| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-31页 |
| 1 畜禽抗病育种的研究进展 | 第14-19页 |
| ·抗病力的遗传基础 | 第14-15页 |
| ·抗病育种的途径 | 第15-17页 |
| ·仔猪腹泻抗性相关的候选基因 | 第17-18页 |
| ·展望 | 第18-19页 |
| 2 ETEC F4受体国内外研究现状 | 第19-23页 |
| ·ETEC概况 | 第19-21页 |
| ·ETEC F4受体的研究进展 | 第21-23页 |
| 3 微卫星标记及其应用 | 第23-25页 |
| ·微卫星的结构及遗传特性 | 第24页 |
| ·微卫星在家畜遗传育种中的应用 | 第24-25页 |
| 4 DDRT-PCR技术 | 第25-27页 |
| ·DDRT-PCR技术的原理和特点 | 第25-27页 |
| ·DDRT-PCR技术在方法学上的改进 | 第27页 |
| 5 实时荧光定量PCR技术 | 第27-30页 |
| ·实时荧光定量RT-PCR的定量原理 | 第27-29页 |
| ·实时荧光定量PCR的特点 | 第29页 |
| ·FQ-PCR反应方法的分类 | 第29-30页 |
| 6 研究目标与技术路线 | 第30-31页 |
| 第二章 不同猪种ETEC F4受体的微卫星标记遗传效应分析 | 第31-44页 |
| 1 材料 | 第31-33页 |
| ·实验材料 | 第31页 |
| ·主要仪器和设备 | 第31-32页 |
| ·主要药品和试剂 | 第32页 |
| ·试剂配制 | 第32-33页 |
| ·引物合成 | 第33页 |
| 2 实验方法 | 第33-37页 |
| ·猪基因组DNA的提取 | 第33-34页 |
| ·基因组DNA的浓度测定和质量检测 | 第34页 |
| ·小肠黏膜F4受体黏附型的判定 | 第34-35页 |
| ·微卫星PCR扩增 | 第35页 |
| ·PCR结果检测 | 第35页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第35-36页 |
| ·基因型分析 | 第36页 |
| ·数据分析 | 第36-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-42页 |
| ·黏附结果 | 第37-39页 |
| ·扩增产物聚丙烯酰胺凝胶电泳检测结果 | 第39页 |
| ·微卫星座位的多态性 | 第39-41页 |
| ·微卫星座位基因型与F4受体粘附表型的关系 | 第41-42页 |
| 4 讨论 | 第42-43页 |
| ·F4受体黏附型检测方法 | 第42页 |
| ·微卫星座位基因型与F4受体粘附表型的关系 | 第42-43页 |
| 5 小结 | 第43-44页 |
| 第三章 应用DDRT-PCR技术筛选猪小肠和脾脏差异表达基因 | 第44-76页 |
| 1 材料 | 第44-47页 |
| ·实验动物 | 第44页 |
| ·组织样 | 第44页 |
| ·实验试剂 | 第44-47页 |
| 2 方法 | 第47-57页 |
| ·小肠黏膜F4受体黏附型的判定 | 第47页 |
| ·总RNA的提取与相关检测 | 第47-48页 |
| ·总RNA的DNase Ⅰ消化 | 第48-49页 |
| ·DDRT-PCR | 第49-54页 |
| ·克隆测序 | 第54-57页 |
| ·功能分析 | 第57页 |
| 3 结果与分析 | 第57-69页 |
| ·黏附结果 | 第57页 |
| ·样品总RNA的提取 | 第57页 |
| ·差异表达片段的筛选 | 第57-61页 |
| ·差异表达片段的克隆和测序 | 第61-62页 |
| ·差异表达片段的序列分析 | 第62-68页 |
| ·EST提交 | 第68-69页 |
| 4 讨论 | 第69-75页 |
| ·总RNA提取与反转录 | 第69页 |
| ·DDRT-PCR扩增产物的显示、回收、再扩增 | 第69-70页 |
| ·克隆相关问题 | 第70页 |
| ·用BLAST进行同源比对 | 第70-71页 |
| ·相关基因分析 | 第71-75页 |
| 5 小结 | 第75-76页 |
| 第四章 PBEF1、ATP281和HRH1基因的表达分析 | 第76-86页 |
| 1 试验材料 | 第76-77页 |
| ·试验动物 | 第76页 |
| ·酶和试剂 | 第76-77页 |
| ·主要仪器 | 第77页 |
| 2 试验方法 | 第77-80页 |
| ·引物和探针的设计与合成 | 第77页 |
| ·试验设计 | 第77-78页 |
| ·总RNA提取 | 第78页 |
| ·荧光定量PCR标准品的制备 | 第78-79页 |
| ·Real-time RT-PCR检测PBEF1、ATP281和HRH1基因的表达水平 | 第79-80页 |
| ·统计分析 | 第80页 |
| 3 结果与分析 | 第80-84页 |
| ·实时荧光定量PCR标准曲线的建立 | 第80-81页 |
| ·脾脏组织中PBEF1基因的表达 | 第81-82页 |
| ·小肠组织中ATP281和HRH1基因的表达 | 第82-84页 |
| 4 讨论 | 第84-85页 |
| 5 小结 | 第85-86页 |
| 第五章 结论 | 第86-88页 |
| 1、主要研究成果 | 第86-87页 |
| 2、创新之处 | 第87页 |
| 3、展望 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-101页 |
| 附录 | 第101-111页 |
| 附录A:部分克隆片断序列峰型图 | 第101-105页 |
| 附录B:登录的EST结果 | 第105-109页 |
| 附录C 英文缩略词中英文全称 | 第109-110页 |
| 附录D:研究中常用试剂的配法 | 第110-111页 |
| 致谢 | 第111-113页 |
| 作者简介 | 第113-114页 |
