摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-29页 |
1 玉米赤霉烯酮毒素的性质及危害 | 第14-17页 |
·玉米赤霉烯酮毒素的理化性质及代谢 | 第14-15页 |
·玉米赤霉烯酮毒素的危害性 | 第15-17页 |
·对动物和人的影响 | 第15页 |
·生殖毒性 | 第15-16页 |
·DNA损伤毒性 | 第16页 |
·免疫抑制毒性 | 第16页 |
·肝肾毒性 | 第16-17页 |
·致肿瘤毒性 | 第17页 |
2 玉米赤霉烯酮毒素的检测方法研究进展 | 第17-20页 |
·薄层色谱法(TLC) | 第17-18页 |
·气相色谱-质谱联用法 | 第18页 |
·高效液相色谱法(HPLC) | 第18页 |
·高效液相色谱-质谱联用法 | 第18-19页 |
·免疫学检测法 | 第19-20页 |
·ELISA | 第19-20页 |
·胶体金免疫层析技术 | 第20页 |
·其他检测方法 | 第20页 |
3 SELEX技术及其研究进展 | 第20-26页 |
·SELEX技术基本原理及特点 | 第21-22页 |
·SELEX技术的改进 | 第22-24页 |
·毛细管电泳SELEX | 第22页 |
·加尾SELEX技术 | 第22-23页 |
·自动化SELEX技术 | 第23页 |
·切换SELEX技术 | 第23页 |
·荧光磁珠SELEX | 第23-24页 |
·针对不同靶标的适配子的研究 | 第24-26页 |
·外毒素为靶标的适配子 | 第24页 |
·细胞因子为靶标的适配子 | 第24页 |
·小分子为靶标的适配子 | 第24页 |
·细胞为靶标的适配子 | 第24-25页 |
·菌体为靶标的适配子 | 第25页 |
·毒素为靶标的适配子 | 第25页 |
·蛋白为靶标的适配子 | 第25-26页 |
4 SELEX技术的优越性及其应用 | 第26-29页 |
·核酸适配子用于检测技术中的优点 | 第26页 |
·适配子与单克隆抗体的比较 | 第26-27页 |
·核酸适配子用于污染物分析检测的现状 | 第27页 |
·SELEX技术的应用 | 第27-29页 |
第二章 玉米赤霉烯酮单克隆抗体的腹水制备及纯化 | 第29-35页 |
1 材料与方法 | 第29-32页 |
·材料 | 第29-30页 |
·方法 | 第30-32页 |
2 结果 | 第32-34页 |
·腹水纯化 | 第32-33页 |
·测定纯化单抗的效价 | 第33页 |
·测定纯化单抗的蛋白浓度 | 第33-34页 |
3 讨论 | 第34-35页 |
第三章 SELEX技术筛选玉米赤霉烯酮单克隆抗体的DNA适配子 | 第35-51页 |
1 材料与方法 | 第35-41页 |
·材料 | 第35页 |
·方法 | 第35-41页 |
2 结果 | 第41-47页 |
·琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR扩增产物 | 第41-42页 |
·PCR扩增反应条件的优化结果 | 第42-45页 |
·SELEX筛选结果 | 第45-46页 |
·各轮ssDNA适配子与ZEN单抗的亲和力 | 第46-47页 |
3 讨论 | 第47-51页 |
·文库的选择 | 第47页 |
·适配子的筛选固相分离介质的选择 | 第47-48页 |
·靶分子浓度对筛选结果的影响 | 第48页 |
·温度对SELEX筛选的影响 | 第48-49页 |
·PCR扩增条件的优化对筛选结果的影响 | 第49页 |
·次级文库的制备方法 | 第49-51页 |
第四章 DNA适配子的克隆测序及分析 | 第51-68页 |
1 材料与方法 | 第51-54页 |
·材料 | 第51页 |
·方法 | 第51-54页 |
2 结果 | 第54-66页 |
·克隆子序列测定结果 | 第54-56页 |
·适配子二级结构预测 | 第56-63页 |
·克隆子亲和力的测定结果 | 第63-64页 |
·适配子间接竞争ELOSA抑制曲线的建立 | 第64-66页 |
3 讨论 | 第66-68页 |
·适配子的克隆测序 | 第66页 |
·适配子的二级结构 | 第66页 |
·ELOSA检测方法 | 第66-68页 |
第五章 全文总结 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-76页 |
附录1 英文缩写词表 | 第76-77页 |
附录2 试剂配制 | 第77-80页 |
致谢 | 第80-81页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第81页 |