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人细小病毒B19抗体检测方法的建立

中文摘要第1-8页
Abstract第8-11页
缩略语第11-13页
文献综述第13-19页
 1. 细小病毒B19 的生物学特性第13-15页
 2. 细小病毒B19 的流行病学及临床表现第15-16页
 3. B19 病毒的检测第16-17页
 4. 国内外研究现状第17-19页
第一部分 B19 病毒VP2 蛋白的制备第19-49页
 1. 实验材料第19页
 2. 实验方法第19-36页
   ·B19 病毒VP2 蛋白的原核表达第19-33页
     ·质粒pMD-VP2N 中VP2 基因密码子的优化第20-26页
     ·原核表达载体的构建第26-28页
     ·VP2 蛋白的原核表达第28-29页
     ·SDS-PAGE 及Western blotting 鉴定VP2 蛋白的表达第29-31页
     ·VP2 蛋白的纯化第31-32页
     ·VP2 蛋白的复性第32-33页
   ·B19 病毒VP2 蛋白的真核表达第33-36页
     ·携带VP2 基因的真核表达载体Ad5-VP2 的构建第33-35页
     ·VP2 在293 细胞中的表达及鉴定第35-36页
 3. 结果第36-46页
   ·VP2 基因密码子的优化第36-37页
   ·合成的opt-VP2 基因中突变碱基的修复第37-38页
   ·原核表达载体的构建第38-39页
     ·pET30a(+)-VP2 质粒的构建第38-39页
     ·pET44a(+)-VP2 质粒的构建第39页
   ·VP2 蛋白的原核表达及纯化第39-41页
     ·不含His 标签的VP2 蛋白的表达及纯化第39-41页
     ·含His 标签的VP2 蛋白的表达及纯化第41页
   ·VP2 蛋白的复性第41-43页
   ·穿梭质粒shuttle-VP2 的构建第43-44页
   ·重组腺病毒Ad5-VP2 的制备第44-45页
   ·重组腺病毒Ad5-VP2 的制备及VP2 在293 细胞中的表达及鉴定第45-46页
 4. 讨论第46-48页
 5. 小结第48-49页
第二部分 人细小病毒B19 抗体检测方法的初步建立第49-66页
 1. 实验材料第49页
 2. 实验方法第49-55页
   ·血清中B19 IgG 检测方法的初步建立第49-52页
     ·实验条件的确定第49-52页
     ·IgG 抗体检测方法的建立第52页
   ·血清中B19 IgM 检测方法的初步建立第52-55页
     ·实验条件的确定第53页
     ·IgM 抗体检测方法的建立第53-55页
 3. 结果第55-63页
   ·血清中B19 IgG 检测方法的初步建立第55-59页
     ·山羊抗人IgG-HRP 稀释比例的确定第55页
     ·抗原包被浓度及封闭液成分的确定第55-56页
     ·IgG 抗体检测方法的建立第56-59页
   ·血清中B19 IgM 检测方法的初步建立第59-63页
     ·兔抗人VP2-HRP 的稀释比例进行确定第59页
     ·IgM 抗体检测方法的建立第59-63页
 4. 讨论第63-65页
 5. 小结第65-66页
全文总结第66-67页
参考文献第67-71页
攻读硕士学位期间论文发表情况第71-72页
致谢第72-73页
附录第73-77页

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