| 致谢 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| 1. 文献综述 | 第8-11页 |
| ·转录因子概况 | 第8页 |
| ·NAC 转录因子的研究概况 | 第8-10页 |
| ·NAC 转录因子简介 | 第8页 |
| ·NAC 转录因子的生物学功能 | 第8-9页 |
| ·调节植物生长发育 | 第8-9页 |
| ·应答生物和非生物胁迫 | 第9页 |
| ·NAC 转录因子的表达调控 | 第9-10页 |
| ·NAC 转录因子的转录水平调控 | 第9-10页 |
| ·转录后调控 | 第10页 |
| ·翻译后调控 | 第10页 |
| ·烟碱的生物合成 | 第10页 |
| ·影响烟碱合成的胁迫因素 | 第10-11页 |
| 2. 引言 | 第11-12页 |
| 3. 材料与方法 | 第12-24页 |
| ·材料、试剂与仪器 | 第12页 |
| ·材料 | 第12页 |
| ·菌株、载体与主要试剂 | 第12页 |
| ·主要仪器 | 第12页 |
| ·实验方法 | 第12-24页 |
| ·总RNA 的提取 | 第12-13页 |
| ·cDNA 第一链的制备 | 第13页 |
| ·实时荧光定量PCR 检测SSH 文库差异表达基因 | 第13-14页 |
| ·烟草NtNAC-R1 基因的克隆 | 第14-15页 |
| ·克隆载体pMD19-T-NtNAC-R1 的构建 | 第15-16页 |
| ·连接 | 第15-16页 |
| ·转化 | 第16页 |
| ·烟草NtNAC-R1 的序列分析 | 第16-17页 |
| ·烟草NtNAC-R1 的组织特异性表达分析 | 第17页 |
| ·烟株打顶后24 h 内根尖组织NtNAC-R1 的表达分析 | 第17-19页 |
| ·RT-PCR 检测 | 第17页 |
| ·Northern 杂交检测 | 第17-19页 |
| ·变性琼脂糖凝胶电泳分离RNA（甲醛变性胶电泳） | 第17-18页 |
| ·转膜和RNA 固定 | 第18页 |
| ·探针标记 | 第18页 |
| ·预杂交、杂交和显色 | 第18-19页 |
| ·原核表达载体pRSETB-NtNAC-R1 的构建 | 第19页 |
| ·NtNAC-R1 在大肠杆菌中的诱导表达 | 第19页 |
| ·正义和反义表达载体pROK2-NtNAC-R1 构建 | 第19-20页 |
| ·相应植物表达载体的农杆菌转化及PCR 鉴定 | 第20-21页 |
| ·转化烟草 | 第21-22页 |
| ·烟草无菌苗的准备 | 第21页 |
| ·转基因烟苗的获得 | 第21-22页 |
| ·转基因烟草分子检测 | 第22-24页 |
| ·烟草转化植株的PCR 检测 | 第22-23页 |
| ·RT-PCR 检测 | 第23-24页 |
| 4. 结果与分析 | 第24-38页 |
| ·总RNA 质量的检测 | 第24页 |
| ·各候选基因相对表达量分析 | 第24-28页 |
| ·烟草NtNAC-R1 的克隆 | 第28-29页 |
| ·克隆载体pMD19-T-NtNAC-R1 的构建 | 第29-30页 |
| ·烟草NtNAC-R1 的序列分析 | 第30-33页 |
| ·烟草NtNAC-R1 的组织特异性表达分析 | 第33页 |
| ·NtNAC-R1 在烟株打顶后24h 内的表达谱分析 | 第33-34页 |
| ·原核表达载体pRSETB-NtNAC-R1 的构建 | 第34页 |
| ·NtNAC-R1 的原核表达 | 第34-35页 |
| ·正义和反义表达载体pROK2-NtNAC-R1 构建 | 第35页 |
| ·农杆菌PCR 检测 | 第35-36页 |
| ·转基因烟草的获得 | 第36页 |
| ·转基因烟草分子检测 | 第36-38页 |
| ·烟草转化植株的PCR 检测 | 第36-37页 |
| ·RT-PCR 检测 | 第37-38页 |
| 5. 结论与讨论 | 第38-42页 |
| ·结论 | 第38-39页 |
| ·讨论 | 第39-42页 |
| 参考文献 | 第42-47页 |
| Abstract | 第47-48页 |
