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白杨花粉管通道导入外源胡杨DNA技术研究

摘要第1-5页
Abstract第5-7页
缩略词第7-11页
1 引言第11-13页
2 植物基因工程育种第13-22页
   ·植物遗传转化的途径与技术方法第13-19页
     ·农杆菌介导转化法第13-14页
     ·基因枪转化法第14-15页
     ·电击转化法第15页
     ·PEG 介导法第15-16页
     ·花粉管通道导入法第16-17页
     ·植物花粉管通道导入外源DNA 技术的机理第17-18页
     ·植物花粉管通道导入外源DNA 技术体系第18-19页
       ·花粉管通道导入具体操作方式和适宜的导入时间第18页
       ·花粉管通道导入的DNA 类型第18-19页
       ·花粉管通道导入后代的检测手段第19页
   ·花粉管通道导入外源DNA 技术的优势与存在问题第19-20页
   ·花粉管通道导入外源DNA 技术在林木育种中应用展望第20-22页
3 基本研究思路第22-23页
4 材料与方法第23-34页
   ·研究材料第23页
   ·主要试剂及仪器第23-25页
     ·主要试剂第23-25页
     ·主要仪器第25页
   ·研究方法第25-34页
     ·用于DNA 提取的胡杨叶片非低温保存方法研究第25页
     ·白杨可授性与最佳授粉时期的确定第25-26页
     ·人工授粉杂交第26页
     ·白杨花粉管通道导入外源胡杨DNA第26-27页
     ·胡杨外源DNA 花粉管通道介导与胚囊染色体加倍联合处理第27页
     ·种子收取、播种育苗方法第27页
     ·体细胞染色体观察第27页
     ·白杨转化后代AFLP 分子检测第27-31页
       ·待测样品DNA 的准备第27-28页
       ·模板DNA 的酶切、连接第28页
       ·DNA 片段的预扩增第28-29页
       ·DNA 片段的选择扩增第29-30页
       ·胶的制备第30页
       ·选择扩增产物电泳第30-31页
       ·选择性扩增产物的银染显色第31页
       ·扩增谱带记录第31页
     ·特异DNA 片段的序列比较与分析第31-34页
       ·特异带DNA 回收与纯化第31-32页
       ·特异带DNA 片段与质粒载体的连接第32页
       ·重组质粒的转化第32页
       ·重组质粒的检测第32-33页
       ·处理后代及供体特异DNA 片段序列测定与分析第33页
       ·处理后代及供体特异DNA 片段SCAR 标记第33-34页
5 结果与分析第34-70页
   ·胡杨叶片非低温保存方法与DNA 提取研究第34-39页
     ·胡杨叶片DNA 提取体系建立第34-35页
     ·胡杨叶片非低温保存方法第35-39页
     ·小结第39页
   ·白杨外源DNA 花粉管通道导入时机第39-44页
     ·白杨外源DNA 花粉管通道导入的适宜时机第40-41页
     ·白杨杂交可授性与最佳授粉时机的确定第41-43页
       ·毛新杨雌花序最佳授粉期检测第41-42页
       ·银毛杨雌花序最佳授粉期检测第42-43页
       ·银腺杨雌花序最佳授粉期检测第43页
     ·小结第43-44页
   ·白杨花粉管通道导入外源胡杨DNA 技术研究第44-53页
     ·毛新杨花粉管通道导入胡杨DNA 技术研究第44-46页
     ·银毛杨花粉管通道导入外源胡杨DNA 技术研究第46-47页
     ·银腺杨花粉管通道导入外源胡杨DNA 技术研究第47-48页
     ·外源DNA 花粉管通道导入与胚囊染色体加倍联合育种第48-52页
       ·毛新杨花粉管通道导入外源 DNA 与胚囊染色体加倍联合育种技术研究第48-50页
       ·银毛杨花粉管通道导入外源 DNA 与胚囊染色体加倍联合育种技术研究第50-51页
       ·银腺杨外源 DNA 花粉管通道导入与胚囊染色体加倍联合育种技术研究第51-52页
     ·小结第52-53页
   ·胡杨DNA 花粉管通道导入白杨杂种后代的AFLP 检测第53-62页
     ·胡杨DNA 花粉管通道导入毛新杨杂种后代AFLP 检测第53-58页
       ·胡杨DNA 花粉管通道导入 T804×TL50 杂种后代的 AFLP 检测第53-54页
       ·胡杨DNA 花粉管通道导入T805×M1 杂种后代的AFLP 检测第54-57页
       ·胡杨DNA 花粉管通道导入T805×XJ1 杂种后代的AFLP 检测第57页
       ·胡杨DNA 花粉管通道导入T803×XJC 杂种后代的AFLP 检测第57-58页
     ·胡杨DNA 花粉管通道导入银毛杨杂种后代AFLP 检测第58-61页
     ·小结第61-62页
   ·白杨花粉管通道导入胡杨DNA 供体特异片段序列分析第62-70页
     ·变异体MM10-2 与供体特异DNA 片段的序列比较第62-64页
     ·变异体MM10-2 特异DNA 片段的SCAR 标记第64-66页
     ·AFLP 分析中的“假阳性”现象第66-69页
     ·小结第69-70页
6 讨论第70-76页
 (1) 用于 DNA 提取的胡杨叶片非低温取样与保存方法问题第70-71页
 (2) 白杨花粉管通道导入外源 DNA 时机及其参照基点的确定问题第71-72页
 (3) 白杨花粉管通道导入胡杨 DNA 育种的结实率与存苗率问题第72页
 (4) 外源 DNA 花粉管通道导入与染色体加倍联合育种问题第72-73页
 (5) 外源 DNA 花粉管通道导入白杨杂种后代表型变异问题第73-74页
 (6) 胡杨外源 DNA 花粉管通道导入白杨杂种后代的分子检测判别问题第74页
 (7) AFLP 标记技术用于外源基因组 DNA 转化体鉴定的可靠性问题第74-75页
 (8) 胡杨外源基因组 DNA 花粉管通道导入白杨杂种的整合机理问题第75-76页
7 结论第76-78页
参考文献第78-86页
附图第86-91页
个人简介第91-92页
导师简介第92-93页
致谢第93页

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