| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 1 前言 | 第10-26页 |
| ·微生物脂肪酶 | 第10-16页 |
| ·微生物脂肪酶概述 | 第10页 |
| ·微生物脂肪酶的应用研究 | 第10-16页 |
| ·用于生产生物柴油脂肪酶的研究进展 | 第16-18页 |
| ·毕赤酵母表达系统的研究进展 | 第18-23页 |
| ·P.pastoris表达系统的构成 | 第19页 |
| ·P.pastoris表达系统的宿主菌 | 第19-20页 |
| ·P.pastoris的转化方法及整合方式 | 第20-21页 |
| ·外源基因表达质粒在P.pastoris中的表达方式 | 第21页 |
| ·外源基因在P.pastoris表达系统中表达的影响因素 | 第21-23页 |
| ·目的基因优化设计的策略 | 第23-25页 |
| ·目的基因的特性 | 第23页 |
| ·mRNA5’端非翻译区 | 第23页 |
| ·起始密码子AUG的旁侧序列及mRNA二级结构 | 第23-24页 |
| ·密码子的选择 | 第24页 |
| ·基因剂量 | 第24-25页 |
| ·本文研究的目的和意义 | 第25-26页 |
| 2 黑曲霉脂肪酶基因突变及其在毕赤酵母中的表达 | 第26-46页 |
| ·材料与方法 | 第26-37页 |
| ·实验材料 | 第26-29页 |
| ·实验方法 | 第29-37页 |
| ·结果与分析 | 第37-43页 |
| ·引物设计 | 第37页 |
| ·黑曲霉脂肪酶突变基因的扩增、克隆及重组表达载体的构建 | 第37-40页 |
| ·重组黑曲霉脂肪酶在P.pastoris中的表达 | 第40-43页 |
| ·讨论 | 第43-46页 |
| 3 黑曲霉脂肪酶基因(lipAm)的优化设计、合成及其表达 | 第46-72页 |
| ·材料与方法 | 第46-53页 |
| ·实验材料 | 第46-47页 |
| ·实验方法 | 第47-53页 |
| ·实验结果 | 第53-69页 |
| ·黑曲霉脂肪酶lipA密码子的优化设计及引物合成 | 第53-58页 |
| ·黑曲霉脂肪酶优化基因lipAm的合成、验证及校正 | 第58-62页 |
| ·黑曲霉脂肪酶成熟肽基因lipAm-27的扩增 | 第62-64页 |
| ·重组表达载体pPIC9K-lipAm及pPIC9K-lipAm-27的构建 | 第64-66页 |
| ·重组黑曲霉脂肪酶的转化及在P.pastoris中的表达 | 第66-69页 |
| ·讨论 | 第69-72页 |
| 参考文献 | 第72-79页 |
| 在校期间发表的论文、科研成果等 | 第79-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
