| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-20页 |
| ·小麦条锈病 | 第13页 |
| ·小麦条锈菌的危害与分布 | 第13页 |
| ·小麦与条锈菌互作研究 | 第13页 |
| ·植物 MAPK 研究进展 | 第13-15页 |
| ·MAPK 概述 | 第13-14页 |
| ·MAPK 级联途径 | 第14页 |
| ·植物中的MAPK 研究 | 第14-15页 |
| ·病毒诱导的基因沉默技术 | 第15-18页 |
| ·VIGS 的分子机制 | 第16页 |
| ·VIGS 载体 | 第16-17页 |
| ·影响VIGS 沉默效率的因素 | 第17页 |
| ·VIGS 方法的优势 | 第17-18页 |
| ·VIGS 的缺点及相应的改进措施 | 第18页 |
| ·bZIP 转录因子研究进展 | 第18-19页 |
| ·本实验的目的和意义 | 第19-20页 |
| 第二章 小麦蛋白激酶基因克隆与表达分析 | 第20-36页 |
| ·引言 | 第20页 |
| ·材料、试剂和仪器 | 第20-21页 |
| ·材料 | 第20页 |
| ·主要试剂 | 第20-21页 |
| ·主要仪器 | 第21页 |
| ·实验方法 | 第21-25页 |
| ·小麦样品的处理与培养 | 第21页 |
| ·小麦样品中总RNA 的提取 | 第21-22页 |
| ·去除DNA | 第22页 |
| ·RNA 的纯度及完整性检测 | 第22页 |
| ·反转录合成cDNA | 第22页 |
| ·引物设计和合成 | 第22-23页 |
| ·RT-PCR 扩增 | 第23页 |
| ·PCR 产物回收及纯化 | 第23页 |
| ·PCR 产物与载体连接 | 第23页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第23-24页 |
| ·质粒的提取 | 第24页 |
| ·测序操作 | 第24-25页 |
| ·生物信息学分析 | 第25页 |
| ·实时定量PCR 分析 | 第25页 |
| ·结果与分析 | 第25-34页 |
| ·讨论 | 第34-36页 |
| 第三章 蛋白激酶类基因的功能初步分析 | 第36-47页 |
| ·实验方法 | 第36-37页 |
| ·候选基因的VIGS 分析 | 第37-38页 |
| ·重组病毒接种小麦 | 第37-38页 |
| ·条锈菌接种及侵染过程 | 第38页 |
| ·细胞学观察 | 第38页 |
| ·结果分析 | 第38-44页 |
| ·VIGS 载体构建 | 第38-39页 |
| ·线性化 | 第39-40页 |
| ·体外转录 | 第40页 |
| ·接种条锈菌后的表型观察 | 第40页 |
| ·接种条锈菌CYR23 后的细胞学观察 | 第40页 |
| ·菌丝生长及细胞坏死情况的统计 | 第40-43页 |
| ·重组转染病毒的沉默效率检测 | 第43-44页 |
| ·讨论 | 第44-47页 |
| 第四章 小麦MAPK4 基因RNAi 载体的构建 | 第47-52页 |
| ·材料、试剂以及主要仪器 | 第47页 |
| ·实验方法 | 第47-48页 |
| ·中间载体构建 | 第47-48页 |
| ·表达载体的构建 | 第48页 |
| ·结果 | 第48-50页 |
| ·中间载体PKANNBIAL-MAPK4-F1-F2 的构建 | 第48-49页 |
| ·表达载体pAHC25-MAPK4 的构建 | 第49-50页 |
| ·讨论 | 第50-52页 |
| 第五章 小麦TabZIP20 转录因子的克隆及表达分析 | 第52-60页 |
| ·引言 | 第52页 |
| ·材料、试剂以及主要仪器 | 第52页 |
| ·试验方法 | 第52-54页 |
| ·TabZIP20 基因序列的电子拼接 | 第52-53页 |
| ·TabZIP20 基因的克隆 | 第53-54页 |
| ·实验结果 | 第54-58页 |
| ·TabZIP20 的克隆及序列测定 | 第54-55页 |
| ·TabZIP20 编码蛋白的生物信息学分析 | 第55-56页 |
| ·TabZIP20 所编码蛋白的亚细胞定位 | 第56-58页 |
| ·实时定量PCR | 第58页 |
| ·结果讨论 | 第58-60页 |
| 第六章 结论 | 第60-61页 |
| 第一部分 | 第60页 |
| 第二部分 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-66页 |
| 附录 | 第66-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 作者简介 | 第72页 |