| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-24页 |
| ·蚕丝简介 | 第12-15页 |
| ·家蚕丝素蛋白 | 第12-14页 |
| ·丝胶的结构 | 第14-15页 |
| ·基因敲除技术 | 第15-17页 |
| ·基于同源重组的基因敲除技术 | 第15-16页 |
| ·利用随机插入突变进行的基因敲除 | 第16-17页 |
| ·RNAi引起的基因敲除 | 第17页 |
| ·传统基因敲除技术的缺陷 | 第17页 |
| ·锌指核酸酶 | 第17-24页 |
| ·锌指核酸酶的结构及作用原理 | 第18-19页 |
| ·锌指核酸酶技术在功能基因组中的应用 | 第19-23页 |
| ·锌指核酸酶技术面临的主要问题 | 第23-24页 |
| 第二章 引言 | 第24-26页 |
| ·研究背景及目的意义 | 第24-25页 |
| ·研究内容和技术路线 | 第25-26页 |
| 第三章 家蚕Fib-H基因敲除突变系的获得 | 第26-40页 |
| ·实验材料与仪器 | 第26-28页 |
| ·实验材料 | 第26页 |
| ·实验仪器与试剂配方 | 第26-28页 |
| ·实验方法 | 第28-32页 |
| ·家蚕丝素重链基因旳序列分析和勒向ZFN的设计与合成 | 第28页 |
| ·Fib-H-ZFN mRNA 的合成 | 第28-30页 |
| ·显微注射用家蚕蚕卵的处理 | 第30页 |
| ·Fib-H-ZFN的mRNA的胚胎显微注射 | 第30-31页 |
| ·Fib-H敲除突变个体的筛选 | 第31页 |
| ·可遗传突变个体的测序分析 | 第31页 |
| ·可遗传突变个体的表型观察与解剖学观察 | 第31-32页 |
| ·实验结果与分析 | 第32-38页 |
| ·家蚕丝素重链基因的序列分析 | 第32-33页 |
| ·家蚕丝素重链基因特异锌指核酸酶序列的设计与合成 | 第33页 |
| ·Fib-H-ZFN的mRNA的合成 | 第33-34页 |
| ·Fib-H-ZFN mRNA注射个体及敲除突变体的筛选 | 第34页 |
| ·可遗传敲除突变体的测序分析 | 第34-35页 |
| ·丝素重链突变个体的表型观察和解剖学观察 | 第35-38页 |
| ·讨论 | 第38-40页 |
| 第四章 家蚕Fib-H基因突变体中表达外源蛋白的初步尝试 | 第40-52页 |
| ·实验材料与仪器 | 第40-43页 |
| ·实验材料 | 第40页 |
| ·实验仪器与试剂配方 | 第40-43页 |
| ·实验方法 | 第43-48页 |
| ·GFP转基因载体的设计和构建 | 第43页 |
| ·转基因载体的构建 | 第43-48页 |
| ·显微注射 | 第48页 |
| ·转基因阳性个体的筛选 | 第48页 |
| ·GFP转基因个体的解剖学观察和茧丝蛋白含量分析 | 第48页 |
| ·实验结果与分析 | 第48-51页 |
| ·GFP转基因载体的构建 | 第48-49页 |
| ·GFP转基因阳性家蚕的筛选 | 第49页 |
| ·GFP转基因家蚕的荧光检测及GFP蛋白的分子检测 | 第49-51页 |
| ·讨论 | 第51-52页 |
| 第五章 总结 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 附录 | 第58-60页 |
| 硕士在读期间发表的文章及参加课题情况 | 第60-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
