摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-13页 |
1 绪论 | 第13-29页 |
·引言 | 第13页 |
·人参的研究进展 | 第13-19页 |
·人参化学成分的研究 | 第13-14页 |
·人参药理作用的研究 | 第14-16页 |
·人参分子生物学研究进展 | 第16-19页 |
·cDNA 文库的构建策略及其应用 | 第19-24页 |
·cDNA 文库构建 | 第19-22页 |
·cDNA 文库的应用 | 第22-24页 |
·EST 分析的应用 | 第24-27页 |
·分离和鉴定新基因 | 第24-25页 |
·构建遗传学图谱 | 第25页 |
·基因差异表达研究 | 第25-26页 |
·用于制备 DNA 芯片 | 第26页 |
·利用 EST 数据库进行电子基因克隆 | 第26页 |
·比较基因组学研究 | 第26-27页 |
·EST-SSR 标记 | 第27页 |
·本课题研究的目的和意义 | 第27-29页 |
2 人参叶片总 RNA 的提取 | 第29-34页 |
·材料与方法 | 第29-31页 |
·植物材料 | 第29页 |
·主要试剂及处理 | 第29页 |
·提取方法 | 第29-31页 |
·总 RNA 质量检测与分析 | 第31页 |
·结果与分析 | 第31-32页 |
·讨论 | 第32-33页 |
·本章小结 | 第33-34页 |
3 人参 cDNA 文库的构建 | 第34-43页 |
·试验材料 | 第34页 |
·植物材料 | 第34页 |
·试剂 | 第34页 |
·试验方法 | 第34-39页 |
·总 RNA 的提取 | 第34-35页 |
·cDNA 第一链合成 | 第35-36页 |
·LD-PCR 合成 ds cDNA | 第36页 |
·蛋白酶 K 消化 | 第36页 |
·Sfi Ⅰ酶切消化 | 第36-37页 |
·cDNA 大小片段的分级分离 | 第37页 |
·cDNA 与 pDNR-LIB 载体连接 | 第37-38页 |
·连接产物的转化 | 第38页 |
·初始文库滴度测定与文库的扩增 | 第38页 |
·文库插入片段长度检测与重组率检测 | 第38-39页 |
·结果与分析 | 第39-41页 |
·人参叶片总 RNA 的提取 | 第39页 |
·人参的 ds cDNA 的合成 | 第39-40页 |
·人参的 cDNA 分级分离 | 第40-41页 |
·cDNA 文库的质量评价 | 第41页 |
·讨论 | 第41-42页 |
·本章小结 | 第42-43页 |
4 人参 EST 分析 | 第43-57页 |
·材料与方法 | 第43-44页 |
·材料 | 第43页 |
·生物信息学分析 | 第43-44页 |
·结果与分析 | 第44-55页 |
·四年红果人参叶片 EST 序列基本特征统计分析 | 第44页 |
·基因表达丰度 | 第44-45页 |
·EST 的同源序列比较与功能注释分析 | 第45-50页 |
·同源序列的物种来源 | 第50-51页 |
·基因的 GO 分类结果 | 第51-53页 |
·人参叶片基因的生物学功能分类 | 第53-55页 |
·讨论 | 第55-56页 |
·本章小结 | 第56-57页 |
5 实时荧光定量 RT-PCR 检测人参基因表达 | 第57-63页 |
·材料与方法 | 第57-59页 |
·材料 | 第57页 |
·方法 | 第57-59页 |
·结果与分析 | 第59-61页 |
·讨论 | 第61-62页 |
·本章小结 | 第62-63页 |
6 人参 EST 资源的 SSR 信息分析 | 第63-69页 |
·材料与方法 | 第63页 |
·人参 EST 来源 | 第63页 |
·人参 EST 中 SSR 的搜索 | 第63页 |
·结果与分析 | 第63-67页 |
·人参 EST-SSR 的发生频率 | 第63-64页 |
·人参 EST-SSR 的特点 | 第64-67页 |
·讨论 | 第67页 |
·本章小结 | 第67-69页 |
7 人参 EST-SSR 标记的建立 | 第69-80页 |
·材料与方法 | 第69-72页 |
·供试材料 | 第69页 |
·模板 DNA 的提取 | 第69-70页 |
·EST-SSR 引物设计与合成 | 第70页 |
·EST-SSR 引物筛选与 EST-SSR 引物多态性检测 | 第70页 |
·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的制备 | 第70-72页 |
·结果与分析 | 第72-78页 |
·提取 DNA 的检测 | 第72页 |
·人参 EST-SSR 引物设计 | 第72-73页 |
·人参 EST-SSR 引物筛选 | 第73-74页 |
·人参 EST-SSR 引物多态性性分析 | 第74-78页 |
·讨论 | 第78-79页 |
·本章小结 | 第79-80页 |
结论 | 第80-82页 |
参考文献 | 第82-92页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第92-93页 |
致谢 | 第93-94页 |