中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-9页 |
1 引言及文献综述 | 第9-27页 |
·心脏发育的基因控制 | 第9-19页 |
·心脏发育与转录因子 | 第10-15页 |
·MAPK信号途径与心脏发育 | 第15-19页 |
·心肌病及其分子机制简述 | 第19-25页 |
·小分子热激蛋白αB-crystallin(CRYAB)与心肌细胞凋亡及心肌病的关系 | 第22-25页 |
·肌动蛋白Titin-Cap(Tcap)与心肌病及其在肌细胞中的分子机制 | 第25页 |
·LBH与心脏病的关系 | 第25-27页 |
2 材料与方法 | 第27-43页 |
·材料 | 第27-30页 |
·酶类和试剂盒 | 第27-28页 |
·菌株和质粒 | 第28页 |
·其他试剂 | 第28页 |
·主要仪器设备 | 第28-29页 |
·生物信息学分析的主要软件与数据库 | 第29-30页 |
·方法 | 第30-43页 |
·基因ORF的克隆及各种表达载体的构建 | 第30-34页 |
·酵母双杂交 | 第34-37页 |
·GST-LBH融合蛋白的表达与纯化 | 第37-38页 |
·LBH蛋白多克隆抗体的制备 | 第38-40页 |
·哺乳动物细胞双杂交分析 | 第40页 |
·GST Pull-Down分析 | 第40-41页 |
·免疫共沉淀 | 第41页 |
·亚细胞共定位 | 第41-42页 |
·荧光报告基因分析 | 第42-43页 |
3 结果与讨论 | 第43-64页 |
·人类LBH基因的克隆及各表达载体的构建 | 第43-49页 |
·酵母双杂交筛选LBH相互作用蛋白 | 第49-52页 |
·LBH蛋白的原核表达纯化及多克隆抗体制备 | 第52-54页 |
·LBH与αB-crystallin的相互作用 | 第54-61页 |
·哺乳动物细胞双杂交分析LBH与αB-crystallin的相互作用 | 第54-55页 |
·GST-Pull-down证明LBH和αB-crystallin在体外发生相互作用 | 第55-56页 |
·免疫共沉淀证明LBH和αB-crystallin在体内发生相互作用 | 第56-57页 |
·LBH和αB-crystallin的亚细胞共定位 | 第57-58页 |
·LBH和αB-crystallin共同调节p53,p21的活性 | 第58-61页 |
·LBH与Tcap的相互作用 | 第61-64页 |
·哺乳动物细胞双杂交分析LBH与Tcap的相互作用 | 第61页 |
·GST-Pull-down证明LBH和Tcap在体外发生相互作用 | 第61-62页 |
·免疫共沉淀证明LBH和Tcap在体内发生相互作用 | 第62-63页 |
·LBH和Tcap的亚细胞共定位 | 第63-64页 |
结语 | 第64-67页 |
参考文献 | 第67-77页 |
附录一 专业名词缩写词简表 | 第77-78页 |
附录二 攻读学位期间发表的学术论文和综述 | 第78-79页 |
致谢 | 第79-80页 |