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采用SELEX技术筛选玉米赤霉烯酮单克隆抗体DNA适配子的初步研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-14页
第一章 文献综述第14-29页
 1 玉米赤霉烯酮毒素的性质及危害第14-17页
   ·玉米赤霉烯酮毒素的理化性质及代谢第14-15页
   ·玉米赤霉烯酮毒素的危害性第15-17页
     ·对动物和人的影响第15页
     ·生殖毒性第15-16页
     ·DNA损伤毒性第16页
     ·免疫抑制毒性第16页
     ·肝肾毒性第16-17页
     ·致肿瘤毒性第17页
 2 玉米赤霉烯酮毒素的检测方法研究进展第17-20页
   ·薄层色谱法(TLC)第17-18页
   ·气相色谱-质谱联用法第18页
   ·高效液相色谱法(HPLC)第18页
   ·高效液相色谱-质谱联用法第18-19页
   ·免疫学检测法第19-20页
     ·ELISA第19-20页
     ·胶体金免疫层析技术第20页
   ·其他检测方法第20页
 3 SELEX技术及其研究进展第20-26页
   ·SELEX技术基本原理及特点第21-22页
   ·SELEX技术的改进第22-24页
     ·毛细管电泳SELEX第22页
     ·加尾SELEX技术第22-23页
     ·自动化SELEX技术第23页
     ·切换SELEX技术第23页
     ·荧光磁珠SELEX第23-24页
   ·针对不同靶标的适配子的研究第24-26页
     ·外毒素为靶标的适配子第24页
     ·细胞因子为靶标的适配子第24页
     ·小分子为靶标的适配子第24页
     ·细胞为靶标的适配子第24-25页
     ·菌体为靶标的适配子第25页
     ·毒素为靶标的适配子第25页
     ·蛋白为靶标的适配子第25-26页
 4 SELEX技术的优越性及其应用第26-29页
   ·核酸适配子用于检测技术中的优点第26页
   ·适配子与单克隆抗体的比较第26-27页
   ·核酸适配子用于污染物分析检测的现状第27页
   ·SELEX技术的应用第27-29页
第二章 玉米赤霉烯酮单克隆抗体的腹水制备及纯化第29-35页
 1 材料与方法第29-32页
   ·材料第29-30页
   ·方法第30-32页
 2 结果第32-34页
   ·腹水纯化第32-33页
   ·测定纯化单抗的效价第33页
   ·测定纯化单抗的蛋白浓度第33-34页
 3 讨论第34-35页
第三章 SELEX技术筛选玉米赤霉烯酮单克隆抗体的DNA适配子第35-51页
 1 材料与方法第35-41页
   ·材料第35页
   ·方法第35-41页
 2 结果第41-47页
   ·琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR扩增产物第41-42页
   ·PCR扩增反应条件的优化结果第42-45页
   ·SELEX筛选结果第45-46页
   ·各轮ssDNA适配子与ZEN单抗的亲和力第46-47页
 3 讨论第47-51页
   ·文库的选择第47页
   ·适配子的筛选固相分离介质的选择第47-48页
   ·靶分子浓度对筛选结果的影响第48页
   ·温度对SELEX筛选的影响第48-49页
   ·PCR扩增条件的优化对筛选结果的影响第49页
   ·次级文库的制备方法第49-51页
第四章 DNA适配子的克隆测序及分析第51-68页
 1 材料与方法第51-54页
   ·材料第51页
   ·方法第51-54页
 2 结果第54-66页
   ·克隆子序列测定结果第54-56页
   ·适配子二级结构预测第56-63页
   ·克隆子亲和力的测定结果第63-64页
   ·适配子间接竞争ELOSA抑制曲线的建立第64-66页
 3 讨论第66-68页
   ·适配子的克隆测序第66页
   ·适配子的二级结构第66页
   ·ELOSA检测方法第66-68页
第五章 全文总结第68-69页
参考文献第69-76页
附录1 英文缩写词表第76-77页
附录2 试剂配制第77-80页
致谢第80-81页
攻读硕士学位期间发表的论文第81页

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