中文摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-11页 |
英文缩略词表 | 第11-16页 |
第一章 绪论 | 第16-30页 |
·人血清白蛋白 | 第16-18页 |
·人血清白蛋白的理化和生物性质 | 第16-17页 |
·人血清白蛋白的应用 | 第17-18页 |
·重组蛋白表达系统 | 第18-19页 |
·毕赤酵母蛋白表达系统 | 第19-22页 |
·P. pastoris 表达系统的特点 | 第19-20页 |
·P.pastoris 表达系统的组成 | 第20-22页 |
·毕赤酵母中试发酵工艺研究进展 | 第22-26页 |
·培养基 | 第24-25页 |
·温度 | 第25页 |
·pH 值 | 第25页 |
·溶解氧 | 第25-26页 |
·甲醇的流加方式 | 第26页 |
·重组人血清白蛋白表达研究进展简述 | 第26-28页 |
·结论 | 第28-30页 |
第二章 rHSA蛋白酶缺陷型菌株的构建及其中试发酵工艺初探 | 第30-56页 |
·实验仪器、实验试剂及试剂配制 | 第30-35页 |
·实验仪器 | 第30-31页 |
·实验试剂 | 第31页 |
·试剂配制 | 第31-35页 |
·实验方法 | 第35-44页 |
·表达载体构建 | 第35-40页 |
·菌株筛选、表达及鉴定 | 第40-42页 |
·rHSA GS115 NC 中试发酵工艺初探 | 第42-44页 |
·实验结果 | 第44-53页 |
·PCR 产物的胶回收纯化鉴定 | 第44-45页 |
·重组质粒鉴定结果 | 第45-46页 |
·摇瓶培养甲醇诱导阶段 SDS-PAGE 检测结果 | 第46页 |
·摇瓶培养甲醇诱导阶段 Western blotting 鉴定结果 | 第46-47页 |
·摇瓶培养生物量积累阶段 OD600值检测结果 | 第47-48页 |
·摇瓶培养生物量积累阶段湿重结果 | 第48页 |
·摇瓶培养甲醇诱导阶段气相色谱结果 | 第48-51页 |
·摇瓶培养蛋白表达量的测定结果 | 第51页 |
·rHSA GS115 NC 中试发酵工艺初探生物量积累阶段和甲醇诱导阶段细胞湿重和细胞干重结果 | 第51-53页 |
·rHSA GS115 NC 中试发酵工艺初探甲醇诱导阶段蛋白表达情况 | 第53页 |
·实验结论 | 第53-56页 |
第三章 rHSA 蛋白酶缺陷型菌株摇瓶规模发酵培养基的开发研究 | 第56-68页 |
·实验仪器和试剂配制 | 第56-59页 |
·实验仪器 | 第56页 |
·试剂配制 | 第56-59页 |
·实验方法 | 第59-61页 |
·培养基筛选研究 | 第59-60页 |
·正交实验研究 | 第60-61页 |
·实验结果 | 第61-65页 |
·培养基筛选 SDS-PAGE 检测结果 | 第61-62页 |
·发酵培养基组成的研究 | 第62-65页 |
·实验结论 | 第65-68页 |
第四章 rHSA蛋白酶缺陷型菌株中试发酵及发酵液粗处理工艺 | 第68-88页 |
·实验仪器和试剂配制 | 第68-71页 |
·实验仪器 | 第68-69页 |
·试剂配制 | 第69-71页 |
·实验方法 | 第71-77页 |
·rHSA GS115 NC 中试发酵工艺研究 | 第71-73页 |
·rHSA GS115 pep4-中试发酵工艺研究 | 第73-75页 |
·rHSA GS115 prb1-中试发酵工艺研究 | 第75-77页 |
·rHSA 样品粗处理工艺研究 | 第77页 |
·实验结果 | 第77-86页 |
·中试发酵生物量积累阶段 OD600值、湿重和湿重检测结果 | 第77-79页 |
·中试发酵甲醇诱导阶段湿重和干重结果 | 第79-80页 |
·中试发酵甲醇诱导阶段 SDS-PAGE 检测结果 | 第80-83页 |
·中试发酵白蛋白定量结果 | 第83页 |
·中试发酵甲醇诱导阶段 Western blotting 鉴定结果 | 第83-84页 |
·中试发酵甲醇诱导阶段蛋白降解率计算结果 | 第84-86页 |
·结论 | 第86-88页 |
第五章 讨论 | 第88-94页 |
第六章 结论 | 第94-96页 |
参考文献 | 第96-106页 |
攻读博士期间所取得的科研成果 | 第106-108页 |
致谢 | 第108页 |