·实验材料第29-30页
   ·主要仪器设备第30页
   ·实验方法第30-34页
     ·牛肝粗酶液的提取及纯化第30-31页
     ·β-半乳糖苷酶活力和蛋白含量的测定第31-32页
     ·分子量的测定第32页
     ·pH 对酶活力及稳定性的影响第32-33页
     ·温度对酶活力及稳定性的影响第33页
     ·抑制剂对酶活力的影响第33页
     ·酶底物特异性的研究第33页
     ·动力学参数第33-34页
   ·结果与讨论第34-45页
     ·牛肝β-半乳糖苷酶的分离纯化第34-37页
     ·牛肝β-半乳糖苷酶的酶学性质第37-42页
     ·牛肝β-半乳糖苷酶的底物特异性第42-43页
     ·动力学研究第43-45页
   ·本章小结第45-46页
第三章 牛肝β-半乳糖苷酶催化核苷区域选择性岩藻糖基化反应的研究第46-70页
   ·实验材料第47页
     ·酶第47页
     ·主要试剂第47页
   ·主要仪器设备第47页
   ·实验方法第47-59页
     ·牛肝β-半乳糖苷酶活力的测定第47页
     ·酶量对牛肝β-半乳糖苷酶催化 FUdR 区域选择性岩藻糖基化反应的影响第47-48页
     ·缓冲液 pH 对牛肝β-半乳糖苷酶催化 FUdR 区域选择性岩藻糖基化反应的影响第48页
     ·反应温度对牛肝β-半乳糖苷酶催化 FUdR 区域选择性岩藻糖基化反应的影响第48页
     ·底物摩尔比对牛肝β-半乳糖苷酶催化 FUdR 区域选择性岩藻糖基化反应的影响第48-49页
     ·核苷底物结构对牛肝β-半乳糖苷酶催化核苷区域选择性岩藻糖基化反应的影响第49页
     ·反应初速度、产物产率、区域选择性的计算第49-51页
     ·高效液相色谱(HPLC)分析第51-53页
     ·产物的分离纯化和结构鉴定第53-59页
   ·结果与讨论第59-69页
     ·核苷糖基化衍生物的结构鉴定第59-62页
     ·酶量对牛肝β-半乳糖苷酶催化 FUdR 区域选择性岩藻糖基化反应的影响第62-64页
     ·缓冲液 p H 对牛肝β-半乳糖苷酶催化 FUdR 区域选择性岩藻糖基化反应的影响第64-65页
     ·反应温度对牛肝β-半乳糖苷酶催化 FUdR 区域选择性岩藻糖基化反应的影响第65-66页
     ·底物摩尔比对牛肝β-半乳糖苷酶催化 FUdR 区域选择性岩藻糖基化反应的影响第66-67页
     ·核苷底物结构对牛肝β-半乳糖苷酶催化核苷区域选择性岩藻糖基化反应的影响第67-69页
   ·本章小结第69-70页
第四章 牛肝β-半乳糖苷酶催化无环核苷区域选择性半乳糖基化反应的研究第70-84页
   ·实验材料第71页
     ·酶第71页
     ·主要试剂第71页
   ·主要仪器设备第71页
   ·实验方法第71-77页
     ·酶量对牛肝β-半乳糖苷酶催化阿昔洛韦区域选择性半乳糖基化反应的影响第71页
     ·缓冲液 pH 对牛肝β-半乳糖苷酶催化阿昔洛韦区域选择性半乳糖基化反应的影响第71-72页
     ·反应温度对牛肝β-半乳糖苷酶催化阿昔洛韦区域选择性半乳糖基化反应的影响第72页
     ·底物摩尔比对牛肝β-半乳糖苷酶催化阿昔洛韦区域选择性半乳糖基化反应的影响第72页
     ·核苷底物结构对牛肝β-半乳糖苷酶催化核苷区域选择性半乳糖基化反应的影响第72-73页
     ·反应初速度、产物产率、区域选择性的计算第73-74页
     ·高效液相色谱(HPLC)分析第74-75页
     ·产物的分离纯化和结构鉴定第75-77页
   ·结果与讨论第77-82页
     ·酶量对牛肝β-半乳糖苷酶催化阿昔洛韦区域选择性半乳糖基化反应的影响第77-79页
     ·缓冲液 pH 对牛肝β-半乳糖苷酶催化阿昔洛韦区域选择性半乳糖基化反应的影响第79-80页
     ·反应温度对牛肝β-半乳糖苷酶催化阿昔洛韦区域选择性半乳糖基化反应的影响第80-81页
     ·底物摩尔比对牛肝β-半乳糖苷酶催化阿昔洛韦区域选择性半乳糖基化反应的影响第81-82页
     ·核苷底物结构对牛肝β-半乳糖苷酶催化核苷区域选择性半乳糖基化反应的影响第82页
   ·本章小结第82-84页
结论与展望第84-86页
参考文献第86-95页
附录一 校正曲线第95-98页
附录二 高效液相色谱图第98-102页
附录三 NMR 谱图第102-110页
附录四 MS 谱图第110-114页
攻读硕士学位期间取得的研究成果第114-115页
致谢第115-116页
附件第116页

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