中文摘要 | 第1-11页 |
英文摘要 | 第11-14页 |
第一章 蝗虫病原菌分离鉴定及其杀虫蛋白的分离纯化 | 第14-39页 |
摘要 | 第14-16页 |
1 引言 | 第16-17页 |
2 材料与方法 | 第17-23页 |
·实验材料 | 第17-18页 |
·实验方法 | 第18-23页 |
3 结果与分析 | 第23-34页 |
·菌种鉴定结果 | 第23-25页 |
·杀虫活性物质的确定 | 第25-26页 |
·杀虫蛋白的纯化 | 第26-28页 |
·杀虫蛋白的初步性质 | 第28-30页 |
·杀虫蛋白的酶活实验结果 | 第30-32页 |
·杀虫蛋白N-末端氨基酸序列分析 | 第32-34页 |
·杀虫蛋白的毒性实验 | 第34页 |
4 讨论 | 第34-36页 |
·杀虫蛋白的纯化方法 | 第34-35页 |
·杀虫蛋白N-末端氨基酸序列与金属蛋白酶的同源性研究 | 第35页 |
·杀虫蛋白在生物防治领域中的应用潜力和存在的问题 | 第35-36页 |
5 小结 | 第36页 |
6 参考文献 | 第36-39页 |
第二章 粘质沙雷氏菌HR-3发酵条件优化、诱变及其杀虫蛋白的酶学性质研究 | 第39-68页 |
摘要 | 第39-41页 |
1 引言 | 第41-42页 |
2 材料与方法 | 第42-47页 |
·实验材料 | 第42-43页 |
·实验方法 | 第43-47页 |
3 结果与分析 | 第47-63页 |
·发酵上清液蛋白酶活力检测 | 第47-48页 |
·发酵工艺试验 | 第48-53页 |
·CO_2激光辐照选育 | 第53-56页 |
·杀虫蛋白的酶学性质研究 | 第56-63页 |
4 讨论 | 第63-65页 |
·金属蛋白酶酶活力测定与筛选模型的建立 | 第63页 |
·诱变方法的选择 | 第63页 |
·蛋白质(酶)酶学性质与化学修饰的必要性 | 第63-65页 |
5 小结 | 第65页 |
6 参考文献 | 第65-68页 |
第三章 粘质沙雷氏菌杀虫蛋白基因的克隆和序列分析 | 第68-91页 |
摘要 | 第68-69页 |
1 引言 | 第69-70页 |
2 材料与方法 | 第70-75页 |
·实验材料 | 第70-72页 |
·实验方法 | 第72-75页 |
3 结果与分析 | 第75-85页 |
·杀虫蛋白基因PCR引物的设计 | 第75-76页 |
·杀虫蛋白成熟肽编码区的PCR扩增和克隆鉴定 | 第76-77页 |
·杀虫蛋白成熟肽编码区的序列分析 | 第77-80页 |
·杀虫蛋白成熟肽编码区的同源性分析 | 第80-81页 |
·杀虫蛋白成熟肽氨基酸序列同源性分析 | 第81-82页 |
·杀虫蛋白成熟肽的C-末端氨基酸序列的同源性分析 | 第82页 |
·沙虫蛋白成熟肽的Zn配体和活性位点的同源性分析 | 第82-85页 |
4 讨论 | 第85-87页 |
·PCR法克隆杀虫蛋白成熟肽编码区的策略 | 第85页 |
·杀虫蛋白成熟肽编码区的序列分析 | 第85-86页 |
·杀虫蛋白成熟肽的分析 | 第86-87页 |
5 小结 | 第87页 |
6 参考文献 | 第87-91页 |
第四章 粘质沙雷氏菌杀虫蛋白酶基因在大肠杆菌中的表达 | 第91-110页 |
摘要 | 第91-92页 |
1 引言 | 第92-93页 |
2 材料与方法 | 第93-97页 |
·实验材料 | 第93-96页 |
·实验方法 | 第96-97页 |
3 结果与分析 | 第97-105页 |
·杀虫蛋白成熟肽编码序列在E.coli中的融合表达 | 第97-101页 |
·杀虫蛋白成熟肽编码序列在E.coli中的非融合表达 | 第101-105页 |
4 讨论 | 第105-106页 |
·诱导杀虫蛋白表达的优化 | 第105页 |
·杀虫蛋白在大肠杆菌中的表达 | 第105-106页 |
·包涵体的变性和折叠复性实验 | 第106页 |
5 小结 | 第106-107页 |
6 参考文献 | 第107-110页 |
文献综述 微生物金属蛋白酶研究进展 | 第110-127页 |
引言 | 第110-111页 |
1 金属蛋白酶特点和分类 | 第111-112页 |
2 微生物金属蛋白酶的来源与分布 | 第112-113页 |
·微生物金属蛋白酶的来源 | 第112页 |
·微生物金属蛋白酶的分布 | 第112-113页 |
3 微生物来源金属蛋白酶的生化性质 | 第113-115页 |
·耐热金属蛋白酶 | 第114页 |
·嗜冷金属蛋白酶 | 第114-115页 |
·碱性条件的金属蛋白酶 | 第115页 |
·溶葡球菌酶 | 第115页 |
4 微生物金属蛋白酶的结构 | 第115-117页 |
5 金属蛋白酶的基因克隆 | 第117-119页 |
·典型金属蛋白酶比较 | 第117页 |
·溶葡球菌酶克隆 | 第117-118页 |
·肉毒毒素的克隆 | 第118-119页 |
6 作为细胞毒蛋白的微生物金属蛋白酶 | 第119-120页 |
·鳗弧菌金属蛋白酶 | 第119页 |
·脆弱类杆菌金属蛋白酶 | 第119页 |
·嗜水气单胞菌金属蛋白酶 | 第119-120页 |
7 微生物金属蛋白酶的应用 | 第120-122页 |
·微生物金属蛋白酶在食品业的应用 | 第120页 |
·微生物金属蛋白酶在日用化工领域的应用 | 第120-121页 |
·微生物金属蛋白酶在医药领域的应用 | 第121-122页 |
8 微生物金属蛋白酶的发展前景 | 第122页 |
参考文献 | 第122-127页 |
附: | 第127-129页 |
致谢 | 第128-129页 |
论文发表及奖励 | 第129页 |