| 致谢 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 主要缩略词 | 第13-14页 |
| 目次 | 第14-17页 |
| 1 文献综述 | 第17-28页 |
| ·志贺氏菌简介 | 第17页 |
| ·志贺氏菌的进化 | 第17-19页 |
| ·志贺氏菌致病途径 | 第19-20页 |
| ·志贺氏菌发病机理的分子决定因素 | 第20-23页 |
| ·毒力大质粒 | 第20-21页 |
| ·毒力大质粒基因表达调控 | 第21-22页 |
| ·Ⅲ型分泌系统 | 第22-23页 |
| ·志贺氏菌抗酸机制 | 第23-24页 |
| ·细菌脂多糖的功能 | 第24页 |
| ·BN-PAGE简介 | 第24-26页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第26-28页 |
| 2 温度对福氏志贺氏菌2457T LPS合成的影响 | 第28-51页 |
| ·实验材料 | 第29-32页 |
| ·菌株 | 第29页 |
| ·主要化学试剂与耗材 | 第29-30页 |
| ·实验仪器与分析软件 | 第30页 |
| ·常用试剂配制 | 第30-32页 |
| ·实验方法 | 第32-38页 |
| ·细菌培养 | 第32页 |
| ·BN/SDS-PAGE 2-D电泳 | 第32-35页 |
| ·RNA的提取和Real-time PCR | 第35-37页 |
| ·LPS的制备 | 第37页 |
| ·银染 | 第37页 |
| ·透射电子显微镜 | 第37页 |
| ·构建Myc标签的SodB蛋白 | 第37-38页 |
| ·Western blot分析 | 第38页 |
| ·实验结果 | 第38-43页 |
| ·不同培养温度下福氏志贺氏菌蛋白复合物差异表达分析 | 第38-40页 |
| ·差异表达蛋白的转录水平验证 | 第40-41页 |
| ·差异表达蛋白与细菌LPS合成的关系 | 第41-42页 |
| ·不同培养温度下LPS合成的量不一致 | 第42-43页 |
| ·讨论 | 第43-51页 |
| ·BN/SDS-PAGE 2-D电泳技术的局限性 | 第43-45页 |
| ·不同培养温度差异表达蛋白复合物分析 | 第45-48页 |
| ·Real-time PCR验证 | 第48页 |
| ·LPS的合成与温度相关 | 第48-51页 |
| 3 福氏志贺氏菌毒力大质粒与抗酸性的关系 | 第51-83页 |
| ·实验材料 | 第52-53页 |
| ·菌株和载体 | 第52页 |
| ·主要化学试剂与耗材 | 第52页 |
| ·实验仪器与分析软件 | 第52页 |
| ·主要试剂的配制 | 第52-53页 |
| ·实验方法 | 第53-58页 |
| ·IEF/SDS 2-D电泳 | 第53页 |
| ·301 R27质粒导入株的构建 | 第53-56页 |
| ·sfh基因导入株的构建 | 第56-57页 |
| ·磁珠捕获实验 | 第57页 |
| ·GadB表达载体的构建 | 第57页 |
| ·蛋白降解实验 | 第57页 |
| ·流式细胞术检测抗酸性 | 第57-58页 |
| ·菌株ATP含量检测 | 第58页 |
| ·实验结果 | 第58-72页 |
| ·毒力大质粒影响GadA/B的表达 | 第58-60页 |
| ·导入R27质粒GadA/B表达降低 | 第60-61页 |
| ·与GadA/B相互作用蛋白的分离与鉴定 | 第61-63页 |
| ·导入sfh基因GadA/B表达降低 | 第63页 |
| ·GadB的表达调控不是翻译后的蛋白降解 | 第63-64页 |
| ·GadA/B的表达调控在转录水平 | 第64-65页 |
| ·GadA/B的表达水平与菌株抗酸性相关 | 第65-69页 |
| ·毒力大质粒降低ATP合成酶复合物的表达 | 第69页 |
| ·菌株中ATP含量检测 | 第69-70页 |
| ·毒力大质粒不改变ATP合成酶AtpA和AtpD亚基的表达 | 第70-71页 |
| ·Western blot验证毒力大质粒不改变ATP合成酶AtpD亚基的表达 | 第71-72页 |
| ·讨论 | 第72-83页 |
| ·各菌株BN/SDS-PAGE 2-D电泳和IEF/SDS-PAGE 2-D电泳原图 | 第72-77页 |
| ·毒力大质粒与染色体协同进化 | 第77-80页 |
| ·细菌基因表达调控机制 | 第80-81页 |
| ·ATP合成酶BN/SDS PAGE和IEF/SDS PAGE 2-D电泳结果不一致的原因 | 第81-83页 |
| 结论 | 第83-85页 |
| 参考文献 | 第85-95页 |
| 作者简历 | 第95页 |
