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人类心脏发育与疾病候选基因LBH的相互作用蛋白的鉴定

中文摘要第1-5页
英文摘要第5-9页
1 引言及文献综述第9-27页
   ·心脏发育的基因控制第9-19页
     ·心脏发育与转录因子第10-15页
     ·MAPK信号途径与心脏发育第15-19页
   ·心肌病及其分子机制简述第19-25页
     ·小分子热激蛋白αB-crystallin(CRYAB)与心肌细胞凋亡及心肌病的关系第22-25页
     ·肌动蛋白Titin-Cap(Tcap)与心肌病及其在肌细胞中的分子机制第25页
   ·LBH与心脏病的关系第25-27页
2 材料与方法第27-43页
   ·材料第27-30页
     ·酶类和试剂盒第27-28页
     ·菌株和质粒第28页
     ·其他试剂第28页
     ·主要仪器设备第28-29页
     ·生物信息学分析的主要软件与数据库第29-30页
   ·方法第30-43页
     ·基因ORF的克隆及各种表达载体的构建第30-34页
     ·酵母双杂交第34-37页
     ·GST-LBH融合蛋白的表达与纯化第37-38页
     ·LBH蛋白多克隆抗体的制备第38-40页
     ·哺乳动物细胞双杂交分析第40页
     ·GST Pull-Down分析第40-41页
     ·免疫共沉淀第41页
     ·亚细胞共定位第41-42页
     ·荧光报告基因分析第42-43页
3 结果与讨论第43-64页
   ·人类LBH基因的克隆及各表达载体的构建第43-49页
   ·酵母双杂交筛选LBH相互作用蛋白第49-52页
   ·LBH蛋白的原核表达纯化及多克隆抗体制备第52-54页
   ·LBH与αB-crystallin的相互作用第54-61页
     ·哺乳动物细胞双杂交分析LBH与αB-crystallin的相互作用第54-55页
     ·GST-Pull-down证明LBH和αB-crystallin在体外发生相互作用第55-56页
     ·免疫共沉淀证明LBH和αB-crystallin在体内发生相互作用第56-57页
     ·LBH和αB-crystallin的亚细胞共定位第57-58页
     ·LBH和αB-crystallin共同调节p53,p21的活性第58-61页
   ·LBH与Tcap的相互作用第61-64页
     ·哺乳动物细胞双杂交分析LBH与Tcap的相互作用第61页
     ·GST-Pull-down证明LBH和Tcap在体外发生相互作用第61-62页
     ·免疫共沉淀证明LBH和Tcap在体内发生相互作用第62-63页
     ·LBH和Tcap的亚细胞共定位第63-64页
结语第64-67页
参考文献第67-77页
附录一 专业名词缩写词简表第77-78页
附录二 攻读学位期间发表的学术论文和综述第78-79页
致谢第79-80页

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