中文摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-12页 |
目录 | 第12-14页 |
缩略语表 | 第14-16页 |
前言 | 第16-18页 |
第一章 材料与方法 | 第18-36页 |
·主要试剂和耗材 | 第18-20页 |
·主要仪器 | 第20-22页 |
·主要试剂的配制 | 第22-24页 |
·实验方法 | 第24-35页 |
·细胞培养 | 第24-25页 |
·细胞免疫荧光 | 第25-26页 |
·慢病毒表达质粒的构建与鉴定 | 第26-29页 |
·慢病毒的包装与收集 | 第29-30页 |
·慢病毒滴度的测定 | 第30页 |
·慢病毒转染细胞 | 第30页 |
·半定量RT-PCR法检测细胞中CD147mRNA | 第30-32页 |
·细胞中蛋白表达的检测(Western Blot) | 第32-33页 |
·细胞内外葡萄糖转运(摄取)能力的检测 | 第33页 |
·裸鼠恶性黑素瘤皮下异种移植模型 | 第33-34页 |
·裸鼠皮下移植瘤的免疫组化 | 第34-35页 |
·统计学分析 | 第35-36页 |
第二章 结果 | 第36-44页 |
·A375细胞中CD147,GLUT-1,GLU-4表达的检测 | 第36页 |
·Pfu-gw-006/CD147-RNA干扰慢病毒载体制备 | 第36-38页 |
·Pfu-gw-006载体双酶切鉴定图 | 第36-37页 |
·重组慢病毒质粒Pfu-gw-006/CD147shRNA阳性克隆PCR鉴定结果 | 第37页 |
·重组慢病毒质粒Pfu-gw-006/CD147shRNA测序结果 | 第37-38页 |
·重组慢病毒质粒Pfu-gw-006/CD147shRNA转染A375细胞阳性克隆的检测鉴定 | 第38-39页 |
·CD147siRNA转染对A375细胞中GLUT-1,4表达的影响 | 第39页 |
·CD147siRNA转染对P13K/Akt信号通路的影响 | 第39-40页 |
·CD147通过调节PI3K/Akt信号途径影响GLUT-1,4的表达水平 | 第40页 |
·CD147对A375细胞葡萄糖转运(摄取)能力的影响 | 第40-41页 |
·A375细胞裸鼠皮下移植瘤中CD147,GLUT-1,GLU-4的蛋白表达水平 | 第41-44页 |
第三章 讨论 | 第44-47页 |
结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-51页 |
综述 | 第51-60页 |
参考文献 | 第55-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
攻读学位期间主要的研究成果 | 第61页 |