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人参cDNA文库构建,EST与相关基因表达分析及EST-SSR标记建立

摘要第1-5页
Abstract第5-13页
1 绪论第13-29页
   ·引言第13页
   ·人参的研究进展第13-19页
     ·人参化学成分的研究第13-14页
     ·人参药理作用的研究第14-16页
     ·人参分子生物学研究进展第16-19页
   ·cDNA 文库的构建策略及其应用第19-24页
     ·cDNA 文库构建第19-22页
     ·cDNA 文库的应用第22-24页
   ·EST 分析的应用第24-27页
     ·分离和鉴定新基因第24-25页
     ·构建遗传学图谱第25页
     ·基因差异表达研究第25-26页
     ·用于制备 DNA 芯片第26页
     ·利用 EST 数据库进行电子基因克隆第26页
     ·比较基因组学研究第26-27页
   ·EST-SSR 标记第27页
   ·本课题研究的目的和意义第27-29页
2 人参叶片总 RNA 的提取第29-34页
   ·材料与方法第29-31页
     ·植物材料第29页
     ·主要试剂及处理第29页
     ·提取方法第29-31页
     ·总 RNA 质量检测与分析第31页
   ·结果与分析第31-32页
   ·讨论第32-33页
   ·本章小结第33-34页
3 人参 cDNA 文库的构建第34-43页
   ·试验材料第34页
     ·植物材料第34页
     ·试剂第34页
   ·试验方法第34-39页
     ·总 RNA 的提取第34-35页
     ·cDNA 第一链合成第35-36页
     ·LD-PCR 合成 ds cDNA第36页
     ·蛋白酶 K 消化第36页
     ·Sfi Ⅰ酶切消化第36-37页
     ·cDNA 大小片段的分级分离第37页
     ·cDNA 与 pDNR-LIB 载体连接第37-38页
     ·连接产物的转化第38页
     ·初始文库滴度测定与文库的扩增第38页
     ·文库插入片段长度检测与重组率检测第38-39页
   ·结果与分析第39-41页
     ·人参叶片总 RNA 的提取第39页
     ·人参的 ds cDNA 的合成第39-40页
     ·人参的 cDNA 分级分离第40-41页
     ·cDNA 文库的质量评价第41页
   ·讨论第41-42页
   ·本章小结第42-43页
4 人参 EST 分析第43-57页
   ·材料与方法第43-44页
     ·材料第43页
     ·生物信息学分析第43-44页
   ·结果与分析第44-55页
     ·四年红果人参叶片 EST 序列基本特征统计分析第44页
     ·基因表达丰度第44-45页
     ·EST 的同源序列比较与功能注释分析第45-50页
     ·同源序列的物种来源第50-51页
     ·基因的 GO 分类结果第51-53页
     ·人参叶片基因的生物学功能分类第53-55页
   ·讨论第55-56页
   ·本章小结第56-57页
5 实时荧光定量 RT-PCR 检测人参基因表达第57-63页
   ·材料与方法第57-59页
     ·材料第57页
     ·方法第57-59页
   ·结果与分析第59-61页
   ·讨论第61-62页
   ·本章小结第62-63页
6 人参 EST 资源的 SSR 信息分析第63-69页
   ·材料与方法第63页
     ·人参 EST 来源第63页
     ·人参 EST 中 SSR 的搜索第63页
   ·结果与分析第63-67页
     ·人参 EST-SSR 的发生频率第63-64页
     ·人参 EST-SSR 的特点第64-67页
   ·讨论第67页
   ·本章小结第67-69页
7 人参 EST-SSR 标记的建立第69-80页
   ·材料与方法第69-72页
     ·供试材料第69页
     ·模板 DNA 的提取第69-70页
     ·EST-SSR 引物设计与合成第70页
     ·EST-SSR 引物筛选与 EST-SSR 引物多态性检测第70页
     ·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的制备第70-72页
   ·结果与分析第72-78页
     ·提取 DNA 的检测第72页
     ·人参 EST-SSR 引物设计第72-73页
     ·人参 EST-SSR 引物筛选第73-74页
     ·人参 EST-SSR 引物多态性性分析第74-78页
   ·讨论第78-79页
   ·本章小结第79-80页
结论第80-82页
参考文献第82-92页
攻读学位期间发表的学术论文第92-93页
致谢第93-94页

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