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粘质沙雷氏菌杀虫蛋白的分离纯化及其基因的克隆与表达研究

中文摘要第1-11页
英文摘要第11-14页
第一章 蝗虫病原菌分离鉴定及其杀虫蛋白的分离纯化第14-39页
 摘要第14-16页
 1 引言第16-17页
 2 材料与方法第17-23页
   ·实验材料第17-18页
   ·实验方法第18-23页
 3 结果与分析第23-34页
   ·菌种鉴定结果第23-25页
   ·杀虫活性物质的确定第25-26页
   ·杀虫蛋白的纯化第26-28页
   ·杀虫蛋白的初步性质第28-30页
   ·杀虫蛋白的酶活实验结果第30-32页
   ·杀虫蛋白N-末端氨基酸序列分析第32-34页
   ·杀虫蛋白的毒性实验第34页
 4 讨论第34-36页
   ·杀虫蛋白的纯化方法第34-35页
   ·杀虫蛋白N-末端氨基酸序列与金属蛋白酶的同源性研究第35页
   ·杀虫蛋白在生物防治领域中的应用潜力和存在的问题第35-36页
 5 小结第36页
 6 参考文献第36-39页
第二章 粘质沙雷氏菌HR-3发酵条件优化、诱变及其杀虫蛋白的酶学性质研究第39-68页
 摘要第39-41页
 1 引言第41-42页
 2 材料与方法第42-47页
   ·实验材料第42-43页
   ·实验方法第43-47页
 3 结果与分析第47-63页
   ·发酵上清液蛋白酶活力检测第47-48页
   ·发酵工艺试验第48-53页
   ·CO_2激光辐照选育第53-56页
   ·杀虫蛋白的酶学性质研究第56-63页
 4 讨论第63-65页
   ·金属蛋白酶酶活力测定与筛选模型的建立第63页
   ·诱变方法的选择第63页
   ·蛋白质(酶)酶学性质与化学修饰的必要性第63-65页
 5 小结第65页
 6 参考文献第65-68页
第三章 粘质沙雷氏菌杀虫蛋白基因的克隆和序列分析第68-91页
 摘要第68-69页
 1 引言第69-70页
 2 材料与方法第70-75页
   ·实验材料第70-72页
   ·实验方法第72-75页
 3 结果与分析第75-85页
   ·杀虫蛋白基因PCR引物的设计第75-76页
   ·杀虫蛋白成熟肽编码区的PCR扩增和克隆鉴定第76-77页
   ·杀虫蛋白成熟肽编码区的序列分析第77-80页
   ·杀虫蛋白成熟肽编码区的同源性分析第80-81页
   ·杀虫蛋白成熟肽氨基酸序列同源性分析第81-82页
   ·杀虫蛋白成熟肽的C-末端氨基酸序列的同源性分析第82页
   ·沙虫蛋白成熟肽的Zn配体和活性位点的同源性分析第82-85页
 4 讨论第85-87页
   ·PCR法克隆杀虫蛋白成熟肽编码区的策略第85页
   ·杀虫蛋白成熟肽编码区的序列分析第85-86页
   ·杀虫蛋白成熟肽的分析第86-87页
 5 小结第87页
 6 参考文献第87-91页
第四章 粘质沙雷氏菌杀虫蛋白酶基因在大肠杆菌中的表达第91-110页
 摘要第91-92页
 1 引言第92-93页
 2 材料与方法第93-97页
   ·实验材料第93-96页
   ·实验方法第96-97页
 3 结果与分析第97-105页
   ·杀虫蛋白成熟肽编码序列在E.coli中的融合表达第97-101页
   ·杀虫蛋白成熟肽编码序列在E.coli中的非融合表达第101-105页
 4 讨论第105-106页
   ·诱导杀虫蛋白表达的优化第105页
   ·杀虫蛋白在大肠杆菌中的表达第105-106页
   ·包涵体的变性和折叠复性实验第106页
 5 小结第106-107页
 6 参考文献第107-110页
文献综述 微生物金属蛋白酶研究进展第110-127页
 引言第110-111页
 1 金属蛋白酶特点和分类第111-112页
 2 微生物金属蛋白酶的来源与分布第112-113页
   ·微生物金属蛋白酶的来源第112页
   ·微生物金属蛋白酶的分布第112-113页
 3 微生物来源金属蛋白酶的生化性质第113-115页
   ·耐热金属蛋白酶第114页
   ·嗜冷金属蛋白酶第114-115页
   ·碱性条件的金属蛋白酶第115页
   ·溶葡球菌酶第115页
 4 微生物金属蛋白酶的结构第115-117页
 5 金属蛋白酶的基因克隆第117-119页
   ·典型金属蛋白酶比较第117页
   ·溶葡球菌酶克隆第117-118页
   ·肉毒毒素的克隆第118-119页
 6 作为细胞毒蛋白的微生物金属蛋白酶第119-120页
   ·鳗弧菌金属蛋白酶第119页
   ·脆弱类杆菌金属蛋白酶第119页
   ·嗜水气单胞菌金属蛋白酶第119-120页
 7 微生物金属蛋白酶的应用第120-122页
   ·微生物金属蛋白酶在食品业的应用第120页
   ·微生物金属蛋白酶在日用化工领域的应用第120-121页
   ·微生物金属蛋白酶在医药领域的应用第121-122页
 8 微生物金属蛋白酶的发展前景第122页
 参考文献第122-127页
附:第127-129页
 致谢第128-129页
 论文发表及奖励第129页

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