目录 | 第1-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
第一章 研究背景 | 第11-26页 |
1 双生病毒概述 | 第11-18页 |
·双生病毒的分类 | 第12页 |
·菜豆金色花叶病毒属(Begomovirus)的基因组结构及功能 | 第12-15页 |
·菜豆金色花叶病毒属(Begomovirus)病毒的复制与转录 | 第15-16页 |
·菜豆金色花叶病毒属(Begomovirus)病毒伴随的小分子DNA | 第16-17页 |
·双生病毒的进化 | 第17-18页 |
2 启动子概述 | 第18-22页 |
·核心启动子 | 第18-19页 |
·转录因子结合区 | 第19-20页 |
·菜豆金色花叶病毒属(Begomovirus)病毒启动子研究进展 | 第20-22页 |
3 AC5/C5蛋白的研究进展 | 第22-24页 |
4 立题依据 | 第24-26页 |
第二章 材料与方法 | 第26-38页 |
1 材料 | 第26-27页 |
·毒源 | 第26页 |
·供试昆虫及植物寄主及免疫用家兔 | 第26页 |
·菌株和质粒 | 第26页 |
·试剂 | 第26-27页 |
·引物设计及序列 | 第27页 |
·常用缓冲液的配制 | 第27页 |
2 方法 | 第27-38页 |
·CTAB法提取植物总DNA | 第27-28页 |
·PCR技术 | 第28-29页 |
·普通PCR反应 | 第28-29页 |
·高保真PCR反应 | 第29页 |
·PCR产物纯化 | 第29-30页 |
·DNA克隆技术 | 第30-32页 |
·连接反应 | 第30页 |
·大肠杆菌感受态细胞制备 | 第30-31页 |
·大肠杆菌感受态细胞转化 | 第31页 |
·重组质粒的提取与鉴定 | 第31-32页 |
·外源基因在大肠杆菌中的表达 | 第32页 |
·诱导表达 | 第32页 |
·SDS-PAGE | 第32页 |
·多克隆抗体制备 | 第32-33页 |
·融合蛋白抗血清的效价测定 | 第33-34页 |
·根癌农杆菌感受态细胞制备 | 第34页 |
·根癌农杆菌感受态细胞转化 | 第34页 |
·植物表达载体在烟草中的瞬时表达 | 第34-36页 |
·农杆菌制备 | 第34-35页 |
·浸润 | 第35页 |
·组织化学染色及细胞脱色 | 第35-36页 |
·由粉虱介导的供试植株的传毒实验 | 第36页 |
·DNA序列测定及分析 | 第36-38页 |
第三章 胜红蓟黄脉病毒福建烟草分离物F2的发现与鉴定 | 第38-47页 |
1 结果与分析 | 第38-44页 |
·田间病毒分离物的分子检测 | 第38-40页 |
·F2是胜红蓟黄脉病毒在福建烟草上的一个分离物 | 第40-43页 |
·F2的病毒基因组结构 | 第43-44页 |
2 讨论 | 第44-47页 |
第四章 F2分离物C5基因启动子的活性鉴定 | 第47-54页 |
1 结果与分析 | 第47-50页 |
·C5启动子的序列分析 | 第47-48页 |
·C5P部分启动子序列的PCR扩增与克隆 | 第48-49页 |
·以C5P为启动子的植物表达载体的构建 | 第49页 |
·以C5P为启动子的植物表达载体在烟草中的瞬时表达 | 第49-50页 |
·GUS活性的组织化学染色 | 第50页 |
2 讨论 | 第50-54页 |
第五章 F2 C5基因的克隆、原核表达及多克隆抗体的制备 | 第54-65页 |
1 结果与分析 | 第54-61页 |
·F2 C5基因的克隆 | 第54页 |
·原核表达载体pET-29a-C5的构建 | 第54-56页 |
·目的蛋白的诱导表达与抗体的制备 | 第56-57页 |
·融合蛋白制备抗血清的效价测定 | 第57页 |
·目的蛋白的生物信息学分析 | 第57-61页 |
2 讨论 | 第61-65页 |
第六章 胜红蓟黄脉病毒福建烟草分离物F2的粉虱传毒实验 | 第65-70页 |
1 结果与分析 | 第65-68页 |
·由粉虱介导的供试植株的传毒实验 | 第65-68页 |
·传毒后发病植株的PCR检测 | 第68页 |
2 讨论 | 第68-70页 |
全文小结 | 第70-72页 |
参考文献 | 第72-81页 |
附录A 常用术语缩写与中英文对照 | 第81-82页 |
附录B 实验用溶液及培养基配方 | 第82-85页 |
致谢 | 第85页 |