| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 文献综述 流行性乙型脑炎的研究进展 | 第12-30页 |
| 1 病毒的病原学特征 | 第12-15页 |
| ·JEV生物学特征 | 第12-13页 |
| ·JEV分子生物学特征 | 第13-15页 |
| 2 流行病学 | 第15-17页 |
| ·乙脑流行情况 | 第15-16页 |
| ·乙脑的流行特征 | 第16页 |
| ·乙脑的基因分型 | 第16-17页 |
| 3 发病机理及症状 | 第17-18页 |
| ·致病机制 | 第17页 |
| ·临床症状 | 第17页 |
| ·病理变化 | 第17-18页 |
| 4 乙型脑炎的诊断方法 | 第18-21页 |
| ·病毒的分离 | 第18页 |
| ·血清学诊断方法 | 第18-19页 |
| ·分子生物学诊断方法 | 第19-21页 |
| 5. 乙型脑炎的防控 | 第21页 |
| 6. 乙型脑炎疫苗的研究进展 | 第21-25页 |
| ·传统疫苗 | 第22-23页 |
| ·新型疫苗 | 第23-25页 |
| 参考文献 | 第25-30页 |
| 第一章 流行性乙型脑炎病毒的分离与鉴定 | 第30-40页 |
| 摘要 | 第30页 |
| ·试验材料 | 第30-31页 |
| ·病料的采集及处理 | 第30-31页 |
| ·细胞株与主要试剂 | 第31页 |
| ·仪器与设备 | 第31页 |
| ·试验方法 | 第31-33页 |
| ·病毒分离 | 第31-32页 |
| ·病毒的鉴定 | 第32-33页 |
| ·试验结果 | 第33-37页 |
| ·病毒的分离 | 第33-34页 |
| ·间接免疫荧光 | 第34-35页 |
| ·RT-PCR鉴定及序列分析结果 | 第35-37页 |
| ·讨论 | 第37-38页 |
| Abstract | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-40页 |
| 第二章 流行性乙型脑炎强毒NJ08株结构基因在传代致弱过程中的变异研究 | 第40-50页 |
| 摘要 | 第40页 |
| ·试验材料 | 第40-41页 |
| ·病毒、细胞和实验动物 | 第40页 |
| ·菌种和质粒 | 第40页 |
| ·工具酶与主要试剂 | 第40-41页 |
| ·仪器与设备 | 第41页 |
| ·试验方法 | 第41-44页 |
| ·病毒的传代致弱及毒力检测 | 第41页 |
| ·引物的引物与合成 | 第41页 |
| ·病毒结构基因的反转录反应及其扩增 | 第41-42页 |
| ·PCR产物的回收 | 第42页 |
| ·基因片段与PMD18-T载体的连接 | 第42页 |
| ·连接产物的转化 | 第42-43页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第43-44页 |
| ·序列测定与比较分析 | 第44页 |
| ·试验结果 | 第44-47页 |
| ·毒株致弱及各代次毒株脑内接种乳鼠的毒力差异 | 第44页 |
| ·结构基因的分段扩增 | 第44-45页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第45-46页 |
| ·C蛋白基因序列同源性分析 | 第46页 |
| ·PrM蛋白基因同源性分析 | 第46页 |
| ·E蛋白基因同源性分析 | 第46-47页 |
| ·讨论 | 第47-48页 |
| Abstract | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-50页 |
| 第三章 乙型脑炎病毒重组E蛋白、EDⅢ蛋白的原核 | 第50-62页 |
| 摘要 | 第50页 |
| ·试验材料 | 第50-51页 |
| ·菌种、质粒及病毒 | 第50页 |
| ·主要试剂 | 第50页 |
| ·仪器和设备 | 第50-51页 |
| ·试验方法 | 第51-55页 |
| ·目的片段的扩增 | 第51页 |
| ·PCR产物的回收 | 第51页 |
| ·回收PCR产物和载体质粒的酶切处理 | 第51-52页 |
| ·E基因片段与表达载体的连接 | 第52页 |
| ·转化到大肠杆菌DH5α | 第52页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第52-53页 |
| ·阳性重组质粒转化表达菌 | 第53页 |
| ·目的蛋白的表达与纯化 | 第53-54页 |
| ·重组E蛋白、EDⅢ蛋白Western blot分析 | 第54-55页 |
| ·试验结果 | 第55-57页 |
| ·RT-PCR及重组质粒的酶切鉴定 | 第55页 |
| ·小量诱导表达 | 第55-56页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第56-57页 |
| ·Western blot鉴定 | 第57页 |
| ·讨论 | 第57-59页 |
| Abstract | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-62页 |
| 第四章 检测乙型脑炎病毒抗体的间接ELISA方法的建立 | 第62-72页 |
| 摘要 | 第62页 |
| ·试验材料 | 第62-63页 |
| ·主要试剂 | 第62页 |
| ·主要仪器 | 第62-63页 |
| ·试验方法 | 第63-64页 |
| ·间接ELISA方法各项参数的确定 | 第63页 |
| ·判断标准的确定 | 第63-64页 |
| ·特异性实验 | 第64页 |
| ·重复性实验 | 第64页 |
| ·ELISA检测方法的初步应用 | 第64页 |
| ·试验结果 | 第64-67页 |
| ·间接ELISA方法参数的确定 | 第64-66页 |
| ·特异性试验 | 第66页 |
| ·重复性试验 | 第66-67页 |
| ·ELISA方法的初步应用 | 第67页 |
| ·讨论 | 第67-69页 |
| Abstract | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-72页 |
| 第五章 2010年上海地区猪乙型脑炎血清流行病学调查及血清中和抗体水平的初步研究 | 第72-82页 |
| 摘要 | 第72页 |
| ·试验材料 | 第72-73页 |
| ·猪群血清 | 第72页 |
| ·试剂 | 第72页 |
| ·主要仪器 | 第72-73页 |
| ·试验方法 | 第73-74页 |
| ·临床猪血清样品JEV抗体的检测 | 第73页 |
| ·病毒的空斑形成试验 | 第73页 |
| ·空白减少中和试验对血清中和抗体的检测 | 第73-74页 |
| ·数据分析 | 第74页 |
| ·试验结果 | 第74-78页 |
| ·猪血清JEV抗体的检测 | 第74-75页 |
| ·病毒毒力的检测 | 第75-76页 |
| ·血清中和病毒能力的检测 | 第76-77页 |
| ·血清中和抗体效价的检测 | 第77-78页 |
| ·讨论 | 第78-79页 |
| Abstract | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-82页 |
| 全文总结 | 第82-84页 |
| 附录 | 第84-88页 |
| 致谢 | 第88页 |
