中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-8页 |
缩写符号说明 | 第8-10页 |
第一部分 材料与方法 | 第10-40页 |
第一章 材料 | 第10-21页 |
一 主要试剂 | 第10-11页 |
(一) 工具酶类 | 第10页 |
(二) 试剂盒 | 第10页 |
(三) 分子量标准 | 第10页 |
(四) 培养基成分 | 第10-11页 |
(五) 其他成分 | 第11页 |
(六) 实验仪器 | 第11页 |
二 主要溶液及试剂配制 | 第11-16页 |
(一) 培养基 | 第11-13页 |
(二) 溶液 | 第13-16页 |
三 生物信息学软件 | 第16-17页 |
四 菌株与质粒 | 第17-18页 |
五 抗生素 | 第18-19页 |
六 氨基酸及生长物质 | 第19页 |
七 本论文中用到的引物 | 第19-21页 |
第二章 方法 | 第21-40页 |
一 大肠杆菌相关实验方法 | 第21-23页 |
二 真菌相关的实验方法 | 第23-26页 |
三 分子生物学方法 | 第26-30页 |
四 基因组文库相关方法 | 第30-38页 |
(一) 基因组文库的构建 | 第30-35页 |
(二) 文库扩增 | 第35页 |
(三) 文库筛选 | 第35-38页 |
五 生物转化及分析方法 | 第38-40页 |
第二部分 合成紫穗槐烯的酵母工程菌基因改造的研究 | 第40-55页 |
第一章 前言 | 第40-44页 |
参考文献 | 第42-44页 |
第二章 结果与讨论 | 第44-55页 |
第一节 青蒿P450还原酶(CPR)基因的获得 | 第44页 |
第二节 WHT菌株的基因组背景分析 | 第44-47页 |
第三节 整合型载体的构建 | 第47-53页 |
(一) 3'交换臂的获得和插入 | 第47-50页 |
(二) KanMX4基因的获得和插入 | 第50页 |
(三) terminator的获得和插入 | 第50-51页 |
(四) 5'交换臂、promotor与青蒿CPR的连接 | 第51-52页 |
(五) 插入青蒿CPR基因的后半段 | 第52-53页 |
第四节 转化 | 第53页 |
第五节 讨论 | 第53-55页 |
第三部分 丝状真菌M95.33β-木糖苷酶基因克隆的初步研究 | 第55-60页 |
第一章 前言 | 第55-56页 |
第二章 结果与讨论 | 第56-60页 |
第一节 PCR方法扩增M95.33β-木糖苷酶基因片段的实验 | 第56-57页 |
第二节 构建基因组文库筛选β-木糖苷酶基因的尝试 | 第57-58页 |
第三节 M95.33生物转化条件的优化 | 第58-59页 |
第四节 讨论 | 第59-60页 |
第四部分 全文总结 | 第60-61页 |
附图1 | 第61-62页 |
附图2 | 第62-66页 |
文献综述:丝状真菌异源蛋白表达系统研究 | 第66-74页 |
个人简历 | 第74-75页 |
致谢 | 第75-76页 |