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板蓝根根腐病病原鉴定及拮抗微生物的筛选

摘要第1-5页
Abstract第5-7页
目录第7-10页
1 引言第10-15页
   ·板蓝根分类地位第10页
   ·板蓝根病害的发生与症状第10-11页
   ·植物根腐病病原菌第11-12页
   ·镰刀菌的分类研究第12-13页
   ·丝核菌的分类研究第13-14页
   ·ITS序列在真菌鉴定中的应用第14页
   ·根部病害拮抗微生物的研究概况第14-15页
2 材料和方法第15-29页
   ·试验材料及仪器第15-16页
     ·板蓝根根腐病样品采集第15页
     ·供试培养基第15页
     ·供试试剂第15-16页
     ·仪器设备第16页
   ·板蓝根根腐病菌的分离、纯化第16-17页
   ·分离物致病性测定第17-18页
     ·寄主植物的准备第17页
     ·接种物的准备第17页
     ·接种方法第17-18页
     ·病害统计方法第18页
   ·板蓝根根腐病菌的形态鉴定第18-19页
     ·镰刀菌的鉴定第18-19页
     ·丝核菌的鉴定第19页
   ·板蓝根根腐病菌的ITS序列分析第19-23页
     ·菌丝体培养及收集第19页
     ·DNA提取第19-20页
     ·琼脂糖凝胶电泳检测第20页
     ·rDNA ITS片段的PCR扩增第20-21页
     ·PCR扩增产物的纯化第21页
     ·感受态细胞的制备第21-22页
     ·DNA片段的克隆第22页
     ·转化菌落的转种培养及阳性克隆的检测第22-23页
     ·ITS片段的测序及序列分析第23页
   ·病原生物学特性第23-24页
     ·不同温度对菌丝生长、产孢量和孢子萌发的影响第23页
     ·不同pH值对菌丝生长、产孢量和孢子萌发的影响第23页
     ·不同碳源对菌丝生长及产孢量的影响第23-24页
     ·不同氮源对菌丝生长及产孢量的影响第24页
     ·相对湿度对分生孢子萌发的影响第24页
     ·分生孢子致死温度的测定第24页
   ·板蓝根根腐病菌拮抗微生物的筛选第24-29页
     ·土壤标样采集第24页
     ·土壤微生物的初筛第24-25页
     ·拮抗菌的分离纯化第25页
     ·抑菌效果测定第25页
     ·拮抗菌无菌发酵液的抑菌效果第25-26页
     ·拮抗菌株B4228和A4075的抑菌谱测试第26页
     ·拮抗微生物菌株的鉴定第26-29页
3 结果与分析第29-54页
   ·病原菌分离结果第29页
   ·分离物的致病性测定第29-30页
   ·板蓝根根腐病菌的形态鉴定第30-33页
   ·ITS序列分析第33-41页
     ·DNA的检测第33-34页
     ·ITS片段的扩增第34页
     ·扩增产物的纯化第34-35页
     ·DNA片段的克隆第35-36页
     ·四个菌株的分子鉴定结果第36-41页
   ·板蓝根根腐病菌生物学特性研究第41-47页
     ·温度对病原菌生长、产孢量及孢子萌发的影响第41-43页
     ·pH值对菌丝生长、产孢量和孢子萌发的影响第43-44页
     ·碳源对菌丝生长及产孢量的影响第44-45页
     ·氮源对菌丝生长和产孢量的影响第45页
     ·相对湿度对菌株 P1、P4、P5分生孢子萌发的影响第45-46页
     ·分生孢子致死温度测定第46-47页
   ·板蓝根根腐病菌拮抗微生物的筛选第47-54页
     ·拮抗微生物的初筛第47页
     ·拮抗菌的复筛第47-49页
     ·拮抗菌抑菌谱测定第49-50页
     ·拮抗微生物菌株B4228培养性状的观察第50页
     ·拮抗微生物染色观察第50-54页
4 讨论第54-57页
   ·板蓝根根腐病与病原菌鉴定第54页
   ·接种技术第54-55页
   ·核糖体DNA ITS序列在真菌鉴定中的应用第55页
   ·板蓝根根腐病菌的生物学特性第55-56页
   ·拮抗微生物的筛选第56-57页
5 结论第57-58页
   ·板蓝根根腐病的病原第57页
   ·回接方法的研究第57页
   ·生物学特性研究第57页
   ·拮抗微生物的筛选第57-58页
参考文献第58-64页
致谢第64-65页
附录第65-66页
 附录1 染色方法第65-66页
 附录2 板蓝根根腐病症状照片第66页

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