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芍药属植物超低温保存花粉的差异表达蛋白质研究及花粉库的建立

中文摘要第1-6页
ABSTRACT第6-9页
缩略词第9-14页
1 引言第14-41页
   ·植物种质资源超低温保存技术研究进展第14-34页
     ·超低温保存基本原理第15-17页
       ·超低温保存理论第15-16页
       ·超低温保存技术原理第16-17页
     ·超低温保存技术研究进展第17-27页
       ·程序降温法(CONTROLLED-RATE COOLING)第17-18页
       ·脱水法(DEHYDRATION)第18-19页
       ·玻璃化法(VITRIFICATION)第19-27页
     ·超低温保存技术在其他领域的应用第27-28页
     ·超低温保存研究的热点问题——机理研究进展第28-34页
       ·如何实现超低温保存后的高存活率第28-32页
       ·超低温保存技术的可靠性问题第32-33页
       ·超低温能否真的实现永久保存第33-34页
   ·芍药属植物种质资源保存现状第34-38页
     ·芍药属种质资源第34-36页
     ·我国芍药属植物种质资源保存现状第36-38页
       ·牡丹、芍药种质资源的原生境保存现状第36-37页
       ·牡丹、芍药种质资源的迁地保存第37-38页
       ·牡丹、芍药种质资源的离体保存第38页
   ·本研究的目的意义和技术路线第38-41页
     ·研究目的及意义第38页
       ·研究目的第38页
       ·研究意义第38页
     ·研究内容第38-40页
     ·研究技术路线第40-41页
2 超低温保存花粉的差异表达蛋白质研究第41-86页
   ·材料与方法第42-53页
     ·试验材料第42页
     ·化学药品及试剂第42-45页
       ·化学药品第42页
       ·试剂第42-45页
     ·仪器和设备第45页
     ·试验方法第45-53页
       ·花粉含水量测定第45页
       ·花粉萌发率的测定第45页
       ·花粉的超低温保存第45-46页
       ·可溶性蛋白质样品制备方法的选择第46-47页
       ·蛋白质含量测定第47页
       ·不同提取方法所获可溶性蛋白质的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)第47-48页
       ·可溶性蛋白质的双向电泳第48-50页
       ·凝胶染色第50页
       ·凝胶扫描、分析第50-51页
       ·差异表达蛋白质点的质谱鉴定第51-52页
       ·生物信息学分析第52-53页
   ·结果与分析第53-81页
     ·花粉蛋白质双向电泳技术的优化第53-57页
       ·不同提取方法提取牡丹花粉可溶性蛋白质效果对比第53-56页
       ·不同等点聚焦参数对电泳效果的影响第56页
       ·IPG胶条PH范围及长度对双向电泳效果的影响第56-57页
     ·超低温保存对花粉差异表达蛋白质的影响第57-66页
       ·超低温保存‘凤丹白’、‘大藤锦’花粉萌发率第57-58页
       ·超低温保存对‘凤丹白’花粉可溶性蛋白质的影响第58-63页
       ·超低温保存对‘大藤锦’花粉可溶性蛋白质的影响第63-65页
       ·两个品种花粉超低温保存差异表达蛋白质对比分析第65-66页
     ·差异表达蛋白质的质谱鉴定结果第66-81页
       ·差异表达蛋白质的质谱鉴定结果第66-72页
       ·超温胁迫条件下差异表达蛋白质的功能分类第72-80页
       ·差异表达蛋白质的细胞内定位第80-81页
   ·讨论第81-84页
     ·稳定的双向电泳技术平台的建立第81页
     ·超低温保存对花粉蛋白质表达的影响第81-82页
     ·超低温保存可能的蛋白质作用机制第82-84页
       ·超低温保存花粉细胞骨架的稳定性第82页
       ·超低温保存花粉渗透调节第82-83页
       ·参与氧自由基清除的蛋白第83页
       ·参与糖代谢和能量代谢的蛋白第83页
       ·其它蛋白质的表达变化第83-84页
   ·小结第84-86页
3 芍药属超低温花粉库的建立及应用第86-115页
   ·试验材料第86-92页
   ·试验方法第92-94页
     ·花粉的采集第92-93页
     ·花粉萌发率的测定第93页
     ·花粉含水量的测定第93-94页
     ·花粉保存方法对比试验第94页
     ·人工杂交授粉试验第94页
     ·种子采收及播种第94页
   ·结果与分析第94-112页
     ·芍药属植物174个(种/品种)花粉萌发率测定第94-98页
     ·不同低温保存方法对花粉萌发率的影响第98-100页
     ·采集年份对花粉超低温保存效果的影响第100-103页
     ·LN2保存时间对花粉萌发率的影响第103-105页
     ·芍药属植物超低温花粉库的建立第105-109页
     ·超低温花粉库花粉授粉杂交结实率情况第109-110页
     ·超低温花粉库中花粉在杂交育种中的应用第110-112页
   ·讨论第112-114页
   ·小结第114-115页
4 牡丹、芍药胚及休眠芽茎尖的玻璃化超低温保存研究第115-128页
   ·材料和方法第115-118页
     ·试验材料和试剂第115-116页
       ·试验材料第115-116页
       ·试剂第116页
     ·试验方法第116-118页
       ·牡丹、芍药胚的玻璃化法超低温保存程序研究第116-117页
       ·胚的超低温保存技术程序试验设计第117页
       ·牡丹、芍药胚苗的再生与移栽第117页
       ·牡丹、芍药休眠芽茎尖的玻璃化法超低温保存程序研究第117-118页
       ·茎尖超低温保存技术程序试验设计第118页
       ·牡丹、芍药休眠芽茎尖的再生与成活率统计第118页
   ·结果与分析第118-125页
     ·牡丹、芍药胚的玻璃化超低温保存研究结果第118-122页
       ·牡丹、芍药胚的玻璃化超低温保存程序研究第118-121页
       ·超低温保存胚的再生第121页
       ·玻璃化超低温保存程序的适用性研究第121-122页
     ·牡丹、芍药茎尖的玻璃化超低温保存第122-125页
   ·讨论第125-126页
     ·超低温保存方法对材料保存效果的影响第125页
     ·材料大小对保存效果的影响第125页
     ·预培养对保存效果的影响第125-126页
     ·玻璃化溶液处理时间对超低温保存效果的影响第126页
   ·小结第126-128页
5 结论第128-130页
6 建议与展望第130-131页
参考文献第131-157页
图版第157-165页
个人简介第165-166页
导师简介第166-167页
获得成果目录清单第167-168页
致谢第168页

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