| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第1章 绪论 | 第10-19页 |
| ·青霉素酰化酶简介 | 第10-11页 |
| ·青霉素酰化酶的来源 | 第10页 |
| ·粪产碱杆菌青霉素酰化酶简介 | 第10-11页 |
| ·青霉素酰化酶的抽提研究 | 第11-14页 |
| ·常用细胞破碎方法简介 | 第11-13页 |
| ·化学渗透法提取青霉素酰化酶的研究进展 | 第13-14页 |
| ·青霉素酰化酶的共价载体固定化研究 | 第14-15页 |
| ·酶的共价固定化法简介 | 第14页 |
| ·青霉素酰化酶的共价固定化研究进展 | 第14-15页 |
| ·青霉素酰化酶在手性拆分中的应用 | 第15-17页 |
| ·通过水解反应拆分外消旋化合物 | 第16-17页 |
| ·通过酰化反应拆分外消旋化合物 | 第17页 |
| ·本论文的研究内容、目的与意义 | 第17-19页 |
| 第2章 粪产碱杆菌来源青霉素酰化酶(Af-PGA)的抽提 | 第19-29页 |
| ·前言 | 第19页 |
| ·实验仪器与材料 | 第19-20页 |
| ·主要材料试剂 | 第19页 |
| ·主要仪器设备 | 第19-20页 |
| ·分析方法 | 第20-21页 |
| ·Bradford法测定蛋白浓度 | 第20页 |
| ·酶活测定方法 | 第20-21页 |
| ·结果与讨论 | 第21-28页 |
| ·超声破碎提取 | 第21-22页 |
| ·冻融破碎抽提 | 第22页 |
| ·渗透压冲击提取 | 第22-23页 |
| ·高压匀浆破碎提取 | 第23-24页 |
| ·化学渗透法提取 | 第24-28页 |
| ·本章小结 | 第28-29页 |
| 第3章 粪产碱杆菌青霉素酰化酶的固定化 | 第29-40页 |
| ·前言 | 第29-30页 |
| ·实验仪器及材料 | 第30-31页 |
| ·主要材料试剂 | 第30页 |
| ·主要实验仪器 | 第30-31页 |
| ·实验部分 | 第31-32页 |
| ·载体活化 | 第31页 |
| ·Af-PGA固定化 | 第31-32页 |
| ·实验结果与讨论 | 第32-39页 |
| ·氨基载体固定化条件的优化 | 第32-36页 |
| ·环氧载体固定化条件的优化 | 第36-39页 |
| ·本章小结 | 第39-40页 |
| 第4章 载体固定化酶HA和EP2的酶学性质研究 | 第40-52页 |
| ·前言 | 第40页 |
| ·实验仪器及材料 | 第40-41页 |
| ·主要材料试剂 | 第40页 |
| ·主要实验仪器 | 第40-41页 |
| ·酶活力检测方法 | 第41-42页 |
| ·滴定法检测PGA水解青霉素G钾盐的活力 | 第41页 |
| ·HPLC法检测PGA水解青霉素G钾盐和头孢烷酸的活力 | 第41-42页 |
| ·实验结果与讨论 | 第42-50页 |
| ·HA和EP2的最适温度 | 第42-43页 |
| ·HA和EP2的最适pH | 第43-44页 |
| ·温度稳定性 | 第44-46页 |
| ·pH稳定性 | 第46-47页 |
| ·有机溶剂耐受性 | 第47页 |
| ·最适青霉素G钾盐(PGK)底物浓度 | 第47-48页 |
| ·最适头孢烷酸(CepG)底物浓度 | 第48-49页 |
| ·不同固定化青霉素酰化酶对青霉素G钾盐和头孢烷酸的底物选择性 | 第49-50页 |
| ·本章小结 | 第50-52页 |
| 第5章 环氧基载体固定化酶EP2的公斤级制备 | 第52-55页 |
| ·前言 | 第52页 |
| ·实验仪器及材料 | 第52页 |
| ·主要材料试剂 | 第52页 |
| ·主要实验仪器 | 第52页 |
| ·实验方法 | 第52-53页 |
| ·工艺流程图 | 第52页 |
| ·实验步骤 | 第52-53页 |
| ·实验结果与讨论 | 第53-54页 |
| ·各步骤酶活回收率的计算 | 第53页 |
| ·生产1KG固定化酶所需要的物料核算 | 第53-54页 |
| ·本章小结 | 第54-55页 |
| 第6章 EP2酰化拆分DL-α-苯丙氨酸及其对位取代衍生物 | 第55-68页 |
| ·前言 | 第55-56页 |
| ·实验仪器及材料 | 第56-57页 |
| ·主要材料试剂 | 第56-57页 |
| ·主要实验仪器 | 第57页 |
| ·实验方法 | 第57-60页 |
| ·HPLC检测方法的建立 | 第57-59页 |
| ·拆分效果评价 | 第59页 |
| ·Af-PGA酰化拆分苯丙氨酸的及其衍生物的方法 | 第59页 |
| ·酰基供体的合成 | 第59-60页 |
| ·实验结果与讨论 | 第60-67页 |
| ·投酶量对酰化反应的影响 | 第60-61页 |
| ·pH对酰化反应的影响 | 第61-62页 |
| ·酰基供体浓度对酰化反应的影响 | 第62页 |
| ·反应温度对酰化反应的影响 | 第62-63页 |
| ·酰基供体类型对酰化反应的影响 | 第63-64页 |
| ·苯乙酰胺酰化拆分DL-苯丙氨酸反应进程曲线的绘制 | 第64-65页 |
| ·从反应体系中分离D-苯丙氨酸 | 第65-66页 |
| ·EP2拆分对位取代的苯丙氨酸衍生物 | 第66-67页 |
| ·本章小结 | 第67-68页 |
| 第七章 结论与展望 | 第68-70页 |
| ·结论 | 第68-69页 |
| ·展望 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
