| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 1 绪论 | 第11-35页 |
| ·引言 | 第11-12页 |
| ·新城疫病毒的一般特征 | 第12-15页 |
| ·新城疫病毒的分类地位、形态及理化特性 | 第12-13页 |
| ·NDV的生物学活性 | 第13-14页 |
| ·NDV的培养特性 | 第14页 |
| ·NDV的致病性 | 第14-15页 |
| ·NDV蛋白的分子结构及其与致病性的关系 | 第15-26页 |
| ·NDV蛋白的分子结构 | 第15-24页 |
| ·NDV致病性的分子基础 | 第24-26页 |
| ·NDV的基因型 | 第26-29页 |
| ·ND疫苗的研究进展 | 第29-33页 |
| ·常规疫苗 | 第29-30页 |
| ·利用反向遗传操作技术制备疫苗 | 第30-31页 |
| ·基因工程疫苗 | 第31-33页 |
| ·IL-18作为佐剂的研究进展 | 第33-34页 |
| ·研究的目的和意义 | 第34-35页 |
| 2 材料与方法 | 第35-47页 |
| ·实验材料 | 第35-36页 |
| ·病毒 | 第35页 |
| ·鸡胚和鸡 | 第35页 |
| ·菌种和质粒 | 第35页 |
| ·辣根过氧化物酶(HRP)标记的IgG抗体 | 第35页 |
| ·ELISA实验用抗原及血清 | 第35页 |
| ·主要试剂 | 第35-36页 |
| ·主要仪器设备 | 第36页 |
| ·实验方法 | 第36-47页 |
| ·病毒的培养 | 第36页 |
| ·NDV RNA的提取 | 第36页 |
| ·NDV F_(48)E_9、NDV GX-2、NDV La Sota、NDV A_4、NDV V_4株HN部分基因和mChIL-18 cDNA片段扩增、克隆和序列测定 | 第36-41页 |
| ·NDVF_(48)E_9、NDVGX-2、NDVLaSota、NDVA_4、NDVV_4株HN部分基因和mChIL-18成熟肽蛋白的表达 | 第41-43页 |
| ·纯化多肽的免疫活性检测 | 第43-47页 |
| 3 实验结果与分析 | 第47-60页 |
| ·NDV各毒株HN部分基因及mChIL-18片段的扩增 | 第47页 |
| ·NDV各毒株HN部分基因及mChIL-18基因原核表达载体的构建 | 第47-48页 |
| ·目的蛋白的表达及抗原性分析 | 第48-60页 |
| ·目的蛋白的表达及鉴定 | 第48-49页 |
| ·目的蛋白最佳表达条件的优化 | 第49-50页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第50-52页 |
| ·目的蛋白的Western Blot活性检测及比较 | 第52-55页 |
| ·间接ELISA检测纯化多肽的免疫原性检测及活性比较 | 第55-60页 |
| 4 讨论 | 第60-69页 |
| ·实验毒株的选择依据 | 第61-62页 |
| ·NDV各毒株的HN部分基因及mChIL-18的克隆与序列分析 | 第62-64页 |
| ·NDV 5毒株的HN部分基因的序列分析 | 第62-63页 |
| ·表达载体的选择 | 第63-64页 |
| ·NDV各毒株的HN部分基因及mChIL-18基因目的蛋白的获得 | 第64-66页 |
| ·诱导表达条件的选择 | 第64-65页 |
| ·表达蛋白的纯化与复性 | 第65-66页 |
| ·Western Blot活性鉴定 | 第66-67页 |
| ·免疫活性鉴定 | 第67-69页 |
| 结论 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-81页 |
| 附录 试验主要试剂的配制 | 第81-84页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第84-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
