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蛋白酶缺陷型毕赤酵母重组表达人血白蛋白中试发酵工艺的研究

中文摘要第1-8页
Abstract第8-11页
英文缩略词表第11-16页
第一章 绪论第16-30页
   ·人血清白蛋白第16-18页
     ·人血清白蛋白的理化和生物性质第16-17页
     ·人血清白蛋白的应用第17-18页
   ·重组蛋白表达系统第18-19页
   ·毕赤酵母蛋白表达系统第19-22页
     ·P. pastoris 表达系统的特点第19-20页
     ·P.pastoris 表达系统的组成第20-22页
   ·毕赤酵母中试发酵工艺研究进展第22-26页
     ·培养基第24-25页
     ·温度第25页
     ·pH 值第25页
     ·溶解氧第25-26页
     ·甲醇的流加方式第26页
   ·重组人血清白蛋白表达研究进展简述第26-28页
   ·结论第28-30页
第二章 rHSA蛋白酶缺陷型菌株的构建及其中试发酵工艺初探第30-56页
   ·实验仪器、实验试剂及试剂配制第30-35页
     ·实验仪器第30-31页
     ·实验试剂第31页
     ·试剂配制第31-35页
   ·实验方法第35-44页
     ·表达载体构建第35-40页
     ·菌株筛选、表达及鉴定第40-42页
     ·rHSA GS115 NC 中试发酵工艺初探第42-44页
   ·实验结果第44-53页
     ·PCR 产物的胶回收纯化鉴定第44-45页
     ·重组质粒鉴定结果第45-46页
     ·摇瓶培养甲醇诱导阶段 SDS-PAGE 检测结果第46页
     ·摇瓶培养甲醇诱导阶段 Western blotting 鉴定结果第46-47页
     ·摇瓶培养生物量积累阶段 OD600值检测结果第47-48页
     ·摇瓶培养生物量积累阶段湿重结果第48页
     ·摇瓶培养甲醇诱导阶段气相色谱结果第48-51页
     ·摇瓶培养蛋白表达量的测定结果第51页
     ·rHSA GS115 NC 中试发酵工艺初探生物量积累阶段和甲醇诱导阶段细胞湿重和细胞干重结果第51-53页
     ·rHSA GS115 NC 中试发酵工艺初探甲醇诱导阶段蛋白表达情况第53页
   ·实验结论第53-56页
第三章 rHSA 蛋白酶缺陷型菌株摇瓶规模发酵培养基的开发研究第56-68页
   ·实验仪器和试剂配制第56-59页
     ·实验仪器第56页
     ·试剂配制第56-59页
   ·实验方法第59-61页
     ·培养基筛选研究第59-60页
     ·正交实验研究第60-61页
   ·实验结果第61-65页
     ·培养基筛选 SDS-PAGE 检测结果第61-62页
     ·发酵培养基组成的研究第62-65页
   ·实验结论第65-68页
第四章 rHSA蛋白酶缺陷型菌株中试发酵及发酵液粗处理工艺第68-88页
   ·实验仪器和试剂配制第68-71页
     ·实验仪器第68-69页
     ·试剂配制第69-71页
   ·实验方法第71-77页
     ·rHSA GS115 NC 中试发酵工艺研究第71-73页
     ·rHSA GS115 pep4-中试发酵工艺研究第73-75页
     ·rHSA GS115 prb1-中试发酵工艺研究第75-77页
     ·rHSA 样品粗处理工艺研究第77页
   ·实验结果第77-86页
     ·中试发酵生物量积累阶段 OD600值、湿重和湿重检测结果第77-79页
     ·中试发酵甲醇诱导阶段湿重和干重结果第79-80页
     ·中试发酵甲醇诱导阶段 SDS-PAGE 检测结果第80-83页
     ·中试发酵白蛋白定量结果第83页
     ·中试发酵甲醇诱导阶段 Western blotting 鉴定结果第83-84页
     ·中试发酵甲醇诱导阶段蛋白降解率计算结果第84-86页
   ·结论第86-88页
第五章 讨论第88-94页
第六章 结论第94-96页
参考文献第96-106页
攻读博士期间所取得的科研成果第106-108页
致谢第108页

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