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一种从感病昆虫血腔内获取金龟子绿僵菌(M. anisopliae)并构建其cDNA文库的新方法研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
1 绪论第11-31页
   ·引言第11-12页
   ·研究的意义和背景第12-13页
   ·国内外研究进展第13-26页
   ·国内外研究病原真菌侵染分子机制所采用的方法学第26-27页
   ·研究目的和总体思路第27-28页
   ·研究内容和技术路线第28页
   ·本研究的创新点第28-31页
2 材料与方法第31-49页
   ·供试菌株与昆虫第31页
   ·培养基第31页
   ·主要仪器第31-32页
   ·主要试剂第32-34页
   ·基因组DNA 的制备与定量第34-35页
   ·mRNA 的提取第35页
   ·引物设计及PCR 灵敏度分析第35-39页
   ·Milli Q 水对血细胞破裂的影响分析第39页
   ·蝗虫血细胞的裂解及DNA 和RNA 降解技术路线第39-40页
   ·正交试验第40页
   ·绿僵菌侵染飞蝗及绿僵菌菌体的分离和验证第40-41页
   ·cDNA 文库构建第41-49页
3 结果第49-67页
   ·引物的灵敏度与特异性分析结果第49-51页
   ·Milli Q 水洗涤对蝗虫血细胞破裂的影响第51-53页
   ·单因子实验结果第53-57页
   ·正交实验分析结果第57-58页
   ·感病蝗虫绿僵菌菌体的分离及验证结果第58-59页
   ·从感病蝗虫血淋巴中分离纯化到的绿僵菌菌体提取mRNA后进行RT-PCR 分析第59-60页
   ·侵染真菌cDNA library 的构建第60-62页
   ·文库中毒力基因的检测第62-63页
   ·序列分析第63-67页
4 讨论第67-75页
   ·感病蝗虫血淋巴中绿僵菌的分离和m RNA 的提取第67-70页
   ·cDNA 文库的构建第70-71页
   ·cDNA 测序及分析第71-72页
   ·本文库在真菌致病基因研究中的应用第72页
   ·小结第72-75页
5 结论与后续工作第75-77页
致谢第77-79页
参考文献第79-91页
附录第91页

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