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胜红蓟黄脉病毒福建烟草分离物F2及其编码的C5基因的分子鉴定

目录第1-7页
摘要第7-9页
Abstract第9-11页
第一章 研究背景第11-26页
 1 双生病毒概述第11-18页
   ·双生病毒的分类第12页
   ·菜豆金色花叶病毒属(Begomovirus)的基因组结构及功能第12-15页
   ·菜豆金色花叶病毒属(Begomovirus)病毒的复制与转录第15-16页
   ·菜豆金色花叶病毒属(Begomovirus)病毒伴随的小分子DNA第16-17页
   ·双生病毒的进化第17-18页
 2 启动子概述第18-22页
   ·核心启动子第18-19页
   ·转录因子结合区第19-20页
   ·菜豆金色花叶病毒属(Begomovirus)病毒启动子研究进展第20-22页
 3 AC5/C5蛋白的研究进展第22-24页
 4 立题依据第24-26页
第二章 材料与方法第26-38页
 1 材料第26-27页
   ·毒源第26页
   ·供试昆虫及植物寄主及免疫用家兔第26页
   ·菌株和质粒第26页
   ·试剂第26-27页
   ·引物设计及序列第27页
   ·常用缓冲液的配制第27页
 2 方法第27-38页
   ·CTAB法提取植物总DNA第27-28页
   ·PCR技术第28-29页
     ·普通PCR反应第28-29页
     ·高保真PCR反应第29页
   ·PCR产物纯化第29-30页
   ·DNA克隆技术第30-32页
     ·连接反应第30页
     ·大肠杆菌感受态细胞制备第30-31页
     ·大肠杆菌感受态细胞转化第31页
     ·重组质粒的提取与鉴定第31-32页
   ·外源基因在大肠杆菌中的表达第32页
     ·诱导表达第32页
     ·SDS-PAGE第32页
   ·多克隆抗体制备第32-33页
   ·融合蛋白抗血清的效价测定第33-34页
   ·根癌农杆菌感受态细胞制备第34页
   ·根癌农杆菌感受态细胞转化第34页
   ·植物表达载体在烟草中的瞬时表达第34-36页
     ·农杆菌制备第34-35页
     ·浸润第35页
     ·组织化学染色及细胞脱色第35-36页
   ·由粉虱介导的供试植株的传毒实验第36页
   ·DNA序列测定及分析第36-38页
第三章 胜红蓟黄脉病毒福建烟草分离物F2的发现与鉴定第38-47页
 1 结果与分析第38-44页
   ·田间病毒分离物的分子检测第38-40页
   ·F2是胜红蓟黄脉病毒在福建烟草上的一个分离物第40-43页
   ·F2的病毒基因组结构第43-44页
 2 讨论第44-47页
第四章 F2分离物C5基因启动子的活性鉴定第47-54页
 1 结果与分析第47-50页
   ·C5启动子的序列分析第47-48页
   ·C5P部分启动子序列的PCR扩增与克隆第48-49页
   ·以C5P为启动子的植物表达载体的构建第49页
   ·以C5P为启动子的植物表达载体在烟草中的瞬时表达第49-50页
   ·GUS活性的组织化学染色第50页
 2 讨论第50-54页
第五章 F2 C5基因的克隆、原核表达及多克隆抗体的制备第54-65页
 1 结果与分析第54-61页
   ·F2 C5基因的克隆第54页
   ·原核表达载体pET-29a-C5的构建第54-56页
   ·目的蛋白的诱导表达与抗体的制备第56-57页
   ·融合蛋白制备抗血清的效价测定第57页
   ·目的蛋白的生物信息学分析第57-61页
 2 讨论第61-65页
第六章 胜红蓟黄脉病毒福建烟草分离物F2的粉虱传毒实验第65-70页
 1 结果与分析第65-68页
   ·由粉虱介导的供试植株的传毒实验第65-68页
   ·传毒后发病植株的PCR检测第68页
 2 讨论第68-70页
全文小结第70-72页
参考文献第72-81页
附录A 常用术语缩写与中英文对照第81-82页
附录B 实验用溶液及培养基配方第82-85页
致谢第85页

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