| 中文摘要 | 第1-14页 |
| 英文摘要 | 第14-22页 |
| 英文缩写注解 | 第22-23页 |
| 引言 | 第23-28页 |
| 第一部分 DADS 诱导人胃癌细胞增殖抑制、周期阻滞与分化 | 第28-54页 |
| 1. 材料与方法 | 第28-34页 |
| ·细胞 | 第28页 |
| ·主要试剂(盒) | 第28-29页 |
| ·主要仪器和设备 | 第29页 |
| ·方法 | 第29-34页 |
| ·体外细胞培养 | 第29页 |
| ·药物处理 | 第29-30页 |
| ·MTT 比色实验 | 第30页 |
| ·透射电子显微镜观察 | 第30页 |
| ·Con A 凝集性实验 | 第30-31页 |
| ·碱性磷酸酶(ALP)比活性测定 | 第31-32页 |
| ·细胞骨架蛋白的细胞化学染色 | 第32页 |
| ·细胞间缝隙连接通讯功能检查-划痕标记荧光染料示踪技术 | 第32-33页 |
| ·流式细胞仪检测 | 第33页 |
| ·免疫组化 | 第33页 |
| ·Western Blot | 第33页 |
| ·统计学处理 | 第33-34页 |
| 2. 结果 | 第34-48页 |
| ·MTT 实验结果 | 第34-35页 |
| ·电镜观察 | 第35-36页 |
| ·Con A 的凝集率 | 第36-37页 |
| ·碱性磷酸酶(ALP)比活性测定 | 第37-38页 |
| ·细胞骨架结构观察 | 第38-39页 |
| ·细胞间缝隙连接通讯功能检查-划痕标记荧光染料示踪技术 | 第39-40页 |
| ·流式细胞仪检测 | 第40-43页 |
| ·免疫组织化学 | 第43-45页 |
| ·DADS 诱导 MGC03 细胞磷酸化与总 ERK 表达 | 第45-48页 |
| 3. 讨论 | 第48-53页 |
| 4. 小结 | 第53-54页 |
| 第二部分 DADS 对人胃癌 MGC803 和 BGC823 细胞 G_2/M 期检查点激酶通路的影响 | 第54-76页 |
| 1.材料和方法 | 第54-59页 |
| ·细胞 | 第54页 |
| ·主要试剂(盒) | 第54-55页 |
| ·主要仪器和设备 | 第55-56页 |
| ·方法 | 第56-59页 |
| ·体外细胞培养 | 第56页 |
| ·药物处理 | 第56页 |
| ·RT-PCR | 第56-58页 |
| ·Western blot | 第58页 |
| ·免疫共沉淀 | 第58页 |
| ·统计分析 | 第58-59页 |
| 2. 结果 | 第59-71页 |
| ·RT-PCR 检测Chk1 和Chk2 在mRNA 水平的改变 | 第59-61页 |
| ·人胃癌MGC803 和BGC823 细胞Total RNA 鉴定 | 第59页 |
| ·RT-PCR 检测表达基因 | 第59-61页 |
| ·Western blot | 第61-69页 |
| ·DADS 诱导 MGC803 和 BGC823 细胞 Chk1 和磷酸化 Chk1 表达 | 第61-63页 |
| ·DADS 诱导 MGC803 和 BGC823 细胞 Chk2 和磷酸化Chk2 表达 | 第63-65页 |
| ·DADS 诱导BGC823 细胞Chk 下游分子Cdc25C、cyclin 81 的表达 | 第65-67页 |
| ·DADS 诱导 MGC803 和 BGC823 细胞 ATR 和磷酸化 ATR 表达 | 第67-69页 |
| ·免疫共沉淀检测 Chk1、Chk2 与 Cdc25C 结合 | 第69-71页 |
| 3. 讨论 | 第71-75页 |
| 4. 小结 | 第75-76页 |
| 第三部分 Chk1 和 Chk2 基因沉默对 DADS G_2/M 期阻滞作用及检查点激酶通路的影响 | 第76-98页 |
| 1. 材料和方法 | 第76-83页 |
| ·细胞 | 第76页 |
| ·主要试剂(盒) | 第76-77页 |
| ·主要仪器和设备 | 第77页 |
| ·实验图像和数据分析用软件 | 第77-78页 |
| ·方法 | 第78-83页 |
| ·体外细胞培养 | 第78页 |
| ·RNAi 干扰及转染实验 | 第78页 |
| ·实时荧光定量 PCR | 第78-82页 |
| ·Western Blot | 第82页 |
| ·MTT 比色实验 | 第82页 |
| ·流式细胞仪检测 | 第82页 |
| ·统计分析 | 第82-83页 |
| 2. 结果 | 第83-96页 |
| ·实时荧光定量PCR 检测RNAi 后Chk1 和Chk2 mRNA 表达的改变 | 第83-87页 |
| ·Chk1 和Chk2 RNAi 后Chk1 和Chk2 蛋白表达的改变 | 第87-89页 |
| ·Chk1 、Chk2 基因沉默后MTT 比色实验结果 | 第89-92页 |
| ·干扰后细胞周期的改变 | 第92-94页 |
| ·Chk1 和Chk2 RNAi 后下游蛋白表达的改变 | 第94-96页 |
| 3. 讨论 | 第96-97页 |
| 4. 小结 | 第97-98页 |
| 结论 | 第98-99页 |
| 参考文献 | 第99-112页 |
| 综述一 | 第112-128页 |
| 综述二 | 第128-140页 |
| 攻读博士期间的主要科研成果 | 第140-141页 |
| 致谢 | 第141页 |